国家自然科学基金(31271841)
- 作品数：21 被引量：100H指数：7
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- 超高压对木瓜蛋白酶构象及酶活力的影响被引量：7
- 2015年
- 为研究超高压对木瓜蛋白酶构象变化与酶活力的影响,本研究利用红外光谱法和荧光光谱法对木瓜蛋白酶经超高压处理后的结构变化及特定氨基酸微环境变化进行了分析。结果表明:与常压相比,超高压处理对木瓜蛋白酶活力均有显著影响(P<0.05)。其中,200 MPa、37℃、20 min处理时,酶活力在所选处理范围内达到最大,较常压下的酶活力提高了6.8%;红外光谱结果表明:超高压处理后,木瓜蛋白酶二级结构变化与酶活力变化相关性较差;荧光光谱结果显示:200 MPa、37℃处理木瓜蛋白酶20 min,228 nm波长激发后木瓜蛋白酶的外源性荧光强度达到最低(2 023),荧光强度变化与酶活力变化规律有良好的相关性。因此,木瓜蛋白酶活性变化与疏水性氨基酸的暴露程度有关,暴露程度越小,酶活力越大。
- 刘平胡志和吴子健薛璐王凤玲
- 关键词：木瓜蛋白酶酶活力空间构象荧光光谱
- 超高压结合酶法消减南美白对虾虾仁的致敏性被引量：7
- 2016年
- 以南美白对虾虾仁为原料,研究超高压结合酶法对虾仁致敏性的消减效果。将南美白对虾去头、尾、壳、肠线后,采用超高压法和超高压结合酶法消减其致敏性,用间接酶联免疫吸附法检测致敏性消减效果,确定消减条件。结果表明:采用超高压法处理最佳条件为压力600 MPa、温度40℃、保压时间30 min,此条件下消减率为45.66%;超高压结合胰蛋白酶法最佳条件为压力200 MPa、温度40℃、保压时间30 min、胰蛋白酶加酶量3 000 U/mg,此条件下消减率为95.27%。由此可见,超高压法对虾仁致敏性有消减作用,超高压结合酶法对虾仁致敏性消减的效果更好。
- 贾莹胡志和
- 关键词：南美白对虾胰蛋白酶
- 超高压处理对凡纳滨对虾原肌球蛋白构象的影响被引量：3
- 2016年
- 以凡纳滨对虾的原肌球蛋白（tropomyosin,TM）为原料,研究不同超高压条件下引发的TM构象变化。采用压力0.1~800 MPa,处理时间10~40 min,温度10~37℃处理TM,圆二色光谱法检测其二级结构变化,荧光光度法检测其荧光强度变化,DNA Star Protean软件预测可塑性。结果显示,超高压处理对TM的二级结构无显著影响,不同超高压条件下TM三级结构有显著变化。在实验压力范围内,300 MPa处理的TM疏水性氨基酸暴露程度最小;700 MPa处理后暴露程度最高。经预测,TM的可塑性区域占总氨基酸序列的72.9%。因此,超高压条件下TM的二级结构稳定,三级结构变化较大,三级结构的变化可能与其可塑性区域的比例较高有关。
- 胡志和张晴青吴子健薛璐贾莹王星璇
- 关键词：原肌球蛋白超高压处理蛋白质结构圆二色光谱
- 加热对鸡卵类黏蛋白结构及其与IgG结合能力的影响被引量：1
- 2019年
- 鸡卵类黏蛋白(hen's egg ovomucoid,HOVM)是存在于鸡蛋卵清中的一种致敏蛋白,而热处理是常用的一种蛋制品的加工方式。通过间接酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法、圆二色谱法、8-苯胺-1-萘磺酸(8-anilino-1-naphthalenesulfonic acid,ANS)荧光探针法以及相关性分析法解释热处理对HOVM与免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)结合能力和结构的影响。结果表明:随着热处理强度(包括温度和时间)的增加,HOVM与IgG的结合能力不断下降,二级结构中的α-螺旋和β-折叠含量呈下降趋势,β-转角和无规则卷曲的含量呈上升趋势,表面疏水性指数在处理强度较低的情况下会提高,处理强度较高的情况下会下降,HOVM结合ANS后的最大荧光波长数(λmax)出现蓝移以及数值变化显示HOVM结构在热处理的作用下先变得松散,随后处理温度的攀升可能会进一步导致HOVM蛋白发生凝聚。
- 吴子健张允萍侯惠静李晓萌
- 关键词：表面疏水性
- 蛋白溶出与变性结合消减虾仁致敏性被引量：1
- 2018年
- 以南美白对虾虾仁为原料,采用高压下蛋白溶出与变性相结合的方法消减虾仁致敏性。在室温下采用不同压力(0.1~900.0 MPa)处理虾仁,确定适合虾仁蛋白溶出和变性的压力条件,并以虾仁蛋白致敏性的消减效果为指标确定虾仁的处理条件。结果显示,在200.0 MPa下保压处理30 min,有利于虾仁蛋白的溶出;当压力大于等于500.0 MPa时,可引起虾仁蛋白的变性;当压力在600.0 MPa时,虾仁蛋白的致敏性最小。将虾仁在200.0 MPa下处理30 min后,再用600.0 MPa处理30 min,虾仁的致敏性消减率大于80%。因此,高压处理可消减虾仁的致敏性,采用适合蛋白溶出与变性相结合的压力处理,能够提高虾仁致敏性消减效果。
- 王星璇胡志和柳澜昱王丽娟薛璐吴子健
- 关键词：超高静压蛋白变性致敏性
- 虾类原肌球蛋白提取和活性的保持
- 2015年
- 蛋白质分离纯化的主要目的是研究其结构和理化性质,因此在分离纯化过程中应尽量保持原有的结构和性质。本文主要综述了甲壳类动物的主要过敏原-原肌球蛋白(Tropomyosin,TM)的结构,以及影响其结构稳定性的因素。同时讨论了分离纯化的方法及条件对原肌球蛋白结构和过敏原活性的影响,为提取高纯度且保留原有结构和活性的原肌球蛋白提供参考。
- 李洋薛璐胡志和吴子健王丽娟
- 关键词：原肌球蛋白纯化
- 超高压引发虾仁致敏性及感官品质的变化被引量：4
- 2017年
- 以南美白对虾为原料,研究超高压处理引发虾仁致敏性及感官品质的变化。将南美白对虾虾仁采用不同压力(0.1~800 MPa)处理,用间接酶联免疫吸附法检测致敏性消减效果,确定消减条件,并分别用电子眼、电子鼻和电子舌检测其颜色、气味和滋味的变化。结果表明:在压力600 MPa、温度40℃的条件下处理30 min,能够较好地消减虾仁致敏性(消减率为45.66%)。另外,高压处理也引发虾仁感官品质的变化,与未处理虾仁相比,随着压力的升高,超高压处理的虾仁的主色色号及占比逐渐增大;主要气味成分乙酰吡嗪的含量逐渐降低,且二甲基三硫类化合物消失;咸味和酸味逐渐增加,而鲜味增加了32~34倍,并且出现了甜味和苦味;在相同压力下,甜味和苦味的强度值相近。因此,超高压处理对虾仁致敏性有消减作用,同时,会引起虾仁色、香、味等感官品质的变化。
- 贾莹胡志和
- 关键词：超高压电子眼电子鼻电子舌
- 超高压引发胰蛋白构象变化与酶活性间的关系被引量：15
- 2015年
- 采用超高压技术处理胰蛋白酶,改变其空间结构,研究酶空间结构变化与酶活力之间的关系。采用傅立叶红外光谱（FTIR）检测超高压处理后胰蛋白酶的二级结构变化;采用荧光光谱检测处理后胰蛋白酶的三级结构;酶活力的检测采用福林酚法。结果显示,与未处理的相比,在37℃,不同压力（100～600 MPa）条件处理20min,对胰蛋白酶活力影响显著（p〈0.05）。其中,300MPa处理,胰蛋白酶活力达到最大,较未处理的酶活提高了0.386倍。FTIR检测分析显示,300 MPa处理的胰蛋白酶,α-螺旋与β-转角的峰面积比值达到最大（2.749）;内源性荧光光谱检测结果显示,当激发波长为295nm,其荧光强度达到最高值（1 353）;激发波长为280nm,其荧光强度达到最高（4 262）;外源性荧光光谱结果显示,当激发波长为228nm,疏水氨基酸残基的荧光强度达到最高（2 022）;上述荧光强度的变化较0.1 MPa处理的胰蛋白酶均有显著差异（p〈0.05）。结论：超高压处理影响胰蛋白酶的空间结构及酶活性。其中,胰蛋白酶活性与α-螺旋和β-转角的峰面积的比值、色氨酸等疏水氨基酸及酪氨酸残基暴露程度有关。
- 刘平胡志和吴子健薛璐王凤玲
- 关键词：超高压胰蛋白酶酶活力红外光谱荧光光谱
- 超高压处理菠萝蛋白酶引发构象变化与酶活力的关系被引量：4
- 2014年
- 采用超高压处理菠萝蛋白酶,研究菠萝蛋白酶结构变化与酶活力的关系。采用傅里叶红外光谱(Fourier transform infrared spectrometer,FTIR)检测二级结构变化,荧光光谱检测三级结构变化,采用福林酚法测定酶活力。结果显示,与0.1 MPa相比,在37℃,不同压力(100~500 MPa)处理20 min,对菠萝蛋白酶活力均有显著影响(P<0.05)。200 MPa处理时,酶活力达到最大值(3 524 U/g),提高了8.29%。200 MPa处理后的菠萝蛋白酶,经傅里叶红外光谱分析结果显示,β-折叠含量比常压下增加了1.76倍。内源性荧光光谱结果显示,280 nm波长处激发,荧光强度达到最高4 934。因此,菠萝蛋白酶的活性与β-折叠的含量以及亲水性Typ残基的暴露程度有关。
- 刘平胡志和吴子健薛璐王凤玲
- 关键词：超高压菠萝蛋白酶酶活力构象荧光光谱
- 高压结合酶法消减南美白对虾虾仁致敏性被引量：6
- 2014年
- 以南美白对虾虾仁为原料,研究高压结合酶法对虾仁过敏原致敏性的消减作用。将南美白对虾去头去尾去壳去肠线后,采用超高压法和高压结合酶法消减其致敏性,用间接酶联免疫吸附法检测致敏性消减效果,确定消减条件。结果表明:采用超高压法处理,在压力100 MPa、温度25℃、保压时间15 min的条件下,虾仁过敏原的致敏性降低了67.09%,且与处理过程中蛋白溶出量有关;采用高压结合酶法处理,在盐水质量浓度1 g/100 mL、酶与虾仁质量比1∶130、压力450 MPa、温度40℃、保压时间55 min的条件下,虾仁过敏原的致敏性降低了86.58%。由此可见,高压处理对虾仁过敏原的致敏性有消减作用,高压结合酶法的消减效果更好。
- 张悦胡志和谢丹丹吴子健薛璐李洋
- 关键词：南美白对虾木瓜蛋白酶
