国家自然科学基金(31271863)
- 作品数：9 被引量：117H指数：7
- 相关作者：熊勇华赖卫华许恒毅山珊李萍更多>>
- 相关机构：南昌大学江西省疾病预防控制中心无锡中德伯尔生物技术有限公司更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划江西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程理学医药卫生更多>>
- 单核细胞增生李斯特菌单克隆抗体的制备与鉴定被引量：1
- 2013年
- 以单核细胞增生李斯特菌细胞碎片免疫BALB/c小鼠,间接ELISA法成功筛选获得2株稳定分泌抗LM的单克隆杂交瘤细胞株4A7、4H11。抗体效价为1∶160 000以及1∶20 000,亚型为IgG1、IgG2a,Dot-ELISA结果表明4A7和4H11单克隆抗体具有很好的属特异性,Western blot分析表明4A7、4H11抗体分别与单核细胞增生李斯特菌62 kDa以及32 kDa外膜蛋白抗原表位结合,胶体金免疫电镜实验进一步确证以上抗体可有效识别单核细胞增生李斯特菌细胞表面抗原。
- 董香梅孙吉昌刘春梅钟子清赖卫华魏华熊勇华
- 关键词：单核细胞增生李斯特菌单克隆抗体外膜蛋白
- 基于免疫磁分离的荧光微球免疫层析法检测猪霍乱沙门氏菌被引量：11
- 2017年
- 建立了基于免疫磁分离的荧光微球免疫层析法,检测猪霍乱沙门氏菌。待检样品经免疫磁分离富集和热洗脱处理后,用荧光微球免疫层析试纸条进行检测。每毫克纳米磁珠标记30μg抗体制备的免疫磁珠,对浓度为10~2~10~6CFU/mL的猪霍乱沙门氏菌的捕获率均大于90%,特异性好;在pH=6时,以300μg/mg猪霍乱沙门氏菌单抗11D8-D4标记荧光微球,制备免疫荧光微球;以2.0 mg/mL猪霍乱沙门氏菌单抗5F11-B11喷涂检测线(T线),以1.0 mg/mL驴抗鼠IgG喷涂质控线(C线),制备免疫层析试纸条。采用建立的基于免疫磁分离的荧光微球免疫层析方法检测猪霍乱沙门氏菌,在PBS缓冲液中检出限为1.5×10~5CFU/mL,牛奶中检出限为7.6×10~5CFU/mL,与直接采用荧光微球免疫层析方法检测相比,检出限分别降低了10倍和200倍。本方法可有效富集牛奶中的沙门氏菌,避免了基质干扰,灵敏度大大提高,具有较好的应用前景。
- 黄震夏诗琪刘道峰刘成伟赖卫华
- 关键词：免疫层析猪霍乱沙门氏菌
- 姜科植物精油抑菌作用的研究进展被引量：19
- 2014年
- 姜科植物精油来源广泛,具有抗菌和抗氧化等多种生物活性,逐渐被广泛应用于食品防腐保鲜、化妆品、医药等领域。本文综述了不同产地、取材及提取方法所得姜科植物精油的主要成分和抑菌作用,分析了不同化学成分对其抑菌活性的影响,并总结了植物精油的抑菌机理,以期为探寻安全的天然抑菌剂提供参考。
- 李萍何丽华魏华朱江秦保国许恒毅
- 关键词：精油抑菌
- 磁性纳米材料在食源性致病菌分离中应用的研究进展被引量：13
- 2014年
- 食源性致病菌是影响食品安全的主要因素之一。食品中污染的致病菌数量通常较少,加上其基质复杂,常规分析方法常无法直接对致病菌进行高灵敏、高特异的检测。经过生物学修饰和功能化的磁性纳米材料,可特异性地识别食品基质中少量的致病菌,并通过磁场对靶细菌进行快速及高特异性的选择性分离,实现了食品样品中少量致病菌的特异性分离富集,达到了后续分析检测的纯度和数量。本文综述了磁性纳米材料在食源性致病菌分离富集中的研究进展。
- 黄小林许恒毅熊勇华曲锋杨林
- 关键词：磁性纳米材料食源性致病菌
- 流式细胞术在食源致病菌检测中应用的研究进展被引量：11
- 2013年
- 流式细胞术是能够用来快速检测液相中悬浮粒子多种物理特性的一种现代分析方法。因其具有分析速度快和灵敏度高等优点,该方法正逐渐被应用于食源致病菌的检测。本文介绍了流式细胞术的两个主要应用平台(流式细胞仪和Luminex系统)的工作原理和分析流程,并着重对近年来将流式细胞术用在食源致病菌检测中的相关研究进行了调研和综述,从食源致病菌全菌分析以及细菌核酸检测等方面进行了剖析,对该方法在食源致病菌检测中应用的前景作了展望。
- 李萍温平威许恒毅王远兴佟平王力均刘春梅
- 关键词：流式细胞术
- 纳米免疫磁珠富集单核增生李斯特菌被引量：15
- 2013年
- 比较抗体直接偶联、链霉亲和素-生物素介导偶联的免疫磁珠以及免疫磁珠的粒径对单增李斯特菌捕获效率的影响。结果表明:链霉亲和素-生物素介导偶联的免疫磁珠捕获效率约是直接偶联法的3倍;同时,磁珠粒径对捕获效率也有较大影响,当免疫磁珠用量为100μg时,180、350、1150nm的免疫磁珠捕获效率分别为95%、18%和9%。因此,采用链霉亲和素-生物素介导偶联的180nm免疫磁珠是一种低成本、易操作、高效率的单核增生李斯特菌富集方法。
- 钟子清熊勇华赖卫华许恒毅山珊陈奇谢芳余扬帆
- 量子点荧光微球免疫层析试纸条定量检测玉米中赭曲霉毒素A被引量：18
- 2015年
- 采用1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDC)法将抗赭曲霉毒素A(OTA)腹水与量子点荧光微球偶联制备荧光探针,以牛血清白蛋白-OTA偶联物及驴抗鼠二抗喷涂硝酸纤维膜形成试纸条检测线(T线)和质控线(C线),建立了基于T/C荧光强度(FI_T/FI_C)比值法免疫层析试纸条高灵敏度、快速定量检测玉米中OTA的新方法。量子点荧光微球试纸条定量检测OTA线性范围为0.05~1.0ng/mL(Y=0.259lnX+0.897,R^2=0.995),半数抑制浓度(IC_(50))为(0.215±0.023)ng/mL(n=5),玉米提取液中OTA的检出限为0.05 ng/mL,单个样品检测时间10min。加标回收实验表明,3个OTA加标浓度的平均回收率为107.2%-125.5%,相对标准偏差均小于10%。40个实际玉米样品检测结果表明,量子点荧光微球试纸条与酶联免疫吸附分析方法检测OTA的结果具有良好的相关性(R^2=0.975)。
- 周耀锋熊斯诚江湖段宏熊勇华Andrew Wang
- 关键词：赭曲霉毒素A
- 免疫磁分离结合胶体金免疫层析法快速检测大肠杆菌O157∶H7被引量：36
- 2013年
- 以抗大肠杆菌O157∶H7单克隆抗体偶联磁珠制得免疫磁珠;以胶体金标记的抗大肠杆菌O157∶H7单克隆抗体为标记抗体,抗大肠杆菌O157∶H7多克隆抗体和驴抗鼠二抗分别作为检测线和质控线成分制备胶体金免疫层析试纸条。将免疫磁珠分离和胶体金免疫层析法相结合应用于大肠杆菌O157∶H7的现场快速检测中。结果表明:1 mL 7.6×103CFU/mL菌液经过免疫磁珠分离富集后,用胶体金免疫层析法检测可得到阳性结果。对于10 CFU/g大肠杆菌O157∶H7污染的食品样本,经过6 h预增菌,免疫磁珠分离和胶体金试纸条检测72 min即可检出。本方法的建立对于食品中有害物质的现场快速检测具有重要意义。
- 崔希熊齐荣熊勇华山珊赖卫华
- 关键词：胶体金免疫层析大肠杆菌O157H7
- 基于细胞的抗单增李斯特菌单域重链抗体的筛选及鉴定被引量：1
- 2014年
- 【目的】获得针对单增李斯特菌的特异性单域重链抗体,并对筛选过程中特异性克隆的富集规律进行分析,为筛选具有种属特异性的噬菌体展示抗体提供参考。【方法】采用固相筛选技术,以热灭活的单增李斯特菌菌体为抗原,通过四轮常规筛选和一轮消减筛选,从驼源天然噬菌体展示文库中筛选针对单增李斯特菌的单域重链抗体。采用Phage-ELISA法,对后四轮筛选洗脱物中随机挑选的噬菌体进行鉴定,阳性克隆进行基因测序及结合特异性分析。通过多序列比对分析将获得的基因序列进行分组和统计。【结果】成功筛选到2株单增李斯特菌特异性的单域重链抗体。【结论】在优化的筛选条件下,基于全细胞的筛选方法能够获得特异性识别单增李斯特菌的单域重链抗体,消减筛选对于去除非特异性克隆是有效的和必要的。
- 陈奇万翠香涂追谭强来熊勇华陶勇
- 关键词：噬菌体抗体库单增李斯特菌
