国家自然科学基金(30371387)
- 作品数：6 被引量：46H指数：4
- 相关作者：李涛郭晏同冷希圣赵景明周迈更多>>
- 相关机构：北京大学北京积水潭医院北京民航总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 罗格列酮抑制肝星状细胞活化的作用机制研究被引量：3
- 2008年
- 目的探讨罗格列酮对大鼠肝星状细胞生物学特性的影响是否是通过PPARγ起作用。方法设立10μmol/L罗格列酮组、GW9662加10μmol/L罗格列酮组、对照组、GW9662组。采用RT-PCR方法检测PPARγ及Ⅰ型前胶原mRNA表达;用Western blot法检测PPARγ及Ⅰ型胶原蛋白表达;电泳迁移分析法(EMSA)检测PPARγ蛋白的结合活性;用免疫细胞化学方法测定α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的变化。结果10μmol/L罗格列酮组PPARγmRNA及蛋白表达显著高于其他各组(P<0.01),Ⅰ型前胶原mRNA及蛋白表达明显低于其他各组(P<0.01);10μmol/L罗格列酮组PPARγ蛋白结合活性最强,α-SMA表达明显低于其他组(P<0.05)。结论罗格列酮对大鼠肝星状细胞的影响是通过PPARγ起作用的。
- 郭晏同赵景明王欣周迈焦岗军钟朝辉李涛冷希圣
- 关键词：肝星状细胞PPARΓ罗格列酮肝纤维化
- PPARγ特异配体抑制肝星状细胞的活化被引量：3
- 2008年
- 目的研究不同浓度的过氧化物酶体增殖物活化的受体γ（peroxisome proliferator-activated receptor gamma，PPARγ）特异配体罗格列酮对肝星状细胞（hepatic stellate cell，HSC）生物学特性的影响，以探究其在肝星状细胞活化中的作用。方法设立对照组，3μM罗格列酮组，10μM罗格列酮组，20μM罗格列酮组。用MTT法检测细胞的增殖情况；采用RTPCR方法检测其中PPARγ、TGF-β1及Ⅰ型前胶原mRNA表达；用Westernblot法检测PPARγ、Ⅰ、Ⅲ型胶原及TGF-β1蛋白表达；用免疫细胞化学方法测定α-SMA表达的变化；ELISA法检测细胞培养上清中的Ⅰ型胶原表达的变化。结果（1）RT—PCR：20μM罗格列酮组或10μM罗格列酮组与3μM罗格列酮组或对照组相比，PPARγ mRNA表达显著增高（P〈0．01），Ⅰ型前胶原mRNA表达显著降低（P〈0．01）；20μM罗格列酮组与10μM罗格列酮组之间，3μM罗格列酮组与对照组之间，PPART和Ⅰ型前胶原mRNA的表达差异无显著性（P〉0．05）。而各组之间的TGF-β1 mRNA的差异无显著性意义（P〉0．05）。（2）Western blot：PPARγ及TGF-β1蛋白表达所得结果与RT—PCR结果相一致。Ⅰ型胶原表达与RT—PCRI型前胶原mRNA表达结果相一致。各组之间的Ⅲ型胶原表达差异无显著性意义（P〉0．05）。（3）免疫细胞化学：20μM罗格列酮组或10μM罗格列酮组与3μM罗格列酮组或对照组相比，α-SMA表达明显降低（P〈0．05）。20μM罗格列酮组与10μM罗格列酮组之间，3μM罗格列酮组与对照组之间，差异无显著性（P〉0．05）。（4）ELISA：20μM罗格列酮组或10μM罗格列酮组与3μM罗格列酮组或对照组相比，细胞的培养上清中Ⅰ型胶原表达明显降低（P〈0．01）。20μM罗格列酮组与10μM罗格列酮组之间，3μM罗格列酮组与对照组之间，差异无显著性（P〉0．05）。结论PPARγ配体罗格列酮能够在促进PPARγ的合成表达的同�
- 郭晏同赵景明柏楠朱峰周迈焦岗军钟朝辉李涛冷希圣
- 关键词：肝硬化配体罗格列酮肝星状细胞
- 过氧化物酶体增殖物激活受体γ配体对诱导大鼠肝癌的抑制作用被引量：5
- 2005年
- 过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferators-activated receptor gamma,PPAR γ)是一种核受体,与基因转录调节及脂类代谢有关.
- 郭晏同冷希圣赵景明蔺锡侯李涛朱继业
- 关键词：过氧化物酶体增殖物激活受体Γ鼠肝PPARΓ配体肝癌核受体细胞分化
- 过氧化物酶体增殖物激活受体γ配体抑制大鼠肝纤维化的实验研究被引量：4
- 2008年
- 目的研究过氧化物酶体增殖物激活受体γ（peroxisome prolifcrator activated receptorgamma，PPARγ）配体对大鼠肝纤维化的作用。方法将Wistar大鼠40只随机分为两组，对照组（20只）和罗格列酮组（20只）。所有动物使用饮水中加入质量比0．3‰硫代乙酰胺的方法制作肝纤维化模型。对照组喂饲普通颗粒饲料。罗格列酮组喂饲含200ppm罗格列酮的颗粒饲料。喂饲6个月后，用RT—PCR方法检测肝纤维化大鼠肝脏PPARγ、TGF—β1及Ⅰ型前胶原mRNA表达，用Western blot法检测PPARγ、TGF—β1、Ⅰ型胶原及α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达，用Van Gieson（VG）染色的方法检测肝组织切片的胶原表达情况。结果罗格列酮组与对照组相比，PPARγmRNA表达显著增强（t=6．93，P〈0．01），TGF—β1，mRNA（t=3．89，P〈0．01）和Ⅰ型前胶原mRNA表达显著降低（t=5．67，P〈0．01）。PPARγ、TGF—β1，及Ⅰ型胶原蛋白表达所得结果与RT—PCR结果相一致。罗格列酮组与对照组相比，α-SMA表达显著降低（t=3．12，P〈0．01）。罗格列酮组肝组织切片的胶原染色低于对照组（t=3．47，P〈0．01）。结论PPARγ配体能够抑制大鼠纤维化肝脏的胶原产生，在体内具有一定的抗肝纤维化作用。
- 郭晏同赵景明宋磊周迈焦岗军彭吉润李涛冷希圣
- 关键词：肝硬化胶原过氧化物酶体增殖物激活受体
- 罗格列酮抑制体外大鼠肝星状细胞活化被引量：4
- 2008年
- 目的探讨罗格列酮(PPARγ配体)对肝星状细胞(HSCs)作用的机制。方法将原代HSCs随机分为3组:对照组;TGF-β1(5μg/L)组;TGF-β1加10μmol/L罗格列酮组。加药后48h用RT-PCR法检测细胞Ⅰ型前胶原的表达。用Western blot方法检测细胞SMAD3、SMAD4、SMAD7、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原的表达。免疫荧光化学标记,共聚焦显微镜下观察α-SMA的表达。用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞的增殖。结果TGF-β1明显促进HSCs的增殖,促进HSCs表达Ⅰ型胶原和α-SMA(P<0.01);罗格列酮显著降低TGF-β1的作用(P<0.01)。各组细胞SMAD3、SMAD4、SMAD7的表达无明显差异。结论PPARγ配体可以抑制TGF-β1对HSCs的活化作用。
- 郭晏同赵景明宋磊周迈焦岗军李涛冷希圣
- 关键词：肝星状细胞PPARΓ肝纤维化
- 过氧化物酶体增殖物活化的受体γ特异配体罗格列酮对肝星状细胞生物学特性的影响被引量：29
- 2005年
- 目的 研究过氧化物酶体增殖物活化的受体γ(PPARγ)特异配体罗格列酮对肝星状细胞(HSC)PPARγ 表达以及对HSC生物学特性的影响。 方法 设立空白对照组、3μmol L罗格列酮组、10μmol L罗格列酮组;分别 用RT PCR、Western印迹、免疫细胞化学方法检测PPARγ的表达;用Western印迹和免疫细胞化学方法检测α 平滑肌 肌动蛋白(α SMA)及Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达;四甲基偶氮唑盐(methythiazolyltetrazolium,MTT)法检测细胞增殖;流式细胞 仪分析细胞凋亡。 结果 10μmol L罗格列酮组HSC的PPARγmRNA表达明显高于对照组(t=10.87,P<0.01), PPARγ蛋白表达也明显高于对照组(t=4.627,P<0.01);10μmol L罗格列酮组HSC的增殖活性显著低于对照组(t ≥5.542,P<0.01),其α SMA及Ⅰ型胶原表达明显低于对照组(t≥4.627,P<0.01),其凋亡发生率显著高于对照组 (χ2=16.682,P<0.01)。 结论 PPARγ特异配体罗格列酮通过增加PPARγ的表达,能够抑制激活的HSC表达α SMA及Ⅰ胶原,抑制激活的HSC增殖,诱导激活的HSC凋亡。
- 郭晏同冷希圣李涛宋盛晗秦致中熊亮发
- 关键词：过氧化物酶体增殖物罗格列酮WESTERN印迹免疫细胞化学方法四甲基偶氮唑盐流式细胞仪分析
