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天津市高等学校科技发展基金计划项目(20100135)

作品数：1 被引量：0H指数：0
相关作者：杨春波于敏杨博宇李筱荣更多>>
相关机构：天津医科大学天津医科大学眼科医院更多>>
发文基金：天津市高等学校科技发展基金计划项目国家自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白质
  • 1篇蛋白质类
  • 1篇人胚
  • 1篇人胚胎
  • 1篇人胚胎干细胞
  • 1篇色素上皮
  • 1篇色素上皮细胞
  • 1篇上皮
  • 1篇上皮细胞
  • 1篇视网膜
  • 1篇视网膜色素
  • 1篇视网膜色素上...
  • 1篇视网膜色素上...
  • 1篇受体
  • 1篇胚胎
  • 1篇胚胎干细胞
  • 1篇转化生长因子
  • 1篇转化生长因子...
  • 1篇网膜

机构

  • 1篇天津医科大学
  • 1篇天津医科大学...

作者

  • 1篇李筱荣
  • 1篇杨博宇
  • 1篇于敏
  • 1篇杨春波

传媒

  • 1篇中华眼底病杂...

年份

  • 1篇2014
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
转化生长因子-β受体抑制剂复合物C促进人胚胎干细胞向视网膜色素上皮细胞定向诱导
2014年
目的观察转化生长因子-β（TGF—B）受体抑制剂复合物C对人胚胎干细胞（hESC）向视网膜色素上皮（RPE）细胞定向诱导效率的影响。方法将H1hESC分为对照组和实验组。对照组在细胞过度融合后，以去除碱性成纤维细胞生长因子的血清替代物培养体系诱导RPE细胞定向分化。实验组于诱导分化前6d在培养体系中加入1μmol／l复合物C诱导分化第1、3、5周，采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测两组人类配对盒基因（PAX6）、小眼球相关转录因子（MITF）、细胞视黄醛结合蛋白（CRAI。BP）、RPE65mRNA的表达。将hESC来源的RPE（hESC—RPE）细胞分离纯化，采用RT—PCR、蛋白免疫印迹法（Westernblot）和细胞免疫荧光法对纯化的hESC-RPE细胞进行鉴定。结果诱导分化第4周，实验组肉眼可见色素团块，对照组无色素团块出现。将实验组的色素细胞分离纯化后，可见100％的细胞表现为多角形色素化。RT—PCR检测结果显示，实验组PAX6mRNA表达在诱导分化第1、3周显著高于对照组，差异有统计学意义（t=28．498、3．141，P〈0．05）；诱导分化第3、5周，实验组MITF（户8．866、10．111）、CRAlBP（t=5．293、5．394）和RPE65（t=9．263、9．504）的表达均明显高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。hESC-RPE细胞PAX6、MITF、CRALBP、RPE65mRNA表达均显著高于hESC（t=9．154、17．284、18．204、44．194）和ARPE-19（t=7．605、16．770、18．190、44．190）细胞，差异有统计学意义（P〈0．05）。Westernblot检测结果显示，hESC-RPE细胞高水平表达RPE标志蛋白PAX6、RPE65。荧光显微镜观察发现，hESC—RPE细胞表达RPE细胞特异性标志蛋白PAX6、紧密连接蛋白-1。结论TGF-I？受体抑制剂复合物C能显著提高hESC向RPE定向诱导效率。
杨博宇杨春波于敏李筱荣
关键词：胚胎干细胞视网膜色素上皮细胞
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