您的位置： 专家智库 > >

北京市自然科学基金(7092045)

作品数：13 被引量：50H指数：4
相关作者：陈德喜石英乔录新李宁徐斌更多>>
相关机构：首都医科大学附属北京佑安医院首都医科大学沈阳农业大学更多>>
发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金首都医学发展科研基金更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 13篇中文期刊文章

领域

  • 9篇医药卫生
  • 4篇生物学

主题

  • 4篇细胞
  • 4篇免疫缺陷
  • 3篇蛋白
  • 3篇人类免疫
  • 3篇人类免疫缺陷
  • 3篇自噬
  • 3篇ASPP2
  • 3篇病毒
  • 2篇调节蛋白
  • 2篇CCL3L1
  • 2篇DRAM
  • 2篇HIV-1
  • 2篇病毒相关
  • 2篇痴呆
  • 2篇痴呆症
  • 1篇凋亡
  • 1篇性细胞
  • 1篇药物
  • 1篇药物浓度
  • 1篇易感

机构

  • 12篇首都医科大学...
  • 3篇首都医科大学
  • 1篇沈阳农业大学

作者

  • 12篇陈德喜
  • 7篇石英
  • 4篇乔录新
  • 3篇吴昊
  • 3篇计云霞
  • 3篇徐斌
  • 3篇张玉林
  • 3篇宋凤丽
  • 3篇李宁
  • 2篇张彤
  • 2篇魏飞力
  • 2篇李莉
  • 2篇南萍
  • 2篇徐树莹
  • 2篇柳雅立
  • 2篇魏征
  • 2篇刘凯
  • 2篇刘宁
  • 1篇殷继明
  • 1篇丁渭

传媒

  • 2篇北京医学
  • 2篇中国生物化学...
  • 2篇首都医科大学...
  • 2篇科学技术与工...
  • 1篇中华内科杂志
  • 1篇东北农业大学...
  • 1篇国际流行病学...
  • 1篇现代生物医学...
  • 1篇中华临床感染...

年份

  • 1篇2013
  • 6篇2012
  • 1篇2011
  • 4篇2010
  • 1篇2009
共 13 条 记 录，以下是 1-10
全选 清除 导出
排序方式：
人类免疫缺陷病毒相关痴呆症的治疗
2012年
人类免疫缺陷病毒相关痴呆症（HAD）已成为HIV感染者重要的慢性并发症之一，严重威胁到病人的生命和生活质量。我们在详细叙述了该病的系统诊断^[1]的基础上，以下根据美国神经协会有关该病的诊治指南，结合最新国际研究成果重点阐述HAD的治疗。 一、治疗原则 HAD的治疗原则是：增加脑脊液药物浓度，
张玉林宋凤丽吴昊陈德喜
关键词：痴呆症慢性并发症诊治指南药物浓度
基于同尾酶技术构建CCL3L1基因串联重组质粒的方法被引量：4
2012年
目的:利用同尾酶技术将CCL3L1基因重复连续插入pcDNA6.2-GW/miR载体,构建含有CCL3L1基因串联体的重组质粒,实现小片段CCL3L1有效延长。方法:PCR扩增CCL3L1基因并在引物的两端设有同尾酶BamHI和BglII限制性内切酶位点,纯化PCR产物插入pMD18-T载体,阳性克隆命名为pMD18T-CCL3L1。BamHI和BglII双酶切pMD18T-CCL3L1和pcDNA6.2-GW/miR载体后将第一个CCL3L1片段插入pcDNA6.2-GW/miR载体命名为pcDNA6.2-CCL3L1-1。由于载体本身在BglII位点后带有XhoI酶切位点利用BamHI和XhoI切割pcDNA6.2-CCL3L1-1回收CCL3L1片段,BglII和XhoI切割pcDNA6.2-CCL3L1-1回收大片段做载体重组形成含有两个连续CCL3L1片段的质粒命名为pcDNA6.2-CCL3L1-2,重复此步骤可得到含有N个CCL3L1基因串联体的重组质粒pcDNA6.2-CCL3L1-X。结果:经酶切和测序证实成功构建含有4个CCL3L1基因串联体的重组质粒pcDNA6.2-CCL3L1-4,并同时产生含有1个和2个CCL3L1基因串联体的重组质粒。结论:利用同尾酶技术可以快速有效地构建CCL3L1基因串联重组质粒,实现目的片段的无限扩大,为小片段基因表达的研究奠定基础。
乔录新张世杰石英陈德喜
关键词：同尾酶CCL3L1
谷胱甘肽-S-转移酶-ASPP2融合蛋白的原核表达及纯化
2009年
为表达并初步纯化包含ASPP2活性区域和不包含其活性区域的谷胱甘肽-S-转移酶(GST)-ASPP2融合蛋白。采用PCR扩增两段ASPP2基因短片段,在引物5'端和3'端分别引入BamHⅠ和EcoRⅠ酶切位点,将其克隆进入原核表达载体pGEX-4T-1;异丙基硫代-半乳糖苷(IPTG)诱导重组质粒pGEX-4T-1-ASPP2在大肠杆菌BL21(DE3)中表达同时带有谷胱甘肽-S-转移酶(GST)标签的融合蛋白;超声法裂解大肠杆菌,应用谷胱苷肽琼脂糖树脂纯化可溶的GST-ASPP2融合蛋白;通过SDS-PAGE和Western blot验证GST-ASPP2融合蛋白的表达。结果表明,已成功的构建了GST-ASPP2小片段融合蛋白表达载体,在Western blot分析中,4个蛋白条带均能被鼠抗GST单克隆抗体特异性识别,条带所在位置和GST-ASPP2的分子质量相符。构建了GST-ASPP2重组质粒,在大肠杆菌BL21中高效表达GST-ASPP2融合蛋白,为进一步研究ASPP2全长,N-末端和C-末端生理意义奠定了基础。
南萍李秉超柳雅立石英陈德喜
关键词：ASPP2谷胱甘肽-S-转移酶融合蛋白WESTERNBLOT
甲型H1N1流感超敏感诊断方法的建立及优化
2010年
利用几种助沉剂和核酸纯化方法富集病毒RNA,建立甲型H1N1流感超敏感诊断方法。收集31份甲型H1N1流感确诊病人提取的病毒RNA,稀释至1000分之一倍后分别应用酵母tRNA、糖原、AcrylCarrier助沉剂和磁珠、硅胶颗粒和离心柱的9种组合进行病毒RNA的富集,富集后分别进行RealtimePCR检测。并对检测结果进行统计学分析。利用几种助沉剂和核酸纯化方法的组合时,发现磁珠+AcrylCarrier助沉剂方法是最佳的核酸富集方法,能够大大提高病毒核酸的检出效率。建立了甲型H1N1流感超敏感诊断方法,该方法能够大大提高甲型H1N1流感的检出率。
计云霞刘宁石英魏飞力魏征陈德喜
关键词：甲型H1N1流感
ASPP2以p53非依赖形式促进自噬引起Hep3B细胞凋亡被引量：4
2013年
p53凋亡刺激蛋白2(apoptosis stimulating protein 2 of p53,ASPP2)能特异性地与p53蛋白结合并增强其促凋亡的功能,进而发挥抗肿瘤作用.本室前期研究发现,ASPP2可以通过p53-DRAM-自噬途径诱导细胞凋亡.在本研究中,利用ASPP2腺病毒感染Hep3B细胞(p53缺陷型肝癌细胞系)并用甲基磺酸(MMS)处理后;Calcein AM/PI和M30染色检测细胞凋亡;GFP-LC3质粒转染细胞后检测自噬;荧光定量PCR和免疫印迹检测自噬基因表达.结果表明,ASPP2在p53缺陷的Hep3B细胞内可诱导发生凋亡;在MMS存在和缺失条件下,Adr-ASPP2均引起自噬体水平升高及自噬基因的表达增加,且MMS协同Adr-ASPP2能使自噬水平增加;进一步用VPS34 siRNA和DRAM siRNA抑制自噬发现,细胞凋亡水平下降,说明由Adr-ASPP2诱发经损伤相关自噬调节蛋白(DRAM)介导的自噬参与了肝癌细胞系凋亡的发生.综上结果表明,ASPP2可以通过非p53依赖的DRAM介导自噬,并促进肝癌细胞凋亡.该研究可为肝癌的基因治疗提供新的思路.
刘凯王安娜姜涛温韬殷继明刘道洁乔录新石英李莉李宁陈德喜
关键词：自噬
中国HIV-1感染人群神经认知损害初步筛查被引量：16
2012年
目的初步调查中国人类免疫缺陷病毒-1(human immunodeficiency virus 1,HIV-1)感染者神经认知损害情况。方法通过国际HIV痴呆量表和神经心理评估,结合症状评分和临床相关资料对我国HIV-1感染人群HIV相关神经认知障碍(HIV-1associated neurocognitive disorders,HAND)患病情况进行初步调查。结果①我国HIV-1感染人群HAND患病率为37%;②认知障碍是主要症状,其次是行为异常;③脑脊液(cerebrospinal fluid,CSF)病毒载量与外周血病毒载量密切相关,但与HAND无关,同样HAND与CD4计数也无关。结论结果显示中国HIV-1感染人群HAND患病率约为37%,以认知障碍症状为主;CSF与外周血病毒载量呈一致性变化,但是CD4计数和病毒载量不能作为诊断和预测HAND病情的指标,上述结果需要进一步的大样本调查予以证实。
宋凤丽张玉林乔录新丁渭徐树莹张彤吴昊陈德喜
关键词：患病率
早期自噬在非酒精性脂肪肝中的保护作用被引量：14
2011年
目的探讨非酒精性脂肪肝细胞模型中早期自噬的发生及作用。方法用含浓度为400μmol/L油酸的DMEM高糖培养基培养肝癌HepG2细胞,制作体外非酒精性脂肪肝细胞模型。向肝癌HepG2细胞转染GFP-LC3质粒,通过观察LC3Ⅱ绿色荧光斑点确定自噬的发生。采用PI3k抑制剂LY294002抑制自噬。CalceinAM和碘化丙啶(PI)对培养的细胞进行染色来确定活细胞和晚期凋亡细胞。荧光定量PCR确定促凋亡基因BAX的表达。结果油酸刺激的肝癌HepG2细胞在第8小时可以出现强烈的自噬反应,但未刺激细胞没有出现LC3Ⅱ绿色斑点。CalceinAM/PI染色未观察到第8小时出现晚期凋亡细胞。但通过LY294002抑制自噬后第8小时自噬水平明显下调,并且有7.8%的细胞出现晚期凋亡。荧光定量结果显示LY294002抑制自噬的第8小时BAX出现高表达。结论油酸刺激肝癌HepG2细胞的早期,自噬的发生可能对细胞有一定的保护作用,其机制可能与减少促凋亡基因的表达有关。
刘凯徐树莹徐斌陈德喜李宁
关键词：非酒精性脂肪肝自噬凋亡
细胞ATP检测试剂的优化及其灵敏度的测定被引量：5
2010年
为配制细胞ATP检测试剂并检测其灵敏度,按照常规报告基因分析试剂配制方法,将其中主要成分Luciferase(荧光素酶)和Luciferin(荧光素)及ATP浓度进行倍比稀释后找到最适合反应的最佳浓度值;按照最佳浓度配制反应液,将ATP浓度倍比稀释测定报告基因数值并绘制标准曲线,分析检测灵敏度;另外选取肿瘤细胞株H1299,倍比稀释后裂解细胞应用配制好的反应液进行ATP检测,分析最低检测细胞数。结果:Luciferase和Luciferin最佳反应浓度分别为1.25μg/mL和87.5μmol;按照最佳浓度配制反应液后,绘制ATP浓度标准曲线,找到ATP检测最低线为10-12mol/L,可以检测到H1299细胞最低值为100个。说明本实验配制的细胞ATP检测试剂灵敏度高具有良好的应用价值。
柳雅立孙玉石英乔录新魏飞力计云霞寇卜心陈德喜
关键词：ATP灵敏度
中国健康人趋化性细胞因子CCL3L1的基因拷贝数及其与HIV-1易感性关系的初步研究被引量：2
2010年
目的研究中国健康人群趋化性细胞因子配体蛋白CCL3L1(CC chemokine ligand 3-like-1)的拷贝数及其与HIV易感性的关系。方法收集全血标本,提取基因组DNA,应用Realtime PCR法分析其CCL3L1的相对拷贝数。首先选取22例健康人和23例HIV慢性感染者计算其CCL3L1拷贝数,分析我国健康人群CCL3L1平均拷贝数情况,并分析HIV感染和CCL3L1拷贝数的关系;选取男性同性恋早期感染HIV阳性者29例和HIV阴性者57例,分析CCL3L1基因拷贝数与HIV易感性的关系。结果我国人群CCL3L1平均拷贝数约为3;HIV慢性感染者与健康人无显著性差异(P=0.880);同性恋HIV阴性者CCL3L1拷贝数显著高于同性恋HIV阳性者(P=0.000)。结论我国健康人CCL3L1平均拷贝数为3,CCL3L1拷贝数与HIV易感性关系密切。
柳雅立石英徐斌南萍计云霞魏飞力寇卜心陈德喜
关键词：CCL3L1基因拷贝数HIV-1易感性
艾滋病毒1型表型耐药检测研究进展
2012年
目前，HIV-1抗逆转录病毒治疗药物的治疗目标是降低病毒载量，提高患者免疫系统功能，但是抗逆转录病毒药物耐药性的出现似乎已经是HIV-1感染者治疗的主要障碍，因此HIV-1耐药检测就成为感染者治疗方案中的重要项目之一。迄今，已有众多研究证明了表型耐药检测对于临床治疗的可靠性与实用性。此文将对目前表型耐药检测研究进展作了综述。
乔录新陈德喜
关键词：HIV-1
全选 清除 导出
共2页<12>
聚类工具0