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广州市科技计划项目(2010U1-E021)
作品数:
1
被引量:2
H指数:1
相关作者:
袁进
吴丽红
施振旦
徐名衬
刘闻
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相关机构:
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发文基金:
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2013
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免疫瘦素受体胞外近跨膜区重组融合蛋白对SD大鼠脂肪沉积的影响
被引量:2
2013年
目的原核表达瘦素受体(OBR)近跨膜区重组融合蛋白并进行SD大鼠免疫实验,观察其对SD大鼠脂肪沉积的影响。方法设计1对带有BamHI和Hindlll酶切位点特异性引物,扩增OBR胞外近跨膜区基因片段(1705~2364bp),经酶切后连接到表达载体pRSETA的BamHI和HindⅢ两酶切位点之间,构建OBR胞外近跨膜区重组表达质粒并在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中表达,SDS.PAGE电泳分析和western blotting鉴定表达产物。随后制备OBR胞外近跨膜区重组融合蛋白并免疫SD大鼠,观察其对SD大鼠体质量、采食量、体长、Lee’S指数、腹脂率、肝脏脂肪沉积、皮下脂肪沉积的影响。结果SDS.PAGE电泳分析和Western blotting鉴定结果显示,在IPTG诱导下OBR胞外近跨膜区重组表达菌表达了相对分子质量27600左右的融合蛋白。对SD大鼠免疫0BR胞外近跨膜区重组融合蛋白后,体质量、体长、Lee’S指数、腹脂率、肝脏脂肪沉积与对照组无明显差异,而采食量显著增加、皮下脂肪细胞体积减小。结论成功表达西藏小型猪瘦素受体胞外近跨膜区重组融合蛋白,免疫SD大鼠可促进采食和抑制皮下脂肪沉积。
刘闻
吴丽红
徐名衬
郭日红
顾为望
施振旦
袁进
关键词:
瘦素受体
原核表达
重组融合蛋白
脂肪沉积
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