国家自然科学基金(30371347)
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
- 相关作者：曹雅明刘军冯辉郑丽刘英杰更多>>
- 相关机构：中国医科大学大理学院杭州市疾病预防控制中心更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 疟疾传播阻断疫苗Pys25重组蛋白免疫活性的实验研究被引量：2
- 2007年
- 为探讨约氏疟原虫传播阻断疫苗Pys25重组蛋白的免疫效果及其效应,我们以酵母菌表达的Pys25重组蛋白皮下免疫DBA/2小鼠,采用ELISA检测免疫后不同时间小鼠血清中的特异性抗体水平,并通过IFA观察免疫血清对有性阶段虫体发育的阻断效应。初次免疫后2周,小鼠血清中特异性IgG抗体水平开始升高,并于加强免疫后2周达到峰值;感染血液与免疫血清共同培养后,配子体向合子和动合子的发育明显受阻,并且其传播阻断效应与免疫血清呈剂量依赖性。实验表明,酵母菌表达的Pys25重组蛋白具有良好的免疫原性,其免疫血清可显著抑制有性阶段原虫的进一步发育。
- 刘英杰崔洋陈光邓立军曹雅明
- 关键词：约氏疟原虫传播阻断免疫血清
- 间日疟传播阻断疫苗Pvs25和Pvs28重组蛋白免疫活性的实验观察被引量：3
- 2007年
- 目的观察间日疟传播阻断疫苗候选抗原Pvs25和Pvs28重组蛋白免疫小鼠后抗体产生情况,从而探讨此两种候选抗原的免疫活性。方法用酵母菌表达的Pvs25和Pvs28重组蛋白皮下免疫DBA/2小鼠;采用ELISA方法,分别对各组小鼠免疫前后不同时间点血清中特异性IgG及其亚类IgG1、IgG2a的水平进行动态检测。结果初次免疫后第28dIgG及其亚类IgG1、IgG2a均出现有意义的升高(P<0.01),至第112dIgG及其亚类IgG1一直持续于较高的水平(P<0.01);而IgG2a水平则于初次免疫后第42d开始下降,但至112d仍高于免疫前及对照组(P<0.05)。结论Pvs25和Pvs28重组蛋白免疫DBA/2小鼠后可产生较高水平的特异性IgG抗体,并以IgG1亚类为主。
- 李冬梅刘英杰刘军王庆辉郭生玉曹雅明
- 关键词：间日疟原虫传播阻断疫苗PVS25免疫活性
- 间日疟原虫云南分离株传播阻断疫苗候选抗原Pvs28基因多态性分析被引量：2
- 2006年
- 目的分析我国疟疾混合流行区云南分离株间日疟原虫(P.v)传播阻断疫苗候选抗原Pvs28基因特点。方法收集云南省血样17份;提取疟原虫基因组DNA;PCR扩增Pvs28基因;基因测序;DnaSPversion4.0软件进行基因多态性分析。结果成功扩增Pvs28全长基因17个序列。与标准株Sal-I比较,检测出7个错义突变,7个基因型和7种氨基酸型。云南P.v分离株核苷酸多态性π值为0.0044。若不考虑重复片段拷贝数的差异,云南P.v分离株和湖北P.v分离株Pvs28蛋白主导氨基酸型完全一致,即V14-L52-L98-E105-L116-S140-I223。与泰国P.v分离株比较,我国主导基因型突变位点完全包含在泰国P.v分离株突变位点中。结论以Sal-IPvs28为基础建立的传播阻断疫苗能够克服云南P.v分离株Pvs28抗原多样性而发挥传播阻断作用,提示间日疟原虫传播阻断疫苗在我国具有良好的应用前景。
- 冯辉郑丽刘军杨毅梅曹雅明
- 关键词：间日疟原虫PVS基因多态性
- 间日疟原虫重组蛋白Pvs25和Pvs28免疫小鼠应答机制观察被引量：2
- 2007年
- 目的观察间日疟传播阻断疫苗候选抗原Pvs25和Pvs28的免疫应答机制。方法分别用与弗氏佐剂乳化后的Pvs25和Pvs28重组蛋白皮下免疫DBA/2小鼠;采用ELISA分别对各组小鼠脾细胞培养上清的IFN-γ、IL-4、IL-10动态检测;以ELISPOT方法检测小鼠脾脏IFN-γ+和IL-4+细胞数量。结果经重组蛋白免疫的两组小鼠脾细胞培养上清IFN-γ的含量于初次免疫后第14d升高,与对照组相比差异显著(P<0.01),但随后降至对照组水平;IL-4和IL-10均在初次免疫后第28d出现有意义的升高(P<0.01),后升高更为明显,分别直至免疫后期70d、56d出现下降,但直至112d仍明显高于免疫前的水平(P<0.01)。初次免疫后第70d?98d小鼠脾脏IFN-γ+和IL-4+细胞数量,与对照组相比IFN-γ+无明显变化,而IL-4+则明显增多(P<0.01)。结论Pvs25和Pvs28重组蛋白可诱导小鼠产生以Th2反应为主的免疫应答。
- 李冬梅刘军刘英杰郑丽冯辉陈光曹雅明
- 关键词：间日疟原虫传播阻断疫苗PVS25细胞因子
- 我国云南分离株间日疟原虫传播阻断疫苗候选抗原pvs25基因多态性分析被引量：8
- 2005年
- 目的阐明我国疟疾流行区间日疟原虫传播阻断疫苗候选抗原pvs25基因多态性特点。方法收集全年流行区云南省血样31份;提取疟原虫基因组DNA;聚合酶链反应(PCR)扩增pvs25基因;Sanger双脱氧链终止法测序;DnaSPversion4.0软件统计学分析。结果成功扩增pvs25全长基因31个序列。与标准株SalI比较,检测出4个错义突变位点,5种基因型,4处氨基酸置换。C103G289C389C391为主导基因型,L35E97T130Q131是相应主导氨基酸型,其突变与季节流行区的主导基因型和氨基酸型完全一致。核苷酸多态性π值为0.0014。组间多态性π值比较表明全年流行区明显高于季节流行区。结论我国分离株间日疟原虫传播阻断疫苗候选抗原Pvs25只有1种主导基因型和1种主导氨基酸型。有限的基因突变再次提示Pvs25是理想的候选抗原,以Pvs25为基础构建的传播阻断疫苗在我国具有广泛应用的可行性。
- 刘军冯辉郑丽杨毅梅金行一曹雅明
- 关键词：间日疟原虫PVS25基因多态性
