广东省自然科学基金(5200513)
- 作品数：6 被引量：9H指数：2
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- 相关机构：南方医科大学华中科技大学解放军421医院更多>>
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- 自体凋亡细胞静脉回输联合雷帕霉素对恒河猴体内调节性T细胞的影响
- 2010年
- 目的观察凋亡细胞联合雷帕霉素对恒河猴体内调节性T细胞(Treg)的影响,探讨减少雷帕霉素用量,降低免疫抑制剂副作用的方法。材料及方法以CD4+FOXP3+调节性T细胞比例为观察对象,分组对比实验,4只雄性恒河猴8～10岁龄,体重7～8kg,随机分成实验组和对照组,每组2只。实验组采用低剂量雷帕霉素加凋亡细胞输注的方法,每天给予口服0.4mg雷帕霉素,同时静脉输注凋亡细胞一次;对照组每天给予同样剂量的雷帕霉素,同时静脉注射PBS。定期检测各组恒河猴外周血中CD4+Foxp3+Treg,并计算Treg占CD4+T细胞的比例。对比两组恒河猴Treg变化曲线的异同。结果单纯口服雷帕霉素的恒河猴,Treg/CD4+T比例在1只猴未见明显增加,在第38天为6.92%,另1只仅在4周后明显增加,在第38d为13.7%;而注射凋亡细胞联合雷帕霉素组的恒河猴,其Treg/CD4+T的比例在输注凋亡细胞后2～3周即有明显增加,2只猴在第38d Treg/CD4+T细胞比例升至16.67%和21.56%。结论凋亡细胞联合雷帕霉素有可能升高恒河猴体内Treg的比例。
- 陈晓延顾冬生罗宇维李留洋孙尔维
- 关键词：凋亡细胞调节性T细胞雷帕霉素恒河猴
- 他克莫司对全血细胞因子分泌的影响被引量：4
- 2010年
- 目的研究免疫抑制剂他克莫司(Tacrolimus,FK506)在体外对全血细胞因子分泌的影响。方法健康志愿者全血加入不同浓度FK506,经佛波酯(PMA)和离子霉素(IONO)刺激后,用Bio-Plex悬浮蛋白芯片系统检测上清中细胞因子IL-2、IL-6、IL-12、IL-17、IFN-γ、TNF-α、GM-CSF以及G-CSF的水平。结果同对照组相比,高浓度组FK506(20ng/ml)能显著抑制IL-2、IL-6、IL-12、IL-17、IFN-γ、TNF-α、GM-CSF和G-SCF的分泌(P<0.05);中浓度组FK506(5ng/ml)能有效抑制GM-CSF的分泌,两组之间的差异有显著性(P<0.05)。结论FK506对全血细胞促炎症细胞因子IL-6,IFN-γ和TNF-α的分泌有较强的抑制作用,同时对IL-2,IL-12,IL-17以及集落刺激因子因子GM-CSF,G-CSF也有明显抑制作用。因此FK506发挥免疫抑制功能可能通过抑制免疫细胞分泌各类细胞因子来实现。同时,由于FK506与细胞因子的分泌有剂量依赖关系,有望可以通过FK506浓度水平与细胞因子的抑制水平的依赖关系来评估临床病人FK506的用量是否合理。
- 何懿李民刘占国罗宇维王明张婕孙尔维
- 关键词：他克莫司细胞因子全血免疫抑制
- CFSE标记的淋巴细胞增殖实验检测方法的建立被引量：2
- 2008年
- 目的建立基于流式细胞术和活细胞荧光染料CFSE的淋巴细胞增殖、单向混合淋巴细胞实验的免疫学检测方法。方法分离单个核细胞,将反应细胞经CFSE染色后,分别加入不同的淋巴细胞增殖刺激物或与灭活的异基因淋巴细胞共培养。培养后细胞经流式细胞术检测标记细胞是否增殖,应用CD4-PE抗体检测增殖细胞中CD4阳性T细胞亚群比例,ModFit软件分析增殖动力模型。计算增殖CDI或PI指数。结果基于CFSE建立的淋巴细胞增殖实验,经不同刺激物或异基因抗原刺激后增殖指数明显升高,使用CD4-PE抗体进行再次标记后可以对增殖实验中CD4阳性淋巴细胞亚群的增殖进行评估。结论成功建立了基于CFSE标记淋巴细胞的增殖实验检测方法,该方法简单、实用、灵敏度高,可以取代3H或MTT用于不同条件、不同免疫刺激情况下淋巴细胞增值的检测或评估。
- 孙尔维袁小澎罗宇维陈忠华
- 关键词：增殖流式细胞术
- 肝窦内皮细胞与凋亡细胞相互作用对促炎症因子分泌水平的影响
- 2009年
- 目的研究肝窦内细胞(HSEC)与凋亡细胞互相作用后促炎症因子分泌水平的变化。方法紫外线诱导人淋巴细胞凋亡;对照组:体外人HSEC单独培养。实验组:人HSEC与同种异体凋亡淋巴细胞细胞直接共培养。两组均培养16h后,收集上清液,利用Luminex技术检测上清液促炎症性的细胞/化学因子水平,包括IL-2、ⅡNF-γ、TNF-α。结果实验组IL-2、ⅡNF-γ、TNF-α分泌水平比对照组下调约50%,两组数值的差异有显著性(P<0.05)。结论HSEC与凋亡细胞作用后能使促炎症因子下调,调控局部免疫微环境,使免疫反应偏向耐受。
- 何栋罗宇维马骊孙尔维
- 关键词：肝窦内皮细胞凋亡细胞促炎症因子免疫耐受
- 环孢素A对小鼠体内调节性T淋巴细胞的作用及机制被引量：2
- 2009年
- 目的探讨环孢素A（CsA）对小鼠体内CD4^＋ Foxp3^＋调节性T淋巴细胞的作用及机制。方法选择雄性C57BL／6小鼠20只，随机平均分为两组。实验组小鼠腹腔注射环孢素A20mg·kg^-1·d^-1×2周；对照组小鼠腹腔注射等体积的磷酸盐缓冲液（PBS）×2周。2周后，两组小鼠在无菌条件下经眼球采集外周血，并分离脾脏和胸腺，制备单细胞悬液。采用流式细胞仪检测小鼠外周血、脾细胞和胸腺细胞悬液中的CD4^＋Foxp3^＋T淋巴细胞的比例。结果实验组小鼠外周血、脾细胞和胸腺细胞悬液中CD4^＋Foxp3^＋T淋巴细胞的比例分别为（0．581±0．089）％、（2．189±0．046）％和（O．472±0．049）％，对照组的比例分别为（1．751±0．227）％、（3．684±0．169）％和（1．412±0．188）％，两组间比较，差异均有统计学意义（P〈0．001）。结论CsA可以损害小鼠体内调节性T淋巴细胞的发育，从而减少调节性T淋巴细胞的数量。
- 严鸣光罗宇维孙尔维
- 关键词：环孢素AT淋巴细胞外周血
- LY294002对小鼠体内调节性T细胞的影响被引量：1
- 2009年
- 背景:研究已证实,磷酸肌醇3激酶特异性阻滞剂LY294002在体外具有剂量依赖性抑制细胞活性的作用,可以用于诱导肿瘤细胞凋亡,但LY294002对正常免疫系统的影响尚不清楚。目的:观察抗肿瘤药物LY294002对C57BL/6小鼠体内调节性T细胞的影响。设计、时间及地点:以调节性T细胞比例为观察对象,分组对比实验,于2008-08/12在广州南方医科大学珠江医院移植免疫研究所完成。材料:14只8周龄SPF级C57BL/6小鼠随机分成实验组与对照组,每组7只。LY294002购自广州英韦创津公司。方法:实验组腹腔注射LY294002溶液200μL(0.1mg),对照组给予等体积PBS。10h后后眼眶静脉从采血,并分离脾脏、胸腺,制备单细胞悬液,流式细胞术检测小鼠外周血、脾细胞和胸腺细胞中的CD4+CD25highT细胞。主要观察指标:小鼠外周血、脾细胞和胸腺细胞中CD4+CD25highT细胞的比例。结果:实验组小鼠外周血、脾脏、胸腺中CD4+CD25highT细胞比例分别为(0.787±0.036)%,(0.921±0.063)%,(1.230±0.131)%,对照组小鼠外周血、脾脏、胸腺中CD4+CD25highT细胞比例分别为(0.640±0.030)%,(0.639±0.046)%,(0.857±0.077)%,实验组和对照组比较差异有显著性意义(P<0.01,P<0.05)。结论:腹腔注射LY294002可提升小鼠体内调节性T细胞的比例,提示其有可能会抑制机体免疫反应,从而不利于治疗。
- 顾冬生严鸣光罗宇维孙尔维
- 关键词：LY294002调节性T细胞
