安徽省高校省级自然科学研究项目(KJ2009A73)
- 作品数：14 被引量：28H指数：4
- 相关作者：沈彤朱启星徐辉王进戴丹更多>>
- 相关机构：安徽医科大学安徽省疾病预防控制中心安徽医科大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：安徽省高校省级自然科学研究项目国家自然科学基金教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生理学更多>>
- 饮水摄入三氯乙烯对BALB／c小鼠Th17细胞的影响被引量：1
- 2012年
- 目的探讨饮水摄入三氯乙烯（trichloroethylene，TCE）对小鼠Th17细胞的影响。方法将48只6周龄雌性BALB／c小鼠按随机数字表法分为空白对照组、溶剂对照组、2．5mg／ml TCE组和5．0mg／ml TCE组，每组12只，染毒组经饮水摄入TCE；每组分别于暴露第14、28、56、84天各处死3只小鼠，取其脾脏及外周血，流式细胞术检测CD4＋T细胞中Th17细胞比例，实时荧光定量PCR测定维甲酸相关孤儿核受体（retinoid—related orphan receptors，RORTγt）mRNA表达水平；ELISA法测定外周血血清白细胞介素-17（IL-17）、白细胞介素-6（IL-6）和转化生长因子-β（TGF—β）含量。结果2．5、5．0mg／ml TCE染毒组小鼠的脾脏CD4＋T细胞中Th17细胞比例第14天时分别为（3．46±0．32）％和（5．45±0．45）％，第84天时分别为（3．47±0．33）％和（4．10±0．39）％，均较同期溶剂对照组[分别为（2．15±0．20）％、（2．16±0．35）％]升高且差异有统计学意义（P值均〈0．01）；其RORγt表达水平第14天时分别为1．870±0．084和1．965±0．060，第56天时分别为1．998±0．079和2．028±0．073，均较同期溶剂对照组（1．77±0．04、1．75±0．09）上调且差异有统计学意义（P值均〈0．05）；其血清IL-17含量第14天时分别为（32．28±5．38）和（34．47±5．02）pg／ml，第28天时分别为（34．87±5．48）和（41．94±6．19）pg／ml，均较同期溶剂对照组升高[分别为（21．57±5．23）、（22．11±5．11）pg／ml]且差异有统计学意义（P值均〈0．05）；其血清IL-6含量第14天时分别为（43．07±6．71）和（47．86±8．52）pg／ml，第56天时分别为（41．32±7．04）和（46．74±9．33）ps／ml，均较同期溶剂对照组[分别为（7．56±7．71）和（28．26±7．22）pg／ml]升高且差异有统计学意义（P值均〈0．05）；其血清TGF—β含量第14天时分别为（17．48±3．06）和（18．93±3�
- 沈彤王进徐辉许述海江涛朱启星
- 关键词：三氯乙烯小鼠近交BALBTH17细胞免疫毒性
- 经水摄入三氯乙烯对小鼠调节性T细胞的影响被引量：1
- 2012年
- 目的研究经水摄入三氯乙烯(TCE)对小鼠调节性T细胞(Treg)的影响。方法♀BALB/c小鼠随机分为空白对照组、溶剂对照组以及2.5、5 g/L TCE组,TCE经饮水染毒,分别在2、4、8、12周处死动物,采集外周血并取脾脏。流式细胞仪检测脾脏Treg细胞数量,荧光定量RT-PCR检测Treg细胞特异转录因子Foxp3 mRNA表达水平,ELISA法检测血清中白介素10(IL-10)含量。结果 TCE 2.5、5.0 g/L组小鼠脾脏Treg细胞数量比空白和溶剂对照组明显降低,2、4、8周时差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);脾脏Foxp3 mRNA表达与对照组比较,TCE暴露组明显降低,2、4、8周时差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01),4周时最低;血清中IL-10含量与对照组比较,TCE 2.5、5.0 g/L组明显降低,2、4周时差异均有统计学意义(P<0.05),4周时最低;相关分析显示脾脏中Treg细胞数量和血清中细胞因子IL-10含量呈正相关(r=0.768,P<0.01)。结论经水摄入TCE对小鼠Treg细胞有显著影响。
- 王进沈彤徐辉许述海江涛朱启星
- 关键词：三氯乙烯调节性T细胞免疫毒性
- 三氯乙烯急性刺激对BALB/c裸鼠皮肤组织病理学和细胞超微结构的影响
- 2009年
- 目的通过整体动物试验,研究三氯乙烯(TCE)急性刺激对皮肤组织病理学和细胞超微结构的影响,探讨TCE所致皮肤损害的发生机制。方法用体积百分比为20%、40%、80%和100%的TCE涂抹BALB/c裸鼠皮肤4 h,并用橄榄油和蒸馏水作溶剂和空白对照,处理结束时用生理盐水除去残留受试物,1 h后肉眼观察局部皮肤反应,处死动物取染毒部位皮肤,制成切片,光学显微镜和透射电子显微镜(TEM)进行组织病理学和细胞超微结构的观察。结果视觉观察发现TCE涂抹BALB/c裸鼠可引起皮肤红斑和水肿,高剂量组还出现起疱和表皮坏死。组织病理学检查发现TCE处理组动物皮肤出现不同程度的角化过度、细胞间水肿和以中性粒细胞为主的炎性细胞浸润,高剂量组还出现角化不全、胞裂外排和棘层松解等改变;TEM观察显示TCE刺激的皮肤角质形成细胞(KC)胞膜皱缩,胞浆水肿,细胞器拥挤且结构异常,线粒体发生不同程度肿胀甚至空泡样变,核内染色质浓缩靠边聚集等改变。结论结果表明20%TCE对BALB/c裸鼠皮肤具有刺激作用,可引起皮肤组织病理学和细胞超微结构的改变。
- 沈彤周承藩于均峰张学军朱启星
- 关键词：三氯乙烯BALB/C裸鼠
- 三氯乙烯致敏豚鼠血清中肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-1β水平的变化被引量：6
- 2009年
- 目的比较三氯乙烯(TCE)致敏豚鼠和未致敏豚鼠血清中白细胞介素(IL)-1β和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平。方法将豚鼠随机分为空白对照组,溶剂(橄榄油)对照组,2,4-二硝基氯苯(DNCB)阳性对照组,TCE处理组。根据豚鼠最大值试验(Guinea pig maximization test,GPMT)方法处理豚鼠。按照《化学品毒性鉴定技术规范》的评分标准对动物的皮肤反应进行评分,评分≥1的判为致敏。在末次激发后24 h和72 h分2批采血,用聚合酶链反应试剂盒测定血清中TNF-α、和IL-1β的含量。结果DNCB组致敏率为100%,TCE组致敏率为62.1%。DNCB阳性对照组和TCE致敏组TNF-α和IL-1β水平与溶剂对照组相比明显升高(P<0.05)。在24 h及72 h 2个时点,TCE致敏动物TNF-α和IL-1β水平比相应的未致敏组高,差异有显著性(P<0.05)。结论在TCE诱导的致敏豚鼠血清中TNF-α和IL-1β水平升高。
- 郭瑞娟汪亮沈彤周承藩朱启星
- 关键词：三氯乙烯肿瘤坏死因子-Α白细胞介素-1Β
- 三氯乙烯致敏豚鼠肝脏MDA含量和SOD活力的测定被引量：6
- 2010年
- 目的探讨氧化应激在三氯乙烯（trichloroethylene,TCE）致敏豚鼠肝损伤中的作用。方法选用体重250-300 g的白色雌性豚鼠,随机分成空白对照组,溶剂（橄榄油）对照组,TCE处理组。根据豚鼠最大值实验（guinea pig maximization test,GPMT）方法处理豚鼠。按照《化学品毒性鉴定技术规范》的评分标准对动物的皮肤反应进行评分,评分≥1的判为致敏。在终末激发后24 h和72 h取材,对肝组织进行病理学检查,并分别测定血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）和白蛋白（ALB）和肝脏中的丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活力。结果TCE处理组致敏率为65.38%。TCE致敏72 h组中见到较多肝细胞水肿,并有胞核破裂消失。TCE致敏72 h组ALT和AST水平比TCE致敏24 h组和TCE未致敏72 h组升高,差异有统计学意义（P〈0.05）;TCE致敏72 h组ALB水平比溶剂对照组和TCE未致敏72 h组降低,差异有统计学意义（P〈0.05）。TCE致敏24 h和72 h组肝MDA含量与溶剂对照组相比明显升高,且差异有统计学意义（P〈0.05）;TCE致敏24 h组肝SOD活力与溶剂对照组相比较明显降低,差异有统计学意义（P〈0.05）,而TCE致敏72 h组肝SOD活力与溶剂对照组相比较明显升高,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论TCE可引起致敏豚鼠肝损伤,氧化应激在肝损伤中发挥一定的作用。
- 徐辉冷静沈彤王红艳朱启星
- 关键词：三氯乙烯超氧化物歧化酶(SOD)
- 三氯乙烯致敏豚鼠肾脏丙二醛水平和超氧化物歧化酶活力变化被引量：1
- 2010年
- 目的研究三氯乙烯(TCE)致敏豚鼠肾脏中丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)活力的变化,探讨TCE对豚鼠肾脏的氧化应激水平的影响。方法 50只豚鼠随机分为空白对照组、溶剂(橄榄油)对照组、TCE处理组。根据豚鼠最大值实验(GPMT)方法处理豚鼠。按照《化学品毒性鉴定技术规范》的评分标准对动物的皮肤反应进行评分,评分≥1且总致敏率>9%的判为致敏。在末次激发后24、72 h和1周3个时点分批采血,测定血清中尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)水平;取肾脏组织测定MDA水平以及总SOD(T-SOD)活力。结果 TCE组致敏率为65.0%,与溶剂对照组相比较,TCE致敏组24 h血清BUN、Cr都明显升高(P<0.05)。与溶剂对照组相比,TCE致敏24 h组MDA水平明显上升(P<0.05);TCE致敏组与未致敏组比较,24 h组MDA水平差异有统计学意义(P<0.05)。TCE致敏组SOD活力比溶剂对照组明显降低(P<0.05),各时点间有下降或升高的趋势但是差异无统计学意义;24、72 h致敏组SOD活力较非致敏组低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TCE诱导的致敏豚鼠肾脏有一定程度的损伤,其中氧化应激发挥一定作用。
- 冷静徐辉沈彤朱启星
- 关键词：三氯乙烯氧化应激肾脏
- 三氯乙烯致敏豚鼠皮肤组织中TNF-α和IL-1的表达水平被引量：6
- 2009年
- 目的研究TNF-α及IL-1在三氯乙烯(TCE)致敏豚鼠皮肤组织中的表达情况,探讨TCE药疹样皮炎发生过程中可能存在的机制。方法选用体重250 g左右白色雌性豚鼠,随机分成空白对照组、溶剂对照组、TCE处理组、2,4-二硝基氯苯(DNCB)阳性对照组,用豚鼠最大值实验(guinea pig maximization test,GPMT)方法建立动物致敏模型,并在终末激发后依据致敏结果以及取材时点的不同(分别于24 h、72 h取材),将TCE处理组分为TCE致敏24 h组、72 h组和TCE未致敏24 h组、72 h组;DNCB阳性对照组分为DNCB 24h组和DNCB 72h组。采用Elivison二步法免疫组织化学法检测各组皮肤组织中TNF-α和IL-1的表达。结果TCE处理组致敏率为62.1%;TCE致敏24 h组和TCE致敏72 h组的TNF-α及IL-1水平显著高于溶剂对照组,差异有统计学意义;同时TCE致敏与未致敏24 h组、TCE致敏与未致敏72 h组比较差异也有统计学意义。结论TCE对豚鼠皮肤具有致敏作用,TNF-α和IL-1在TCE药疹样皮炎发生过程中具有重要意义。
- 冯晓亮戴丹周承藩沈彤朱启星
- 关键词：三氯乙烯
- 三氯乙烯诱导人表皮角质形成细胞凋亡中依赖Caspase-9的Caspase-3激活被引量：4
- 2009年
- 目的探讨有机溶剂三氯乙烯(TCE)诱导正常人表皮角质形成细胞(NHEK)凋亡过程中可能的信号通路。方法用0.125、0.25、0.5、1.0、2.0mmol/L的TCE处理NHEK4h,并培养4、8、12、24h,分光光度法测上清中Caspase-9和Caspase-3活性,Annexin-V/PI双染后流式细胞仪(FCM)测细胞凋亡;Caspase-3抑制剂Z-DEVD-FMK和Caspase-9抑制剂Z-LEHD-FMK预处理组,用100μmol/LZ-DEVD-FMK或Z-LEHD-FMK预处理NHEK1h,再用2.0mmol/LTCE染毒4h后培养至12h。结果不同浓度TCE处理NHEK4h后培养不同时间,可诱导Caspase-3和Caspase-9活性升高,培养12、24h时,各TCE处理组Caspase-3和Caspase-9活性与溶剂对照比差异有统计学意义(P<0.05)。不同浓度TCE处理NHEK4h后培养12h,凋亡细胞(Annexin-V+/PI-)所占百分比随TCE剂量增加而升高,除0.125mmol/LTCE组外,其它各处理组Annexin-V+/PI-细胞所占百分比与对照组比差异均有统计学意义(P<0.05)。相关分析显示Annexin-V+/PI-细胞所占百分比与Caspase-3和Caspase-9活性都呈正相关(P<0.05)。100μmol/LZ-DEVD-FMK预处理明显抑制2.0mmol/LTCE诱导的Caspase-3活性上升和Annexin-V+/PI-细胞所占百分比的增加(P<0.05),对Caspase-9活性影响不明显(P>0.05)。100μmol/LZ-LEHD-FMK预处理不仅抑制2.0mmol/LTCE诱导的Caspase-3活性上升和Annexin-V+/PI-细胞所占百分比的增加,还抑制Caspase-9活性上升(P<0.01)。结论TCE诱导NHEK凋亡中,内部凋亡途径中上游关键酶Caspase-9和下游效应分子Caspase-3均激活,且Caspase-3的激活依赖Casapase-9的活化。
- 沈彤叶良平汪立杰张学军朱启星
- 关键词：半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9细胞凋亡
- 三氯乙烯染毒小鼠Th17细胞与肝功能损害的关系
- 2011年
- 目的检测三氯乙烯(TCE)染毒小鼠体内Th17细胞数量及其分泌的白介素17(IL-17)含量和肝功能的变化,探讨Th17细胞与TCE引起的肝功能损害的关系。方法雌性BALB/c小鼠随机分为TCE(2.5、5 mg/ml)组、空白对照组和溶剂对照组。染毒2、4、8、12周,采集外周血用全自动生化仪测定肝功能,处死动物取脾脏和肝脏,流式细胞仪检测脾脏Th17细胞数量,ELISA法检测肝组织匀浆中IL-17含量。结果与对照组相比,TCE组小鼠天冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平明显升高,2周和4周时差异有显著性(P<0.05);肝组织匀浆中IL-17含量与对照组比较,TCE组也明显升高(P<0.05,P<0.01),4周时最高;与对照组比较,TCE组小鼠脾脏Th17细胞数量明显升高,2、4、8、12周时差异均有显著性(P<0.05,P<0.01);相关分析显示肝功能与肝组织匀浆中IL-17含量和Th17细胞数量均呈正相关。结论 TCE引起的肝功能损害可能与Th17细胞有关。
- 王德骏苏尧赵文紧王晓玮马倩刘猛王进沈彤
- 关键词：三氯乙烯TH17细胞肝脏毒性
- 三氯乙烯致敏豚鼠及IL-10表达的研究被引量：4
- 2010年
- 目的研究细胞因子白细胞介素-10(IL-10)在三氯乙烯(TCE)致敏豚鼠表皮中的表达,探讨TCE药疹样皮炎发病机制。方法将白色雌性豚鼠随机分成空白对照组、溶剂对照组、TCE实验组、2,4—二硝基氯苯(DNCB)阳性对照组,根据豚鼠最大反应试验(guinea pig maximization test,GPMT)方法处理豚鼠,在终末激发后进行皮肤反应评分,皮肤反应评分≥1判断为致敏,依据致敏结果以及取材时间的不同将TCE实验组分为致敏组24 h、72 h和未致敏组24 h、72 h,DNCB阳性对照组24 h和72 h。无菌条件下取皮制成蜡块,采用Elivison二步法免疫组织化学法检测各组表皮中IL-10的表达情况。结果 TCE实验组致敏率为62.1%;TCE致敏24 h组和72 h组的IL-10水平高于溶剂对照组,且差异有统计学意义(P<0.05);同时TCE致敏24 h组与TCE未致敏24 h组比较、TCE致敏72 h组与TCE未致敏72 h组比较,差异也有统计学意义(P<0.05);TCE致敏24 h组与DNCB 24 h组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TCE对豚鼠皮肤具有致敏作用,IL-10在TCE药疹样皮炎发生过程中具有重要意义。
- 戴丹余韵于均峰沈彤朱启星
- 关键词：三氯乙烯IL-10致敏作用
