国家自然科学基金(30772814)
- 作品数：14 被引量：131H指数：8
- 相关作者：王和鸣李楠杜江黄远鹏李奕修更多>>
- 相关机构：福建中医药大学山东中医药高等专科学校福建中医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金福建省自然科学基金福建省高等学校新世纪优秀人才支持计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 龟鹿二仙胶及其拆方含药血清对硝普钠诱导的大鼠软骨细胞bax、bcl-2表达的影响被引量：13
- 2012年
- 目的:比较龟鹿二仙胶及其拆方含药血清对硝普钠(SNP)诱导后软骨细胞bax、bcl-2表达的影响,探讨龟鹿二仙胶的配伍机理。方法:取第三代4周龄SD大鼠关节软骨细胞,经SNP诱导凋亡后,采用免疫组化染色法及Realtime-PCR观察龟鹿二仙胶及其拆方含药血清对软骨细胞bax、bcl-2表达的影响。结果:龟鹿二仙胶及其拆方各组均可引起bcl-2表达升高及bax下降,与生理盐水组比较差异有统计学意义(P<0.05),龟鹿二仙胶与龟板、鹿角比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:龟板、鹿角、人参、枸杞均具有抑制软骨细胞凋亡的作用,而4味药同用,人参、枸杞并无显著加强龟板、鹿角的抑制凋亡作用。
- 李楠雒焕生尹玉彪杜江黄远鹏李奕修赵诣王和鸣
- 关键词：龟鹿二仙胶软骨细胞BAX
- 肾虚模型造模方法及相关指标被引量：57
- 2010年
- 背景:临床上与肾虚相关的疾病较多,肾虚动物模型往往在这类疾病的实验研究中发挥着重要的作用。选择合适的方法制造肾虚模型必然会对相关疾病的研究提供很大的帮助。目的:全面归纳肾虚模型的各种造模方法、其造模的理论依据、肾虚类型和检测方法及指标意义。方法:电子检索清华同方知网数据库和万方数据库2004/2009收录的肾虚模型相关期刊、会议论文和综述,根据文章的参考文献,对有价值的文献另行检索阅读,分析其造模方法和相关检测指标的研究进展。结果与结论:共纳入肾虚模型相关文献46篇。其造模方法主要分为药物干预、手术切除和模拟中医病因病机等3大类;其模型主要分为肾阳虚模型和肾阴虚模型两类;主要通过肉眼和镜下观察、测量相关数据和生化检测的方法来观察动物内分泌、免疫、生殖系统等变化进行判断。目前对肾虚模型中DNA,RNA,蛋白的变化的研究和探讨有增多的趋势,但目前的指标都不是"金指标"。虽然有学者试图找出肾虚的物质基础,但结论没有得到普遍的认可。
- 杜江李楠王和鸣
- 关键词：肾虚模型肾阳虚肾阴虚动物模型激素水平
- 龟鹿二仙胶及其拆方对去势骨关节炎大鼠血清雌二醇浓度及膝关节软骨细胞Ⅱ型胶原表达的影响被引量：14
- 2013年
- 目的:观察龟鹿二仙胶及其拆方对去势骨关节炎大鼠血清雌二醇浓度及膝关节软骨细胞Ⅱ型胶原表达的影响。方法:采用抽签法将168只4月龄雌性SD清洁级大鼠随机分为2组,手术造模组141只,假手术组27只。切除手术造模组大鼠双侧的卵巢和双侧膝关节的内侧副韧带和前交叉韧带,制造肝肾亏虚型骨关节炎大鼠模型;切除假手术组大鼠双侧卵巢附近的脂肪组织。每天驱赶实验大鼠1 h,连续驱赶4周。4周后分别从手术造模组与假手术组各取5只大鼠,采用HE染色和甲苯胺蓝染色法观察子宫与膝关节软骨的组织形态学变化,采用甲苯胺蓝染色法观察膝关节软骨基质中糖胺聚糖的表达情况,采用放射免疫法测定血清雌二醇浓度,鉴定大鼠模型。造模成功后将假手术组作为空白对照组(空白组),并将其分为干预2、4、8周的3小组,每组7只,留1只备用;采用抽签法将手术造模组随机分为6组,即模型对照组(模型组)、龟鹿二仙胶组(全方组)、龟甲鹿角组(龟鹿组)、龟甲鹿角人参组(龟鹿参组)、龟甲鹿角枸杞组(龟鹿杞组)、盐酸氨基葡萄糖对照组(盐酸氨基葡萄糖组),再分别将每组分为干预2、4、8周的3小组,每组7只,留10只备用。参照人与大鼠药物等效剂量换算公式,将龟甲胶、鹿角胶、人参、枸杞、盐酸氨基葡萄糖分别配成浓度为81 mg.mL-1、54 mg.mL-1、10.8 mg.mL-1、27 mg.mL-1、13.5 mg.mL-1的药液。各组大鼠均以10mL.kg-1体质量以各组药液灌胃,空白组与模型组以生理盐水灌胃;全方组以配成的龟鹿二仙胶混合液灌胃;龟鹿组以配成的龟甲胶和鹿角胶混合液灌胃;龟鹿参组以配成的龟甲胶、鹿角胶与人参混合液灌胃;龟鹿杞组以配成的龟甲胶、鹿角胶、枸杞子混合液灌胃;盐酸氨基葡萄糖组以配成的盐酸氨基葡萄糖溶液灌胃。每天灌胃1次,各组分别连续灌胃2、4、8周。药物干预结束后,从腹主动脉抽
- 杜江黄远鹏李奕修余添赐魏迎辰王和鸣李楠
- 关键词：骨关节炎龟鹿二仙胶拆方研究
- 龟鹿二仙胶及其拆方对豚鼠软骨细胞Ⅱ型胶原合成的影响
- 2012年
- 目的:通过观察龟鹿二仙胶及其拆方对豚鼠软骨细胞Ⅱ型胶原的表达的影响,比较各药物在方中的作用。方法:取3月龄豚鼠关节软骨,建立软骨细胞体外培养体系,使用免疫组化染色观察比较Ⅱ型胶原的表达。结果:龟鹿二仙胶及其各拆方组都能促进豚鼠软骨细胞的合成,其中全方组效果最佳,龟鹿参组与龟鹿杞组促Ⅱ型胶原合成能力优于龟鹿组,龟鹿杞组较佳。结论:方中君药鹿角龟甲能够有效的促进豚鼠软骨细胞合成Ⅱ型胶原,臣药人参枸杞能够促进君药发挥药效,具有明显的协同辅助作用,其中枸杞效果更佳。
- 黄远鹏李楠杜江李奕修王和鸣
- 关键词：龟鹿二仙胶软骨细胞
- 龟鹿二仙胶汤含药血清对体外软骨细胞表型BMSCs凋亡的影响被引量：9
- 2009年
- 目的:观察龟鹿二仙胶汤含药血清干预软骨细胞表型化骨髓质基质干细胞(BMSCs)凋亡的影响。方法:抽取兔骨髓液,经体外分离、纯化、培养获得免BMSCs,将龟鹿二仙胶汤含药血清诱导出的软骨细胞表型化BMSCs,用IL-1β诱导凋亡,分别于24h、48h、72h后,采用透射电子显微镜、免疫荧光组织化学、流式细胞仪等实验技术,研究龟鹿二仙胶汤对软骨表型化BMSCs凋亡的影响。结果:龟鹿二仙胶汤能减少软骨表型化BMSCs凋亡的数量及程度,降低细胞凋亡率。结论:龟鹿二仙胶汤可以明显抑制或逆转软骨表型化BMSCs凋亡,能显著延缓软骨表型化BMSCs的凋亡。
- 李文顺李楠王和鸣李西海詹红生石印玉汤亭亭戴克戎李月平王永强张林
- 关键词：BMSCSTGF-Β3龟鹿二仙胶汤
- 龟鹿二仙胶及其拆方对体外培养豚鼠软骨细胞活性的影响被引量：3
- 2012年
- 目的观察龟鹿二仙胶及其拆方对豚鼠膝关节软骨功能基因表达的影响,探讨龟鹿二仙胶的配伍机理。方法取3月龄豚鼠膝关节软骨建立软骨细胞体外培养体系,采用免疫组化染色、RT-PCR、Elisa方法检测酸性GAG、Ⅱ型胶原、Bax、Bcl-2、iNOs的表达。结果龟鹿参组能显著促进软骨细胞分泌酸性GAG(P<0.05),促进Ⅱ型胶原合成(P<0.05);龟鹿杞组能显著抑制Bax的表达、促进Bcl-2表达,抑制软骨细胞分泌iNOs(P<0.05),二组的作用与龟鹿二仙胶组相同。结论人参可助龟甲胶、鹿角胶促进软骨细胞分泌酸性GAG和Ⅱ型胶原,枸杞子可助龟甲胶、鹿角胶延缓软骨细胞凋亡,抑制软骨细胞分泌iNOs。
- 李楠黄远鹏杜江李奕修余添赐魏迎辰刘宇赵诣王和鸣
- 关键词：龟鹿二仙胶软骨细胞
- 龟鹿二仙胶及其拆方对SD大鼠及豚鼠软骨细胞增殖的比较研究被引量：7
- 2011年
- 目的:通过观察龟鹿二仙胶汤及其拆方对SD大鼠及豚鼠软骨细胞增殖的影响,比较在生理及病理状况下龟鹿二仙胶汤及拆方各药物的作用。方法:取1月龄SD大鼠和4月龄豚鼠膝关节软骨建立软骨细胞体外培养体系,运用MTT法比较龟鹿二仙胶及其拆方含药血清对不同软骨细胞增殖的影响。结果:中药血清各组对SD大鼠软骨细胞增殖均具有非常显著的促进作用,西药组明显高于中药各组;龟板与全方效果相当。中药血清各组对豚鼠软骨细胞增殖均具有非常显著的促进作用。龟鹿二仙胶、龟板促增殖效果与西药相比差异无统计学意义。人参的促增殖作用也比作用于正常软骨细胞时有所增强。结论:在病理状态下,龟鹿二仙胶、龟板的促增殖作用明显增强,人参在细胞机能状况下降时才明显发挥补虚作用。
- 李楠雒焕生赵诣尹玉彪杜江黄远鹏王和鸣
- 关键词：龟鹿二仙胶SD大鼠软骨细胞增殖
- 龟鹿二仙胶及其拆方对豚鼠软骨细胞Ⅱ型胶原蛋白多糖合成的影响被引量：20
- 2011年
- 目的:通过观察龟鹿二仙胶及其拆方对豚鼠软骨细胞Ⅱ型胶原和蛋白多糖合成的影响,探讨龟鹿二仙胶的配伍机制。方法:体外培养豚鼠膝关节软骨细胞,免疫组化染色检测龟鹿二仙胶及其拆方对软骨细胞Ⅱ型胶原合成的影响,Alcian Blue染色检测软骨细胞蛋白多糖合成。结果:龟鹿二仙胶促进软骨细胞Ⅱ型胶原和蛋白多糖表达极显著(P<0.01),龟板和鹿角均能显著提高Ⅱ型胶原和蛋白多糖表达(P<0.05),但药效显著低于龟鹿二仙胶(P<0.05);人参和枸杞对Ⅱ型胶原和蛋白多糖表达均无明显促进作用。结论:龟鹿二仙胶可显著促进软骨细胞Ⅱ型胶原和蛋白多糖的表达,这是其保护软骨细胞,延缓软骨退变的作用机制之一。龟鹿二仙胶发挥此作用的主要药物是龟板和鹿角;人参和枸杞本身并不能促进Ⅱ型胶原和蛋白多糖表达,而与龟板和鹿角配合,可明显增强龟板和鹿角的促进软骨细胞Ⅱ型胶原和蛋白多糖表达的作用。
- 李楠尹玉彪雒焕生黄远鹏杜江李奕修赵诣王和鸣
- 关键词：龟鹿二仙胶软骨细胞蛋白多糖
- 龟鹿二仙胶不同提取部位对豚鼠软骨细胞活性的影响被引量：1
- 2014年
- 目的:探讨龟鹿二仙胶不同提取部位对豚鼠软骨细胞活性的影响。方法:采用溶剂极性依次递增分离法分别制备龟鹿二仙胶的三氯甲烷提取物、正丁醇提取物和水提取物。然后分别以三氯甲烷提取物(烷提组)、正丁醇提取物(醇提组)和水提取物(水提组)及生理盐水(对照组)对4组Wistar大鼠进行灌胃,制备含药血清,再分别以这些含药血清对体外培养的豚鼠软骨细胞进行干预。干预结束后分别采用免疫组织化学技术、实时荧光定量聚合酶链式反应法及酶联免疫吸附法测定经4种含药血清干预后的豚鼠软骨细胞中Ⅱ型胶原蛋白、Bcl-2和Bax基因及MMP-3水平。结果:1Ⅱ型胶原蛋白水平。4组细胞Ⅱ型胶原蛋白水平比较,差异有统计学意义[(0.178±0.002),(0.188±0.003),(0.177±0.003),(0.173±0.001),F=32.905,P=0.000];对照组Ⅱ型胶原蛋白水平低于其余3组(P=0.003,P=0.000,P=0.023);醇提组高于烷提组和水提组(P=0.000,P=0.000);烷提组和水提组比较,差异无统计学意义(P=0.367)。2Bcl-2基因和Bax基因水平。4组细胞Bcl-2基因水平比较,差异有统计学意义[(0.569±0.052),(1.000±0.000),(0.636±0.072),(0.387±0.061),F=136.767,P=0.000];对照组低于其余3组(P=0.000,P=0.000,P=0.000);醇提组高于烷提组和水提组(P=0.000,P=0.000);烷提组低于水提组(P=0.045)。4组细胞Bax基因水平比较,差异有统计学意义[(1.789±0.240),(1.000±0.000),(1.374±0.226),(2.251±0.196),F=47.445,P=0.000];对照组高于其余3组(P=0.000,P=0.000,P=0.000);醇提组低于烷提组和水提组(P=0.000,P=0.003);烷提组高于水提组(P=0.000)。3基质金属蛋白酶3水平。4组细胞基质金属蛋白酶3水平比较,差异有统计学意义[(11.828±0.363)ng·mL-1,(10.685±0.317)ng·mL-1,(11.397±0.314)ng·mL-1,(13.136±0.379)ng·mL-1,F=71.401,P=0.000];对照组高于其余3组(P=0.000,P=0.000,P=0.000);醇提组低于烷提组和水提组(P=0.000,P=0.000);烷提组高于水提组(P=0.019)。结论:龟鹿�
- 邱慈鑫余添赐杨树华魏迎辰陈泽华林海英王和鸣李楠
- 关键词：龟鹿二仙胶软骨细胞BAX基质金属蛋白酶类
- 龟鹿二仙胶及其拆方对SD大鼠膝骨关节炎的影响被引量：10
- 2013年
- 目的:通过观察龟鹿二仙胶及其拆方对SD大鼠膝关节软骨退变的影响,探讨龟鹿二仙胶的配伍机制。方法:切除SD大鼠双侧卵巢、双膝内侧副韧带和前交叉韧带、实验跑台跑步4周,制作退化膝骨关节炎模型。中药灌胃2、4、8周后放射免疫法检测血清雌二醇(E2)、免疫组化检测Bax、Bcl-2、白介素1β(IL-1β)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、Ⅱ型胶原(Collagen-Ⅱ)的表达。结果:8周时龟鹿参组可显著提高大鼠血清E2水平,龟鹿杞组可显著抑制Bax、促进Bcl-2表达,龟鹿参组可显著地抑制软骨细胞产生IL-1β和MMP-13、提高Collagen-Ⅱ的表达,其效果均与龟鹿二仙胶作用相同。结论:龟鹿配伍人参可提高血清E2水平、抑制关节软骨产生炎症、促进软骨细胞Collagen-Ⅱ合成;龟鹿配伍枸杞可以抑制软骨细胞凋亡。
- 李楠杜江黄远鹏李奕修余添赐魏迎辰高弘建赵诣王和鸣
- 关键词：龟鹿二仙胶SD大鼠软骨细胞雌二醇
