国家自然科学基金(30371397)
- 作品数：12 被引量：23H指数：4
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- 相关机构：华中科技大学武汉大学武汉市儿童医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 先天性巨结肠症内皮素受体B基因的多态性研究
- 2007年
- 目的观察中国汉族散发性先天性巨结肠症(sHD)G蛋白藕联受体家族的内皮素受体-B(EDNRB)易感基因的突变与多态性特征,探讨碱基改变与先天性巨结肠症的发病关系。方法收集104例散发性先天性巨结肠与其中42例患儿(子代组)的双亲血样,120例正常儿童作对照,聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)与DNA测序确定并比较EDNRB基因外显子1、2的突变与多态性位点(SNPs)等位基因与基因型分布差异,分析sHD表型与SNPs的关联,传递不平衡检验(TDT)分析三样本家系SNPs的传递不平衡。结果EDNRB基因外显子1、2均未发现突变,外显子1检测2个S NPs,c311 A→T(N104I)为新发现位点;病例组c311 A→T位点的等位基因和基因型频率均与对照组差异有统计学意义(P<0.01),c99C→T位点的差异无统计学意义;TDT检验发现亲子代间在c311 A→T(N104I)位点存在传递不平衡,杂合体双亲优先传递等位基因T给子代;临床表型与SNPs等位基因分布无明显关联。结论中国汉族散发性先天性巨结肠EDNRB基因的多态性可能在发病中起重要作用。
- 卢晓明牛彦锋王国斌舒晓刚汤绍涛陶凯雄杨鹏魏明发
- 关键词：先天性巨结肠基因多态性
- 前腹壁悬吊腹腔镜辅助下婴儿先天性巨结肠根治术的研究被引量：5
- 2005年
- 目的探讨前腹壁悬吊(免气腹)腹腔镜辅助下婴儿先天性巨结肠(HD)根治术的特点。方法用气囊导尿管充生理盐水1.5～2.0ml前腹壁悬吊行13例前腹壁悬吊腹腔镜辅助下婴儿HD根治术,比较了13例免气腹组和17例CO2气腹组手术中血流动力学参数和量化手术效果参数。结果气腹组在术中因腹内压增高可以致血流动力学参数平均动脉压(MAP)、PaCO2、心脏指数(CI)、HCO3-发生显著性变化,前腹壁悬吊组则保持稳定的参数值。两组在手术效果上差异无统计学意义。结论前腹壁悬吊腹腔镜辅助下HD根治术其前腹壁提拉装置构思新颖,实用性强,具有安全性,可行性,大大减少了由于腹内高压对血流动力学参数的影响,该手术方法值得在临床上推广。
- 王国斌杜寒松周欣陶凯雄
- 关键词：前腹壁腹腔镜婴儿先天性巨结肠根治术气囊导尿管
- RET基因多态性与中国湖北地区汉族人群先天性巨结肠的相关性研究被引量：6
- 2006年
- 目的建立中国汉族人群RET基因位于exon2(密码子45)、exon13(密码子769)、exon11(密码子691)和exon15(密码子904)的基因多态性的基因型和等位基因频率的分布背景,探讨其基因多态性与先天性巨结肠的关系。方法应用PCR-RFLP在中国湖北地区汉族人群中检测正常对照组(122例)及散发性先天性巨结肠组(HD组,94例)G45A(GCG→GCA)、T769G(CTT→CTG)、G691A(GGT→AGT)和C904G(TCC→TCG)的单核苷酸多态性(singlenucleotidepolymorphisms,SNPs)。结果G45A、T769G和G691A在对照组中均存在多态性,但未发现C904G存在基因多态性,均为CC型。G45A在对照组中的基因型频率分别为AA0.17、AG0.72和GG0.11,突变型A和野生型G等位基因的频率为0.53和0.47;而G45A在HD组则分别为AA0.61、AG0.35和GG0.04,突变型A和野生型G等位基因的频率为0.78和0.22。T769G在对照组中基因型频率分布分别为GG0.30、GT0.52和TT0.18,G和T等位基因的频率为0.56和0.44;而T769G在HD组则分别为GG0.49、GT0.36和TT0.15,突变型G和野生型T等位基因的频率为0.67和0.33。两组间的两个位点的基因型和等位基因的分布频率差异均有统计学意义(χ2=28.64,P<0.001;χ2=5.27,P=0.022)。G691A在对照组中基因型频率分别为AA0.05、AG0.16和GG0.79,突变型A和野生型G等位基因的频率为0.13和0.87;而在HD组则分别为AA0.02、AG0.14和GG0.84,突变型A和野生型G等位基因的频率为0.09和0.91,两组间比较差异无统计学意义(χ2=1.232,P=0.267)。结论在中国湖北地区汉族人群中,RET密码子904可能不存在基因多态性,未发现G691A与先天性巨结肠存在相关性,而G45A和T769G的基因多态性可能与中国湖北地区汉族人群先天性巨结肠相关。
- 杜寒松王国斌张颖陶凯雄汤绍涛牛彦锋
- 关键词：HIRSCHSPRUNG病基因多态性
- 小鼠巨结肠模型的建立及其生物学特性研究被引量：1
- 2008年
- 目的探讨小鼠巨结肠模型的建立及其生物学特性。方法90只雄性昆明小鼠随机分为3组，实验组以0．1％Benzalkonium chloride（BAC）处理降结肠15min，对照组以生理盐水代替。术后分别于第2、7、14、21、28天通过大体观察，组织学、免疫组织化学及逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测观察该模型相关生物学特性。结果自术后第7天开始，实验组HE及免疫组织化学染色可见肌层神经节细胞明显减少至完全消失，平滑肌细胞及黏膜层无明显变化，RT-PCR显示NF舢、ACHE、GFAP表达下调。对照组无明显变化。结论运用0．1％Benzalkonium Chloride（SAC）可以成功构建小鼠巨结肠模型，该模型与先天性巨结肠具有相似的病理特征，为下一步的神经干细胞抑制奠定实验基础。
- 舒晓刚陈景波王国斌陶凯雄孙念峰张景辉
- 关键词：巨结肠动物苯扎氯铵
- 大鼠胶质细胞源性营养因子及内皮素B受体基因共重组腺病毒的构建及表达被引量：1
- 2006年
- 目的构建胶质细胞源性营养因子(GDNF)及内皮素B受体基因(EDNRB)共表达腺病毒并观察其在神经干细胞(NSC)中的表达。方法利用AdEasy腺病毒表达系统构建GDNF及EDNRB基因共表达腺病毒Ad-GE,体外感染NSC后通过观察绿色荧光蛋白表达及RT-PCR、流式细胞仪法鉴定外源基因的表达。结果NSC经Ad-GE感染后24h可观察到绿色荧光蛋白(GFP)表达,RT-PCR、流式细胞仪法证实外源性GDNF及EDNRB基因均可在NSC中表达。结论成功构建GDNF及EDNRB基因共表达重组腺病毒,证实了其在NSC的表达,为先天性巨结肠的联合基因治疗打下基础。
- 孙念峰舒晓刚张景辉陈景波王国斌
- 关键词：干细胞腺病毒
- 中国大陆人散发性先天性巨结肠症患者内皮素受体B基因的研究被引量：2
- 2006年
- 目的探讨中国大陆人散发性先天性巨结肠症(sHD)易患基因内皮素受体B(EDNRB)的突变与多态性特征。方法以92例sHD及其中32例患儿双亲为研究对象,并以60例正常儿为对照。提取受检者外周静脉血DNA,采用聚合酶链反应-单链构象多态性技术(PCR-SSCP)对EDNRB基因外显子-2(exon-2)进行分析,并通过DNA测序检测阳性标本的核苷酸改变方式,与文献报道的其他种族sHD同一基因特征做比较。结果全部标本EDNRB基因exon-2均未发现突变与多态性位点的存在。结论中国大陆人sHD患者EDNRB基因的exon-2不存在突变与多态性位点。
- 牛彦锋王国斌卢晓明杜寒松杨鹏陶凯雄汤绍涛
- 关键词：巨结肠基因突变基因多态性
- 湖北汉族人群先天性巨结肠症内皮素受体B基因多态性与突变的研究被引量：4
- 2006年
- 目的研究中国湖北汉族人群内皮素受体-B(EDNRB)基因的多态性与散发性先天性巨结肠症发病的关系。方法收集104例散发性先天性巨结肠症患儿(病例组)及其中42例(子代组)的双亲(双亲组)血样,120例正常儿童作对照(对照组)。PCR-SSCP与DNA测序确定并比较EDNRB基因外显子4的突变与多态性位点(SNPs)等位基因与基因型分布差异,分析sHD表型与SNPs的关联,传递不平衡检验(TDT)分析3样本家系SNPs的传递不平衡。结果EDNRB基因外显子4,检测到c831G→A(L277L)多态性位点,未发现突变;病例组c831G→A位点的等位基因A频率(68%∶53%)和纯合子AA基因型频率(49%∶30%)均明显高于对照组(P<0.01);病例组等位基因A频率明显高于双亲组(68%∶54%,P<0.01);短段型(SSA)患者等位基因A频率明显高于长段型(LSA)患者(76%∶63%,P<0.05);TDT检验未发现亲子代间在c831G→A(L277L)位点存在传递不平衡。结论中国湖北汉族人群EDNRB多态性与散发性先天性巨结肠症发病关系密切,尤其与短段型表型关系密切。
- 牛彦锋王国斌卢晓明汤绍涛杜寒松杨鹏陶凯雄魏明发
- 关键词：突变
- 胶质细胞源性神经营养因子基因重组腺病毒穿梭质粒的构建及鉴定
- 2006年
- 目的克隆大鼠胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因,构建含有GDNF基因的重组腺病毒载体,为转染神经干细胞和基因治疗奠定基础。方法从大鼠脑组织中提取总RNA,用逆转录聚合酶链反应方法扩增出约660bp的片段,并将该片段克隆到载体pAdTrack-CMV中,进行酶切鉴定和序列分析。结果证实成功构建了含有GDNF基因的重组腺病毒质粒。结论克隆到正确的大鼠GDNF基因,并构建出重组质粒pAd-GDNF,为下一步重组腺病毒颗粒和基因治疗打下基础。
- 孙念峰舒晓刚张景辉王国斌
- 关键词：基因克隆逆转录聚合酶链反应腺病毒载体
- 中国两个地区散发性先天性巨结肠症患儿内皮素受体B基因的研究被引量：1
- 2008年
- 目的探讨中国人散发性先天性巨结肠症(sporadic HD,sHD)易患基因内皮素受体-B的突变与多态性特征,比较不同种族sHD在基因改变上存在的异同。方法2002年1月至2004年12月收集武汉、太原地区92例sHD及32例患儿双亲的标本,并以60例正常儿为对照。提取外周静脉血DNA,采用聚合酶链反应-单链构象多态性方法(PCR-SSCP)对内皮素受体-B(EDNRB)基因exon-2进行分析,并通过DNA测序检测阳性标本的核苷酸改变方式,与文献报道的其他种族sHD同一基因特征做比较。结果全部标本EDNRB基因exon-2均未发现突变与多态性位点的存在。结论中国大陆sHD患者EDNRB基因的exon-2与大多数种族一样都不存在突变与多态性位点,与南非、中国香港地区sHD该基因特征存在差异。
- 牛彦锋王国斌卢晓明杜寒松杨鹏陶凯雄汤绍涛魏明发周欣
- 关键词：巨结肠先天性单链构象
- 中国汉族人群RET基因多态性与先天性巨结肠的遗传易感性研究被引量：5
- 2005年
- 目的建立中国汉族人群RET基因密码子45和769的基因型和等位基因频率的分布背景,探讨其基因多态性与先天性巨结肠的关系。方法应用PCR-RELP在中国人群中检测对照组(n=122)及散发性先天性巨结肠组(n=94)G45A和T769G的单核苷酸多态性(single nucleotide pol-ymorphisms,SNPs)。结果45位密码子和769位密码子在中国人群中均存在多态性。G45A在正常对照和疾病组中基因型频率分别为:对照组,AA0.17、AG0.72、GG0.11,突变型A和野生型G等位基因的频率为0.53、0.47;HD组,AA0.61、AG0.35、GG0.04,突变型A和野生型G等位基因的频率为0.78、0.22;T769G在正常对照和疾病组中基因型频率分布分别为:对照组,GG0.30、GT0.52、TT0.18,突变型G和野生型T等位基因的频率为0.56、0.44;HD组,GG0.49、GT0.36、TT0.15,突变型G和野生型T等位基因的频率为0.67、0.33。两个位点的基因型和等位基因的分布频率在两组间均有显著性差异(χ2=28.64,P<0.001;2χ=5.27,P=0.022)。结论RET密码子45和769的基因多态性可能与中国汉族人群先天性巨结肠相关。
- 王国斌杜寒松张颖陶凯雄牛彦锋魏明发汤绍涛
- 关键词：巨结肠先天性RET原癌基因
