上海市自然科学基金(07ZR14076)
- 作品数：12 被引量：53H指数：5
- 相关作者：韩宝三彭承宏沈柏用叶萍李宏为更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院上海理工大学潍坊医学院附属医院更多>>
- 发文基金：上海市自然科学基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 构建与人肝细胞系L02相容的聚丙烯生物杂化界面(英文)
- 2008年
- 学术背景:具有良好生物相容性的肝细胞/聚合物界面是生物反应器设计和构建的关键因素,然而,目前临床实践中使用的生物反应器并不理想。目的:构建与人肝细胞相容的聚丙烯生物杂化界面,为用聚丙烯中空纤维管构建生物人工肝反应器奠定基础。设计、时间及地点:对比观察,细胞相容性实验,于2003-02/10在上海交通大学完成。材料:聚丙烯利用光化学接枝聚合改性技术,在微孔聚丙烯超滤膜表面通过化学键的形式接枝亲水性丙烯酰胺基团形成接枝改性微孔聚丙烯超滤膜。方法:将人肝细胞系L02接种于聚丙烯膜、接枝改性聚丙烯膜表面,以聚苯乙烯作为正常对照。主要观察指标:聚丙烯膜接枝改性前后的静态水相接触角度;人肝细胞系L02在不同材料表面形态、贴壁率及增殖活性。结果:聚丙烯膜接枝改性后的静态水相接触角小于接枝前(P<0.05)。人肝细胞L02在改性后聚丙烯膜上的贴壁率为0,细胞成球形聚集体生长,其增殖活性明显高于聚苯乙烯和改性前聚丙烯膜。结论:在聚丙烯表面接枝聚丙烯酰胺可建立良好的人肝细胞系L02与聚丙烯生物杂化界面,并可通过简单的静止培养形成肝细胞球形聚集体。
- 韩宝三沈柏用张瑞高长有马祖伟王兆海程东峰彭承宏李宏为
- 关键词：肝细胞聚丙烯类表面改性生物材料
- 微载体培养技术的研究与进展被引量：12
- 2010年
- 背景:微载体培养技术是一种新兴的大规模细胞培养技术,广泛地应用于组织工程中种子细胞的扩增。微载体具有比表面积大等优点,在微载体培养技术中具有决定性作用。目的:文章就近年来制备微载体的生物材料和方法的研究进展做一综述,为微载体培养技术和组织工程的研究提供理论基础。方法:由第一作者于2009-10应用计算机检索PubMed数据库、万方数据库和维普数据库相关文献。英文资料的检索时间为1967/2009;中文资料的检索时间为1990/2009。英文检索词为"microcarrier,biomaterials cell culture,tissue engineering";中文检索词为"微载体,生物材料,细胞培养,组织工程"。纳入标准:①微载体材料、制备工艺及性能的研究。②微载体细胞培养的研究。③动物实验及临床应用。阅读标题和摘要进行筛选,共纳入34篇用于综述。结果与结论:虽然国内外研究人员在微载体的研究与制备方面做了很多工作,但迄今仍与临床应用有一定的距离。目前的主要工作是将不同种类的材料通过新型的工艺制备得到复合材料,通过表面改性来调节微载体的力学和生物降解性能。
- 周燕刘宝林杨波王欣彭承宏韩宝三
- 关键词：微载体生物材料细胞培养
- 肝细胞球形聚集体培养研究进展被引量：1
- 2009年
- 生物人工肝在治疗肝功能衰竭中起重要作用。球形聚集体培养作为肝细胞培养的主要方式之一,旨在达到高密度、维持长时间生物活性的目标。文章就近年来肝细胞球形聚集体培养的影响因素和培养方式作一综述。
- 匡洁韩宝三彭承宏沈柏用
- 关键词：生物人工肝肝细胞
- 微囊化细胞冻存的研究进展被引量：1
- 2010年
- 背景:细胞微囊化为细胞大规模、高活性体外培养及长期存储提供了新的途径,低温保存是目前保存细胞的重要方法,技术日新月异,复苏细胞在临床和基础研究中的应用越来越多。目的:分析近年来微囊化细胞冻存的相关研究,对微囊化细胞冻存技术的发展作一总结。方法:以"微囊,冻存"为检索词,检索中国期刊网(1979/2010)及维普数据库(1989/2010),限定文章语言种类为中文;以"Cryopreservation,Microencapsule"为检索词,检索PubMed数据库(1979/2010),限定文章语言种类为English。纳入含有微囊化细胞冻存的研究,排除其他形式细胞冻存的研究,结果以各种细胞微囊化后进行冻存处理后产生作用为指标,共检索到43篇文献。结果与结论:随着生物人工肝与以及其他细胞移植研究的深入,对微囊化细胞的需要量将显著增加,微囊化细胞的低温保存技术已成为保正其顺利应用的关键技术之一。目前,微囊化细胞的低温保存技术已经开展了不少研究,有多项研究结果表明复苏后微囊化细胞的存活率和生物学功能都能保持较好的水平,但相关机制仍未完全阐清,各种冻存方法还需要优化。
- 余松林韩宝三杜志勇吴旭波吴薇王加祥黄芳李宏为沈柏用彭承宏
- 关键词：冻存保护剂
- 微囊化技术在医学领域中的应用与进展被引量：10
- 2010年
- 背景:微囊的免疫隔离保护和可控缓释的特性得到了医学领域的重视,并已广泛应用于糖尿病、帕金森症、肝衰竭、镇痛、肿瘤等疾病治疗过程中。目的:综述微囊化技术的特性以及在医学研究领域中的应用。方法:由第一作者检索1964/2009PubMed数据库(网址http://www.ncbi.nlm.nih.gov/PubMed),2000/2009万方数据库(网址http://www.wanfangdata.com.cn)有关微囊化移植,微囊化可控缓释,微囊化技术在医学应用方面的应用方面的文献,英文关键词为"microencapsulated,transplantation,controlled release"。中文关键词为"微囊化"。结果与结论:微囊作为一种载体,为细胞提供了一个三维培养基质,改善细胞间的作用,提高细胞的功能;为异体细胞提供了免疫屏障,阻挡免疫细胞的识别,但又不妨碍营养物质、氧气及代谢产物运输;为机体提供可控的长期稳定缓释有效成分治疗疾病。微囊化技术在糖尿病方面研究比较多,在帕金森症、肝衰竭、脊髓损伤、甲状旁腺功能低下、骨科领域、肿瘤癌症等方面也有一定的探索,但微囊化技术从个别动物试验成功到真正临床广泛应用还有很漫长的历程,在拓宽微囊化技术在医学领域运用的同时,需进一步加强理想刚性结构、良好生物相容性和可控半透膜性的探索。
- 杨晓昀陈儿同周燕刘宝林张华徐文强李巧巧叶萍彭承宏韩宝三
- 关键词：微囊化生物人工肝胰岛免疫隔离
- 改良胶原酶经腹主动脉灌注消化法分离大鼠肝细胞被引量：5
- 2010年
- 背景:良好的分离技术是获取高活性肝细胞的前提。目前,国内外普遍采用的是经门静脉的两步胶原酶灌注法。但该方法仍存在胶原酶用量大、操作繁琐、流程长、对设备要求较高等问题。目的:寻找一种简单有效的大鼠肝细胞分离培养方法。方法:取SD大鼠10只,按改良经腹主动脉灌注法分离培养大鼠肝细胞,重复10次分离肝细胞实验,观察各项指标结果并与已发表文献进行对比分析。以SD大鼠作肝细胞供体,采用Ⅳ型胶原酶经腹主动脉灌注,供体肝脏肝门部结构﹑肝上及肝下腔静脉封闭保留胶原酶消化分离获取肝细胞,经200目和300目筛滤过,滤过后的悬液转移至离心管中分别以1000,500,300r/min离心各3min以纯化肝细胞,以锥虫蓝染色法测细胞活性,在倒置显微镜下观察肝细胞纯度及形态变化。结果与结论:胶原酶消化法所获取的肝细胞纯度高、形态完整、活性高。提示改良胶原酶经腹主动脉灌注消化法是一种较好的肝细胞分离方法。
- 余松林韩宝三张瑞杜志勇吴旭波吴薇王加祥黄芳李宏为沈柏用彭承宏
- 关键词：原代培养胶原酶
- 海藻酸钠/壳聚糖微囊冻存的低温显微实验被引量：5
- 2008年
- 目的研究海藻酸钠-壳聚糖-海藻酸钠微胶囊(ACA)的冻存机制,探索一种ACA微囊低温保存的降温方法。方法ACA微囊随机分为2组,分别加入生理盐水(对照组)与终浓度为10%的低温保护剂二甲基亚砜(DMSO)(DMSO组),每组ACA微囊悬液置于可控低温显微镜载物台中,分别以1、10、30、100℃/min的降温速率降温至–120℃左右时停止降温,在显微镜下观察ACA微囊的形态改变。将2组完全冷冻的ACA微囊以50℃/min复温速率复温至37℃,在倒置显微镜下观察其形态学改变,计算微囊的完好率、皱缩率与破损率。结果对照组以1、10℃/min的降温速率冻存ACA微囊时,生成的冰晶粗大,冰晶的生长可导致微囊发生形变;而DMSO组以30、100℃/min的降温速率冻存ACA微囊时,生成的冰晶较为细小,对微囊的损伤也更小,并且复温后的微囊形态保存良好,与对照组和同组以1、10℃/min降温速率冻存比较,其微囊完好率明显增高(P<0.05)。结论微囊在低温保存过程中主要受到冰晶生长所导致的机械性损伤,提高降温速率与添加低温保护剂可以有效地抑制冰晶生长。
- 叶萍陈儿同徐彬凯彭承宏沈柏用李宏为杜志勇张瑞王兆海韩宝三
- 关键词：胶囊藻酸盐壳聚糖
- 微囊胰岛移植的实验研究进展被引量：9
- 2009年
- 微囊胰岛细胞移植后能改善糖尿病的糖代谢异常,并实现对血糖的持续监测和调节,且微囊的免疫隔离作用能消除或减轻受体对异体或异种免疫排斥反应,减少或消除对免疫抑制剂的依赖。合适的囊材、合理的工艺、先进的制囊设备和胰岛分离提纯技术、适宜的移植位置能增强微囊胰岛细胞的抗机械强度,提高生物相容性,减少囊周纤维化现象,改善人工胰岛细胞的功能,延长存活时间。
- 陈儿同杨晓昀叶萍彭承宏韩宝三
- 关键词：微囊胰岛糖尿病
- 海藻酸钠/壳聚糖微囊冻存的低温显微实验(英文)被引量：4
- 2009年
- 背景:目前国内外对微囊的低温保存效果均不理想,已成为制约微胶囊广泛应用的一个重要环节。目的:观察不同溶液、不同降温速率冻存海藻酸钠-壳聚糖-海藻酸钠(alginate-chitosan-alitosan-alginate,ACA)微囊时冰晶的特点及其对微囊形态的影响,探索一种适合ACA微囊低温保存的降温方法。设计:观察实验,于2008-02/04在上海理工大学低温显微镜实验室完成。材料:应用自制的高压脉冲微胶囊成型装置制备ACA微囊。方法:在低温显微系统下以1,10,30和100℃/min的降温速率对微囊进行低温保存,最后以50℃/min复温;然后在ACA微囊悬液中加入10%二甲基亚砜,重复实验。主要观察指标:不同降温速率及添加了二甲基亚砜后冰晶生长情况及其对ACA微囊形态的影响;复温后微囊形态的变化及微囊的破损率。结果:在以小于10℃/min降温速率且不添加低温保护剂的情况下,冻结过程中生成的冰晶粗大,冰晶的生长会导致微囊发生形变,当提高降温速率、添加二甲基亚砜后,冰晶变得细小,对微囊的损伤也更小。从复温后微囊的形态来看,以超过30℃/min降温、添加10%二甲基亚砜为低温保护剂时微囊的破损率较小(P<0.05)。结论:微囊在低温保存过程中主要受到由冰晶生长引起的机械性损伤,提高降温速率及添加低温保护剂可以有效抑制冰晶的生长。
- 陈儿同叶萍徐彬凯彭承宏沈柏用李宏为韩宝三
- 关键词：微胶囊生物材料
- 微载体及其在肝细胞培养中的作用与应用被引量：4
- 2008年
- 微载体具有比表面较大等优点,是目前较常用而有效的动物细胞大规模培养的载体,微载体培养技术已经成为动物细胞工程的基础和细胞学研究的主要技术和热点之一,广泛地应用于生产一些具有重要实用和商业价值的产品,积累了大量的实践经验和关键的实验数据,并在肝细胞、软骨细胞、成纤维细胞等组织工程种子大规模扩增研究领域取得了许多进展。文章就微载体及其在肝细胞培养中的研究进展做一综述,为动物细胞培养的载体研究提供理论基础。
- 张瑞韩宝三吴薇吴旭波彭承宏
- 关键词：微载体细胞培养肝细胞生物材料
