上海市自然科学基金(07ZR14062)
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
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- 相关机构：上海市第一人民医院上海交通大学宁波市医疗中心李惠利医院更多>>
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- 表没食子儿茶素没食子酸醋对高糖环境下小鼠足细胞增殖和凋亡作用被引量：2
- 2009年
- 目的观察作为绿茶主要活性成分的表没食子儿茶素没食子酸醋(EGCG)对高糖环境下足细胞增殖和凋亡的作用并探讨其机制。方法将足细胞分为9组。组1:正常糖(5.6mmol/L)。组2:正常糖(5.6mmol/L)+0.1mmol/LH2O2。组3:DMEM高糖(25mmol/L)。组4:20μmol/LEGCG+DMEM高糖(25mmol/L)。组5:2.0μmol/LEGCG+DMEM高糖(25mmol/L)。组6:0.2μmol/LEGCG+DMEM高糖(25mmol/L)。组7:0.2mmol/L维生素E+DMEM高糖(25mmol/L)。组8:0.1μmol/LEGCG+0.1mmol/L维生素E+DMEM高糖(25mmol/L)。组9:24.4mmol/L甘露醇+5.6mmol/L葡萄糖。采用溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞增殖,在Hoechst染色共聚焦激光显微镜下观察不同浓度EGCG作用24h对足细胞凋亡的影响,采用AnnexinV-FITC法检测足细胞凋亡,CM-H2DCFDA荧光探针检测足细胞内活性氧(ROS)生成。结果①足细胞增殖:与组1比较,组2在刺激24h时的足细胞增殖的光密度(D)450值无显著变化(P>0.05),48和72h时D450值均显著降低(P值均<0.05)。与组2比较,组7和组8高糖刺激24h时的D450值显著升高(P值均<0.05),组4、组5和组6无显著变化(P值均>0.05);组4、组7和组8在刺激48、72h时的D450值显著升高(P值均<0.01)。②激光共聚焦显微镜下,凋亡细胞表现为较多的核固缩,DNA浓缩并向核膜靠拢,核质比减小,以及胞膜皱缩等早期凋亡形态学变化。组2、组3的足细胞凋亡较组1增加,组7明显少于组4、组5,组9较组2无明显增加。③不同浓度EGCG作用后,组4、组5、组8的早期凋亡细胞膜联蛋白V(+)PI(-)比例和坏死细胞膜联蛋白V(+)PI(+)V(+)比例均显著低于组2(P值均<0.05);组4、组8的早期凋亡细胞膜联蛋白V(+)PI(-)比例均显著低于组7(P值均<0.05)。④与组2比较,组424h时的ROS显著减少(P<0.05),但组6无显著改变(P>0.05);与组7比较,组424h时的ROS显著减少(P<0.05),6、12h时无显著变化(P值均>0.05)。结论EGCG(20μmol/L)作用72h促进高糖环境下足细胞增殖,EGCG降低高糖刺激�
- 戴艳于青隋伟袁伟杰
- 关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯足细胞氧化应激凋亡
- 氯沙坦联合表没食子儿茶素没食子酸酯对大鼠糖尿病肾病治疗的研究被引量：2
- 2012年
- 目的观察氯沙坦联合表没食子儿茶素没食子酸脂（EGCG）对糖尿病肾病大鼠的肾脏保护作用。方法采用链脲佐菌素（60mg·kg^-1）腹腔注射建立糖尿病大鼠模型，模型成功后分为正常组、糖尿病组、氯沙坦组、EGCG组、氯沙坦＋EGCG组。EGCG组和氯沙坦＋EGCG组每周给予ECd2G10mg·kg^-1腹腔注射，氯沙坦组和氯沙坦＋EGCG组每天给予氯沙坦40rag·kg^-1灌胃。分别测定各组4、8、12周时血肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）、葡萄糖（GLU）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（CHOL）、高低密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）、白蛋白（Alb）、24h尿蛋白定量（24hPro）。应用RealtimePCR法检测肾皮质活性氧（ReactiveOxygenSpecies，ROS）产生的主要通路NADPH氧化酶Nox4mRNA表达、Westernblot法检测肾皮质蛋白NADPH氧化酶Nox4的表达。结果糖尿病组相对于正常对照组Cr，BUN，TG，CHOL，HDL，LDL，24hPro水平均显著升高（P〈0．05）。与糖尿病组比较，氯沙坦组、EGCG组、氯沙坦＋ECa2G组大鼠Cr、24hPro有显著减少（P〈0．05），但GLU，BUN，TG，CHOL，HDL，LDL均无明显减少（P〉0．05）。与氯沙坦组和EGCG组比较，氯沙坦＋ECA2G组Cr，GLU，BUN，TG，CHOL，HDL，LDL，ALB，24hPro均有差异但差异不明显（P〉0．05）。在第4和12周与正常组比较，糖尿病组大鼠肾小球硬化明显；与糖尿病组比较，氯沙坦组、EGCG组、氯沙坦＋EGCG组大鼠肾小球硬化均显著改善；与氯沙坦组比较，EGCG组、氯沙坦＋EGCG组大鼠。肾小球硬化缓解更加明显；在电子显微镜观察下与正常组比较，糖尿病组大鼠肾小球足细胞明显融合，氯沙坦组少量融合，而EGCG组和氯沙坦＋EGCG组足细胞基本完好。糖尿病组Nox4蛋白表达最高；与EGCG组和氯沙坦组比较，氯沙坦＋EGCG组Nox4蛋白表达均降低，并且随着时间的推移降低更加显著（P〈0．05）。第4、8、12周NADPH氧
- 陈生于青黄洁波裘晓蕙袁伟杰
- 关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯氯沙坦氧化应激NADPH氧化酶糖尿病肾病
- EGCG对高糖环境下小鼠足细胞增殖和P21^(Cip1)、P27^(Kip1)表达的影响被引量：1
- 2008年
- 目的:研究作为绿茶主要活性成分的EGCG对高糖环境下足细胞增殖和周期素激酶抑制剂P21Cip1和P27Kip1表达的影响,从而探讨其作用机制。方法:以高糖(25mmol/L)培养的小鼠足细胞为研究对象,维生素E为对照,以不同浓度EGCG(0.2,10,100μmol/L)培养24h、48h、72h,首先以相差显微镜观察足细胞形态改变;其次,以BrduELISA法检测细胞增殖;流式细胞仪分析足细胞G1/G0、S期、G2/M期百分比;RT-PCR检测细胞周期依赖型蛋白激酶抑制剂P21Cip1mRNA和P27Kip1mRNA表达。结果:(1)相差显微镜下观察,高糖刺激后24h,部分足细胞脱落,呈不规则形态。(2)BrduELISA法以正常糖为对照,高糖刺激24h后,足细胞增殖无统计学差异,48h和72h后足细胞增殖减少,有统计学差异(P<0.05);以高糖组为对照,高糖刺激24h,维生素E组和维生素E+EGCG协同作用组促进足细胞增殖有统计学差异(P<0.05),EGCG(0.2,10,100μmol/L)作用组无统计学意义;48h实验结果和24h相同;72hEGCG(100μmol/L)维生素E组和维生素E+EGCG协同作用组促进足细胞增殖作用有统计学差异(P<0.01)。(3)不同浓度EGCG对高糖刺激后足细胞周期G1/G0期、S期、G2/M期百分比无统计学差异(P>0.05)。(4)RT-PCR高糖刺激后24h,足细胞P21Cip1mRNA表达有上升,但无统计学意义(P>0.05);随EGCG浓度增加,以维生素E为对照,P21Cip1mRNA表达无统计学差异(P>0.05)。正常糖组为对照,高糖刺激后24h足细胞P27Kip1mRNA表达上调,有统计学差异(P<0.01),随EGCG浓度增加,P27Kip1mRNA表达无统计学差异(P>0.05)。结论:EGCG(100μmol/L)作用72h促进高糖环境下足细胞增殖,对细胞周期作用不明显,高糖刺激后24h足细胞P27Kip1mRNA表达上调,EGCG对足细胞细胞周期依赖型蛋白激酶抑制P21Cip1mRNA和P27Kip1表达无明显影响,提示EGCG促高糖环境下足细胞增殖作用可能还存在其他机制。
- 戴艳于青袁伟杰
- 关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯足细胞
- 氧化应激在糖尿病肾脏疾病发病过程中的作用及治疗进展被引量：4
- 2014年
- 随着人们生活方式的改变,糖尿病（diabetes mellitus,DM）的发病率逐年升高,糖尿病可以引起多种并发症,导致患者的死亡.世界卫生组织指出,如果不采取重大措施,2025年全世界将出现3.8亿例糖尿病患者;我国成人中约有1.139亿糖尿病患者及约5亿糖尿病前期人群,居世界第一位[1],而且数量日益增多.因此,DM已经成为当前威胁人类健康的主要疾病,引起全球瞩目的焦点.
- 朱琳于青
- 关键词：糖尿病肾脏疾病发病过程氧化应激世界卫生组织糖尿病前期
- 表没食子儿茶素没食子酸酯对高糖环境下体外小鼠足细胞活性氧的影响被引量：3
- 2009年
- 目的观察不同浓度表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对高糖造成氧化应激状态下体外小鼠足细胞损害的作用并探讨其机制。方法以高糖（25mmol／L）培养的小鼠足细胞为研究对象，维生素E培养为对照。首先以MTT法检测细胞活力，再在激光共聚焦显微镜下以CM-H2DCFDA荧光探针观察不同浓度EGCG（0．2、10、100μmol／L）刺激足细胞6、12、24h后活性氧（ROS）生成，并以流式细胞仪定量分析ROS平均荧光强度。RT—PCR法检测足细胞内ROS产生的主要通路NADPH氧化酶各亚基mRNA（ph22phox、p47phox、p67phox）的表达。结果高糖刺激下6h，足细胞ROS生成显著增加（P〈0．01）。正常糖组和甘露醇组培养12hROS生成无显著增加（P〉0．05）。EGCG 0．2μmol／L作用6h可显著降低高糖环境下体外小鼠足细胞ROS水平（P〈0．01）。与高糖组比较，EGCG（100μmol／L）显著减少NADPH氧化酶亚基p22phox和p67phox mRNA表达（均P〈0．05）。与维生素E组比较，EGCG（0．2μmol／L）和维生素E（0．2mmol／L）协同作用组显著减少p47phox mRNA表达（P〈0．05）。结论EGCG能缓解高糖环境下体外足细胞氧化应激状态，对高糖培养下足细胞有保护作用。
- 戴艳于青徐琦姚建袁伟杰
- 关键词：足细胞氧化性应激活性氧表没食子儿茶素没食子酸酯
