国家自然科学基金(30371469)
- 作品数：12 被引量：43H指数：5
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- 影响角质形成细胞再上皮化的分子机制新进展被引量：2
- 2009年
- 创面的再上皮化是一个以角质形成细胞为主导的多因素协同作用的过程，能否实现再上皮化对创面愈合的转归有着重要的影响。延迟再上皮化的过程往往会导致伤口愈合不佳，甚至发生病理性瘢痕或慢性难愈性创面。
- 刁建升张曦郭树忠
- 关键词：角质形成细胞再上皮化分子机制慢性难愈性创面创面愈合病理性瘢痕
- 阻抑结缔组织生长因子表达对瘢痕疙瘩成纤维细胞的影响被引量：1
- 2009年
- 目的观察结缔组织生长因子（CTGF）RNA干扰对瘢痕疙瘩成纤维细胞（KF）增殖以及Ⅰ型胶原合成的影响。方法设计合成3条CTGF小干扰RNA（siRNA）序列并克隆到pRNAT-6．1／Neo载体中；实时定量逆转录-聚合酶链反应（qRT-PCR）检测KF中CTGF和Ⅰ型胶原的表达，计算KF细胞数目。结果合成的3个CTGFsiRNA载体中CTGFsiRNA3的干扰效果最强，将CT—GFmRNA的相对表达量从3．13±0．17降至0．71±0．02，并能将KF中的Ⅰ型胶原的mRNA水平从2．04±0．10降至0．60±0．04（P〈0．01）。KF对照组5d的细胞数目为（10．50±0．25）×10^4，而CT-GF siRNA3组5d的细胞数目为（6．83±0．29）×10^4（P〈0．01）。结论CTGFRNA干扰能抑制KF的CTGF表达，产生抑制Ⅰ型胶原合成和细胞增殖的生物学作用。
- 夏炜潘宝华刘宾张曦郑岩郭树忠
- 关键词：瘢痕疙瘩成纤维细胞结缔组织生长因子
- 阻断Notch信号对兔耳增生性瘢痕形成的影响及作用机制被引量：6
- 2009年
- 目的探讨Notch信号相关分子对增生性瘢痕形成的影响。方法用16只新西兰大耳白兔建立耳增生性瘢痕模型，分别在伤后1、3、5、7和14d向左耳瘢痕灶内注射含有100μmol／LNotch信号途径抑制剂N-[N-（3，5-二氟苯乙酰基-L-丙氨酰基）]-（S）-苯基甘氨酸叔丁酯（DAPT）的稀释液（二甲基亚砜和生理盐水稀释）0．1ml（DAPT组），右耳在相同时点瘢痕灶内注射生理盐水稀释的二甲基亚砜（对照组）。术后14、21、28和35d各处死4只兔，切取瘢痕标本，HE染色观察并计算瘢痕增生指数和成纤维细胞密度，免疫组织化学染色观察表皮分化标志物角蛋白19（K19）、K14、外皮蛋白和Notch下游分子P21、P63的表达。结果DAPT组术后21、28、35d瘢痕增生指数（分别为1．93±0．32、1．82±0．36、1．79±0．25）和成纤维细胞密度[分别为（4．08±0．88）、（3．30±0．53）、（3．19±0．73）×10^3／mm^2]均明显低于对照组[2．56±0．29、2．61±0．30、2．58±0．39和（5．45±0．99）、（4．80±1．13）、（4．43±1．17）×10^3／mm^2，均P〈0．01]。DAPT组术后14d瘢痕表皮K19、K14和P63表达阳性率（28．6％±5．7％、53．1％±4．5％、57．0％±5．8％）均明显高于对照组（10．1％±2．8％、30．8％±4．9％、16．5％±2．2％，均P〈0．01），而外皮蛋白和P21表达阳性率（12．3％±1．9％、11．0％±1．7％）均明显低于对照组（29．3％±4．6％、44．3％±3．5％，均P〈0．01）。结论阻断Notch信号可以抑制表皮细胞的过度分化，从而抑制兔耳增生性瘢痕的形成。
- 刁建升张曦任静曾海峰刘蓓马福成王映梅杨晓婷郭树忠夏炜
- 关键词：瘢痕
- 表皮型脂肪酸结合蛋白的研究进展被引量：8
- 2009年
- 表皮型脂肪酸结合蛋白(epidermal fatty acid binding protein,E-FABP)是脂肪酸结合蛋白家族中的成员,已经证实E-FABP不仅在皮肤组织中的角质形成细胞有表达,还在多种细胞和组织中有表达。最近研究表明,E-FABP与包括肿瘤在内的多种疾病的发生发展密切相关。
- 刁建升张曦郭树忠
- 关键词：脂肪酸脂肪酸代谢肿瘤
- 增生性瘢痕表皮细胞差异蛋白的初步分析被引量：2
- 2005年
- 目的检测并鉴定增生性瘢痕角质形成细胞(HK)较正常者差异表达的蛋白质,揭示 HK在增生性瘢痕(HS)形成过程中的作用。方法利用消化法分离5例HS(均位于四肢、处在增生期)组织HK,提取其中总蛋白质,利用双向电泳技术展示蛋白质分子的差异表达,并对差异蛋白进行质谱分析。结果初步建立了>600个点的在体HK双向电泳图谱,筛选差异蛋白质点24 个,其中HK较正常高表达点8个,低表达点9个,极低表达4个,新发现的蛋白质点3个;对2个点质谱鉴定结果为Maspin前体与Zinc finger protein 226。结论消化分离法获得在体HK并建立其2-D图谱的方法可行,为HS相关蛋白质组研究奠定了一定基础。初步筛选的24个差异蛋白质点及质谱分析所得结果提示HK蛋白表达存在异常,可能与HS的形成有关。
- 张曦郭树忠张琳西潘阳林武丽华
- 关键词：增生性瘢痕表皮细胞蛋白质组学质谱
- 增生性瘢痕表皮细胞双向电泳图谱的建立及差异蛋白展示被引量：1
- 2005年
- 目的 建立在体增生性瘢痕表皮细胞蛋白质分子双向电泳 (2-DE)技术 ,筛选出增生性瘢痕表皮细胞较正常表皮细胞差异表达的蛋白质 ,为揭示表皮细胞在增生性瘢痕形成过程中的作用奠定基础。方法 利用消化法分离出在体的增生性瘢痕组织中的表皮细胞 ,提取其中总蛋白质 ,利用双向电泳技术展示蛋白质分子的表达 ,通过Melanie 3.0软件对凝胶图像进行分析 ,将结果与数据库中正常表皮细胞 2 DE图谱进行比较。结果 建立了能够显示超过 6 0 0个蛋白质点的在体增生性瘢痕表皮细胞双向电泳图谱 ,通过比较筛选出在位置、形状或密度上存在差异的蛋白质点 2 4个。其中高表达的点有 8个 ,低表达点有 9个 ,表达缺失或极低表达点有 4个 ,新发现蛋白质点 3个。结论 采用消化法分离在体增生性瘢痕表皮细胞建立其 2-DE图谱的方法是可行的 ,为进一步进行增生性瘢痕相关性蛋白质组研究奠定了基础。初步筛选出的 2
- 张曦郭树忠张琳西武利华潘阳林
- 关键词：增生性瘢痕表皮细胞双向电泳银染
- 角质形成细胞源TGF-β_1对成纤维细胞的作用被引量：1
- 2006年
- 目的研究正常角质形成细胞分泌的TGF-β1对正常成纤维细胞生物学行为的影响。方法采用免疫组化方法检测角质形成细胞分泌TGF-β1,以不同浓度TGF-β1抗体阻断角质形成细胞条件培养液中的TGF-β1,观察阻断前后角质形成细胞条件培养液对正常成纤维细胞增殖,胶原分泌的影响。结果细胞玻片可见大量染色阳性角质形成细胞,经TGF-β1抗体阻断后的角质形成细胞条件培养液,对成纤维细胞的促增殖作用明显减弱,胶原分泌减少。结论正常角质形成细胞分泌大量TGF-β1,可促进成纤维细胞增殖,促进胶原分泌。
- 厉孟张琳西夏炜郭树忠
- 关键词：角质形成细胞成纤维细胞胶原分泌
- 角质形成细胞源IL-1α对成纤维细胞增殖及胶原分泌的影响被引量：1
- 2006年
- 目的:研究角质形成细胞分泌的IL-1α对成纤维细胞生物学行为的影响。方法:组织块法培养成纤维细胞,消化法培养角质形成细胞,采用免疫组化方法检测角质形成细胞分泌的IL-1α;成纤维细胞中加入含不同浓度IL-1α抗体(0.04μg/ml,0.2μg/ml,1μg/ml)的角质形成细胞条件培养液为实验组,含DMEM的条件培养液为对照组,采用Cellcountingkit-8、放免法测定成纤维细胞增殖、胶原合成。结果:细胞爬片可见大量染色阳性角质形成细胞,细胞增殖测定,各实验组吸光度(A)值与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);随抗体浓度增高,A值减小,0.2μg/ml及1μg/ml浓度组与0.04μg/ml浓度组比较,差异有统计学意义(P<0.01);胶原分泌浓度测定,各实验组与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);随抗体浓度及胶原浓度增高,0.2μg/ml及1μg/ml浓度组与0.04μg/ml浓度组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:正常角质形成细胞分泌大量IL-1α,可促进成纤维细胞增殖,抑制胶原分泌。
- 厉孟张琳西夏炜郭树忠
- 关键词：角质形成细胞IL-1Α成纤维细胞细胞增殖胶原分泌
- 角质形成细胞条件培养液对成纤维细胞增殖与胶原分泌影响的研究被引量：1
- 2006年
- 目的探讨正常的角质形成细胞对成纤维细胞生物学行为的影响。方法组织块法培养成纤维细胞,分别加入12.5%、25%与50%浓度的角质形成细胞条件培养液为实验组,加入不含血清DMEM为对照组,采用MTT、羟脯氨酸比色法测定成纤维细胞增殖、胶原合成;以流式细胞仪测定50%浓度角质形成细胞条件培养液组及对照组成纤维细胞生长周期。结果细胞增殖测定,各实验组吸光度(A)值与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);随浓度增高,A值增加,25%及50%浓度组与12.5%浓度组比较,差异有统计学意义(P<0.01);25%及50%浓度组间比较,差异无统计学意义(P>0.01)。胶原合成测定中,各实验组A值与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.01);各实验组组间比较,差异无统计学意义(P>0.01)。细胞周期测定见,50%浓度组可明显促进成纤维细胞通过G1/S及S/G2限制点,S期及G2/M期细胞与对照组相比明显增多,G0/G1期细胞与对照组相比明显减少,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论正常角质形成细胞的上清液可促进成纤维细胞的增殖,但对其胶原分泌影响不明显。
- 厉孟张琳西胡强李丹郭树忠
- 关键词：角质形成细胞成纤维细胞细胞增殖胶原分泌
- JNK和TGF-β信号途径协同介导CTGF在瘢痕疙瘩成纤维细胞中过度表达被引量：6
- 2009年
- 目的:比较结缔组织生长因子(CTGF)在瘢痕疙瘩成纤维细胞(KF)和正常真皮成纤维细胞(NF)中的表达以及对血清刺激的反应;研究介导CTGF在KF中表达的信号途径。方法:在血清刺激前30min给予小分子人工合成的信号通路抑制剂预处理,分别为:PI3K抑制剂wortmannin(100nM);ERK抑制剂PD98059(50mM);p38MAPK抑制剂SB203580(10mM);JNK抑制剂SP600125(25mM);以及TGF-βI型受体抑制剂SB431542(0.1μM、0.5μM、1μM和10μM),空白对照组仅加入溶剂DMSO预处理。使用定量实时反转录聚合酶链反应比较CTGF在瘢痕疙瘩成纤维细胞(KF)和正常皮肤来源的成纤维细胞(NF)中的表达。结果:KF血清刺激后CTGF的表达迅速升高,而在NF血清刺激后仅少量上升。JNK抑制剂SP600125和TGF-βI型受体抑制剂SB431542对CTGF表达的升高具有显著的抑制作用(P<0.05)。结论:KF中的CTGF血清反应需要JNK和TGF-β信号途径的协同作用。
- 张斌马显杰刘宾张曦郑岩刘丹郭树忠夏炜
- 关键词：瘢痕疙瘩成纤维细胞结缔组织生长因子
