国家自然科学基金(30772871)
- 作品数：12 被引量：183H指数：10
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- 中药复方对流感病毒性肺炎小鼠肺血管通透性的影响及机制被引量：10
- 2011年
- 目的观察经典合方犀角(水牛角)地黄汤合银翘散对流感病毒感染致病毒性肺炎小鼠肺血管通透性的影响,并探讨其作用机制。方法 BALB/c小鼠216只随机分为3组,正常组、模型组、药物组,25μL 50LD50病毒液滴鼻建立流感病毒鼠肺适应株感染的小鼠肺炎模型(除正常组外),感染后1 h,正常组和模型组予以双蒸水灌胃;药物组予中药23 g/(kg.d)灌胃;各组均给药2次/d,连续给药5 d。感染后的2、4、6 d,处死小鼠,取肺组织称重以检测肺指数、肺含水量;1%伊文氏兰5 mL/kg尾静脉注射检测肺血管通透性;放免法测定肺组织中前列腺素2(PGE2)和磷脂酶A2(PLA2)含量,酶免法测定肺组织中白三烯B4(LT-B4)含量;RT-PCR检测肺组织中水通道蛋白(AQP-1)的mRNA水平。结果病毒感染后,模型组肺指数、肺含水量持续升高,犀角(水牛角)地黄汤合银翘散在第4、6天明显降低了肺指数(P<0.01,P<0.01),在第6天时降低了肺含水量(P<0.05);模型组肺血管通透性在感染后第4天和第6天均明显升高,犀角(水牛角)地黄汤合银翘散明显降低了肺血管通透性(P<0.01)。感染后,模型组肺组织中PGE2、PLA2、LT-B4的含量均明显升高,犀角(水牛角)地黄汤合银翘散不同程度地抑制了PGE2、PLA2、LT-B4的产生;与正常组比较,模型组AQP-1 mRNA在第4天、第6天时较低(P<0.01),犀角(水牛角)地黄汤合银翘散组在第6天时AQP-1 mRNA含量较模型组高,差异有显著性(P<0.01)。结论犀角(水牛角)地黄汤合银翘散通过抑制流感病毒感染后肺组织中PGE2、PLA2、LT-B4的释放,提高AQP-1的表达,从而降低了肺血管通透性,对病毒性肺炎中肺水肿的形成,起到改善作用。
- 吴莹李季倩孟建路广林吴珺郝钰
- 关键词：病毒性肺炎炎性介质肺血管通透性水通道蛋白小鼠
- 截断疗法与常规疗法对小鼠流感病毒性肺炎治疗作用的比较被引量：7
- 2015年
- 目的比较截断疗法和常规疗法对小鼠流感病毒性肺炎的治疗作用。方法 ICR小鼠80只,分为正常组、模型组、常规疗法组、截断疗法组,以流感病毒鼠肺适应株FM1病毒液滴鼻感染后1 h灌胃给药,截断疗法组以犀角地黄汤合银翘散水煎剂灌胃;常规疗法组第1、2、3天以银翘散水煎剂灌胃,第4、5、6、7天以犀角地黄汤水煎剂灌胃,连续给药7 d,观察14 d,计算小鼠的生存率、平均存活天数、体重变化。Balb/c小鼠128只,分为以上4组,处理同上,分别于第2、4、6、8天处死动物并取材、检测。观察不同时间点小鼠肺组织病毒滴度、肺指数;观察第8天小鼠肺大体及肺组织病理变化。结果截断疗法组与常规疗法组比较,生存率升高一倍,平均存活天数明显升高;截断疗法组在第6、8天较常规疗法组肺指数明显降低,在第2、4、6、8天肺组织病毒滴度较常规疗法组均有所下降,但无统计学意义。结合肉眼观察肺大体病变及光镜下观察小鼠肺部病理改变,截断疗法组病变较常规疗法组显著减轻。结论截断疗法对重症小鼠流感病毒性肺炎的治疗作用优于常规疗法,其机制可能不在于对病毒的抑制作用强,而在于对病毒感染后机体发生的炎症级联反应抑制作用强。
- 董莹莹吴珺陈丹军李根茂葛东宇邱泽计郝钰
- 关键词：截断疗法病毒性肺炎流感病毒小鼠
- 黄芩及其成分抗流感病毒感染的实验研究进展被引量：12
- 2014年
- 黄芩性味苦寒,可清热燥湿、泻火解毒,历代医籍中记载了黄芩及其配伍方剂治疗肺疾病的功效,现代临床治疗流感的方剂和制剂中黄芩也是常用的一味中药,。黄芩的主要有效成分为黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素等,现代研究表明黄芩及其成分对多种流感病毒感染的肺炎动物模型确有效果,其作用机制包括直接抗病毒作用和调节免疫炎症反应两方面。黄芩及其成分通过阻止病毒吸附、抑制病毒基因复制和蛋白合成、抑制神经氨酸酶活性等起到直接的抗病毒作用;通过调节促炎性细胞因子的合成和释放、抑制炎症介质、抗氧化、清除自由基等作用,抑制免疫炎症反应,减轻病理损伤。在调节免疫炎症反应方面的研究总体还偏少,研究也不够系统、深入。今后应加强在调节免疫炎症机制方面的研究,突出中药的特点,阐明黄芩及其成分的药效机制,最终开发出抗流感病毒制剂。
- 王羽侬金叶智董莹莹吴莹郝钰
- 关键词：黄芩黄芩苷黄芩素汉黄芩素流感病毒
- 犀角地黄汤合银翘散含药血清抑制流感病毒感染大鼠肺泡巨噬细胞致炎物质的研究被引量：13
- 2010年
- 目的:研究犀角地黄汤合银翘散含药血清对甲型流感病毒鼠肺适应株(FM1)感染大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)后产生的致炎物质的影响。方法:运用中药血清药理学的方法制备等效剂量(13.8g/kg)的大鼠犀角地黄汤合银翘散含药血清。FM1感染NR8383细胞1h后,加入15%的犀角地黄汤合银翘散含药血清,同时设正常细胞和病毒对照组。药物作用后6、12、24h,ELISA检测细胞上清中炎症细胞因子TNF-α、MCP-1的含量,放免法检测细胞上清中炎性介质PGE2、PLA2、LTB4的含量;药物作用后8、24、36、48h,生化法检测细胞内自由基NO、iNOS含量;药物作用后24h,RealtimePCR检测细胞内TNF-α、MCP-1的mRNA水平。结果:犀角地黄汤合银翘散含药血清抑制了FM1感染NR8383细胞后TNF-α、MCP-1的转录和表达(P<0.05),抑制了NO、iNOS的产生(P<0.05),降低了PGE2、PLA2、LTB4、MDA的含量(P<0.05)。结论:犀角地黄汤合银翘散含药血清明显抑制了流感病毒感染后肺泡巨噬细胞内炎性细胞因子、炎性介质及自由基的产生,具有抗炎作用。
- 吴莹金叶智孟建吴珺于雪飞郝钰
- 关键词：含药血清流感病毒肺泡巨噬细胞
- 黄芩主要成分体外抗甲型流感病毒作用的研究被引量：45
- 2010年
- 目的比较黄芩的主要成分黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素体外抗甲型流感病毒FM1感染的作用,明确黄芩抗流感病毒的主要有效成分。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素对狗肾细胞株(MDCK)的最大无毒浓度(TC0)及半数中毒浓度(TC50),通过细胞病变效应(CPE)法观察药物对病毒致细胞病变作用的影响。MTT法检测药物不同浓度的抗病毒有效率,Probit回归法计算黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素对病毒感染的半数抑制浓度(IC50)及治疗指数(TI),荧光法检测黄芩苷对病毒神经氨酸酶活力的影响。结果黄芩苷对流感病毒所致的细胞病变作用有明显的抑制作用,当黄芩苷浓度在0.0156～0.1250g/L时,细胞存活率明显高于病毒感染组,其中以0.1250g/L组的细胞存活率最高,抗病毒有效率达94.6%,其IC50为0.0162g/L,TI为21.34;黄芩素对流感病毒所致的细胞病变有一定的抑制作用,当黄芩素浓度在0.0860g/L时,抗病毒有效率达48.72%,其IC50为0.0778g/L,TI为8.89;汉黄芩素对流感病毒所致的细胞病变无抑制作用,其IC50为0.0236g/L,TI为0.051。当黄芩苷浓度?0.0313g/L时,能明显降低病毒神经氨酸酶的活力。结论黄芩主要成分中抗流感病毒的作用为黄芩苷>黄芩素>汉黄芩素,说明黄芩抗流感病毒的主要有效成分是黄芩苷。
- 吴莹金叶智吴珺于雪飞郝钰
- 关键词：黄芩苷黄芩素汉黄芩素流感病毒体外
- In Vivo and in Vitro Antiviral Effects of Berberine on Influenza Virus被引量：15
- 2011年
- 目的将在 vitro 并且在 vivo 在流行性感冒病毒感染上探索 berberine 的潜在的效果。在 vitro 反流行性感冒病毒试金的方法被 cytopathogenic 效果和 neuraminidase 试金在 Madin 钞票犬的肾房间执行。在 vivo 反流行性感冒，病毒试金在老鼠的病毒的肺病模型上被执行。在到白天 14 postinfection 的白天 2 以内死了的老鼠的数字被记录计算死亡。在天 2， 4，和 6，在肺的病毒的 titers 被红血球凝聚决定试金；染色的 hematoxylin/eosin 被用来估计肺纸巾的病原的变化；肿瘤坏死 factor-alpha (TNF-) 和单核白血球的集中特定的 chemoattractant 分子(MCP-1 ) 被收音机免疫分析或连接酶的 immunosorbent 试金测量；氮的氧化物的集中(没有) 并且可诱导的氮的氧化物合成酶(iNOS ) 被比色的方法检测；反向的抄写聚合酶链反应被用来检测 TNF-1 和 MCP-1 的 mRNA 水平。结果 Berberine 在 cytopathogenic 效果和病毒的 neuraminidase 活动上显示出禁止的效果，与治疗学的索引 9.69。在 vivo， berberine 减少了从 90% ～ 55% 的老鼠死亡，在白天 2 postinfection 上的肺的减少的病毒 titers (P < 0.05 ) 。肺组织学分数是 1.50 虡N湯琠敨琠浥数慲畴敲猠潨汵?敢欠灥?敢睴敥??愠摮㈠???鲦????悑亘?铍钫麲??????鮢??鞪?鴿鎛鮴銣??釺?龜霿?钘颰??????亘鞪?????鎬??嚑?暑亘?斪鲝???颬嚑????鋷鏌??躬鴿?吗鳝??鶋?悑箖??骳??????趬鶝???????竾??????????蓴??？
- 吴莹李季倩金叶智吴珺王谦郝钰
- 汉黄芩素对流感病毒感染肺泡巨噬细胞NF-κB核转位及表达的影响及机制被引量：22
- 2012年
- 目的:探讨汉黄芩素对流感病毒感染大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)中核转录因子-κB(NF-κB)核转位、表达的影响及与Toll样受体7(TLR7)介导的髓样分化因子88(MyD88)依赖性信号通路的关系。方法:流感病毒感染NR8383细胞1 h后,加入含汉黄芩素的培养基(终质量浓度0.016 g.L-1),药物作用后6,12,24 h,RT-PCR检测TLR7,MyD88,NF-κB p65mRNA水平;4,6,24 h时,免疫组化法检测NF-κB p65核转位情况,并做半定量分析;24 h时,Western blot检测NF-κB p65表达水平。结果:汉黄芩素降低了流感病毒感染NR8383细胞后TLR7,MyD88,NF-κB p65 mRNA水平(P<0.05,P<0.01,P<0.05),抑制了流感病毒感染后NF-κB p65的核转位及表达(P<0.01)。结论:汉黄芩素通过抑制TLR7介导的MyD88依赖性信号通路,抑制了NF-κB p65的核转位及表达,从而减轻流感感染中的炎症反应。
- 吴莹金叶智张舒闫玥捷张津郝钰
- 关键词：汉黄芩素流感病毒TOLL样受体7髓样分化因子88
- 小檗碱改善流感病毒性肺炎小鼠肺血管通透性的作用及机制被引量：9
- 2012年
- 目的:观察小檗碱对流感病毒感染所致病毒性肺炎小鼠肺血管通透性的影响,并探讨其作用机制。方法:BALB/c小鼠108只随机分为3组,正常组、模型组、小檗碱组,25μL 50LD50病毒液滴鼻建立流感病毒感染的小鼠肺炎模型,感染后1 h,正常组和模型组予以双蒸水灌胃,小檗碱组予药物0.005 g.kg-1d-1腹腔注射;各组均给药2次/d,连续给药5 d。感染后的2 d、4 d、6 d,处死小鼠,肺组织称重以检测肺含水量;1%伊文氏兰5 mL/kg尾静脉注射检测肺血管通透性;Bicinchoninic acid(BCA)法检测肺泡灌洗液(BALF)中蛋白含量;放免法或酶免法测定肺组织中PGE2、PLA2及LT-B4含量。结果:病毒感染后,模型组肺含水量持续升高,肺血管通透性及BALF蛋白含量在感染后第4天开始明显升高,小檗碱降低了肺含水量、肺血管通透性及BALF蛋白含量(P<0.01);模型组肺组织中PGE2、PLA2、LT-B4的含量明显升高,小檗碱不同程度地抑制了PGE2、PLA2、LT-B4的表达。结论:小檗碱通过抑制流感病毒感染后肺组织中PGE2、PLA2、LT-B4的释放,降低了肺血管通透性及肺含水量,对病毒性肺炎中肺水肿的形成,起到一定的治疗作用。
- 吴莹李季倩孟建路广林郝钰
- 关键词：小檗碱病毒性肺炎流感病毒炎性介质肺血管通透性
- 犀角地黄汤合银翘散对流感病毒感染的小鼠肺组织及大鼠肺微血管内皮细胞ICAM-1和VCAM-1表达的影响被引量：13
- 2013年
- 目的:研究中医经典合方犀角地黄汤合银翘散(XDY)对流感病毒性肺炎小鼠肺组织及对流感病毒感染的大鼠肺微血管内皮细胞(RPMVECs)中细胞间黏附分子1(ICAM-1)和血管细胞黏附分子1(VCAM-1)表达的影响,探讨其治疗病毒性肺炎的机制。方法:54只雄性BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组和XDY组,每组18只,后2组以流感病毒滴鼻感染,XDY组灌胃给予XDY;在感染后的2、4和6 d分别取材,免疫组化法观察肺组织中ICAM-1和VCAM-1表达。从雄性Wistar大鼠中分离并原代培养RPMVECs,设置正常组、病毒组、病毒+XDY含药血清组、肿瘤坏死因子α(TNF-α)组和TNF-α+XDY含药血清组;刺激因素作用24 h后,real-time PCR检测ICAM-1和VCAM-1 mRNA水平,流式细胞术检测ICAM-1和VCAM-1蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组肺组织中ICAM-1和VCAM-1表达持续增多(P<0.01),而XDY组的表达均低于模型组(P<0.01);与正常组比较,流感病毒和TNF-α作用的RPMVECs中ICAM-1和VCAM-1 mRNA及蛋白表达明显升高(P<0.01),XDY能下调ICAM-1和VCAM-1 mRNA及蛋白表达(P<0.01)。结论:抑制流感病毒感染导致的RPMVECs黏附分子的表达从而抑制机体的炎症级联反应可能是XDY治疗流感病毒性肺炎的作用机制之一。
- 张晨月张舒吴莹金叶智李根茂王谦郝钰
- 关键词：流感病毒肺微血管内皮细胞细胞间黏附分子1血管细胞黏附分子1
- 犀角地黄汤合银翘散对流感病毒性肺炎小鼠肺病毒滴度和肺组织病理改变的影响被引量：27
- 2010年
- 目的观察经典合方犀角地黄汤合银翘散对流感病毒感染致病毒性肺炎小鼠的治疗作用,分析病毒滴度与肺组织病理改变的关系。方法 ICR小鼠120只随机分为6组:正常组,模型组,犀角地黄汤合银翘散中药高、中、低剂量组,利巴韦林组,25μL 50LD50病毒液滴鼻建立流感病毒鼠肺适应株感染的小鼠肺炎模型(除正常组外),感染后1 h,正常组和模型组予以双蒸水灌胃;中药高、中、低剂量组分别给予中药46、23、11.5 g/(kg.d)灌胃;利巴韦林组腹腔注射利巴韦林注射液0.1 g/(kg.d);各组均给药2次/d,连续给药7 d。每日观察小鼠的生存率、平均存活天数,体重、体温的变化至感染后14 d。BALB/c小鼠72只随机分为4组,正常组、模型组、中药中剂量组和利巴韦林组,在感染后的24、6、d分别取材,动态观察小鼠肺匀浆中病毒血凝滴度、肺组织切片在光镜和电镜下的病理改变。结果临床等效剂量(中剂量)的犀角地黄汤合银翘散可明显降低感染小鼠的死亡率,延长生存时间,增加体重和升高体温。感染组肺病毒滴度在第2天最高,随后显著下降,而肺组织病理改变在第6天达高峰,二者不同步。犀角地黄汤合银翘散在第2天可降低肺匀浆中的病毒滴度,第4天、第6天与模型组比无差异;在第6天可明显减轻感染小鼠肺组织炎症病变。结论犀角地黄汤合银翘散对小鼠流感病毒性肺炎有明显的治疗作用,直接的抗病毒增殖非其主要作用,可能主要通过抑制机体的炎症级联反应发挥作用。
- 郝钰李季倩吴莹吴珺路广林黄启福
- 关键词：病毒性肺炎病毒滴度小鼠
