国家杰出青年科学基金(G39925019)
- 作品数：4 被引量：15H指数：2
- 相关作者：温新宇沈倍奋黎燕戚中田舒翠玲更多>>
- 相关机构：军事医学科学院第二军医大学中国人民解放军总医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 抗人CD38分子单克隆抗体生物学功能研究
- 2007年
- 目的研究抗人CD38单克隆抗体(1C6)的生物学功能。观察1C6对多种肿瘤细胞系生长增殖的影响,利用不同刺激原诱导的淋巴细胞增殖反应,观察抗人CD38单克隆抗体(1C6)在人外周血淋巴细胞增殖反应中的作用。方法以MTT法检测单克隆抗体抑制细胞增殖以及介导补体杀伤靶细胞的功能。利用抗人CD3单克隆抗体刺激人外周血淋巴细胞增殖、同种异型抗原诱导混合淋巴细胞反应,在加入或未加入抗人CD38单克隆抗体(1C6)的情况下,观察细胞形态并检测3H-TdR掺入量。结果加入不同浓度的1C6的实验组与对照组相比,多种细胞系的生长受到不同程度的抑制。不同刺激原诱导的淋巴细胞增殖反应中,加入1C6的实验组细胞克隆明显减少,3H-TdR掺入量明显下降,细胞增殖受抑。结论1C6可抑制多种肿瘤细胞的生长,可介导补体杀伤多种靶细胞。1C6对抗CD3刺激的外周血淋巴细胞增殖以及混合淋巴细胞培养均具有明显的抑制效应。
- 温新宇于鸣田亚平
- 关键词：混合淋巴细胞反应
- 抗人CD38单克隆抗体的制备、鉴定及其功能的初步研究被引量：13
- 2003年
- 目的 研制抗人CD38抗原分子的单克隆抗体 ,进一步研究其生物学功能。方法 采用高表达CD38抗原的Daudi细胞免疫Balb c小鼠 ;取其脾细胞与SP2 0细胞融合 ;用间接免疫荧光法进行杂交瘤筛选 ;流式细胞术、免疫沉淀法与CD38分子原核表达产物的Western blot分析鉴定单克隆抗体的特异性。以MTT(四甲基偶氮唑盐 )法检测单克隆抗体抑制细胞增殖以及介导补体杀伤靶细胞的功能。结果 获得了一株抗人CD38分子的单克隆抗体 1C6 ,流式细胞术显示它具有CD38抗原特异的细胞反应谱 ,其识别的抗原分子质量为 4 5 0 0 0u。与CD38分子原核表达产物的Western blot分析表明 ,其可特异识别CD38分子胞外结构域。MTT法显示其可介导补体杀伤靶细胞。结论 成功制备了抗人CD38分子的单克隆抗体 ,并进行了初步的功能研究。
- 温新宇舒翠玲于鸣黎燕戚中田沈倍奋
- 关键词：CD38
- 人CD38抗原胞外段基因克隆及表达被引量：2
- 2002年
- 目的 克隆并表达人CD38抗原分子的胞外段基因。方法 采用RT PCR法 ,从高表达CD38抗原的Daudi细胞系中 ,扩增CD38全长cDNA ,并将其插入 pGEM T载体中。重新设计引物 ,从重组 pGEMT载体中 ,扩增CD38抗原分子的胞外段基因 ,再亚克隆到表达载体 pET2 8a(+) ,转化大肠杆菌BL2 1,用IPTG诱导表达。结果 经酶切鉴定及序列分析表明 ,克隆的CD38胞外段基因的序列与文献[1,2 ] 的报道完全一致。将该片段亚克隆到表达载体 pET2 8a(+) ,经IPTG诱导在大肠杆菌BL2 1中获得表达。结论 获得了人CD38抗原分子胞外段基因及其原核表达产物 ,对进一步制备单克隆抗体。
- 温新宇舒翠玲黎燕戚中田沈倍奋
- 关键词：抗原胞外段基因克隆RT-PCR
- 人CD38分子基因的克隆及其在真核细胞中的表达
- 2002年
- 目的 :克隆并表达人 CD38抗原分子的全长 c DNA。方法 :采用 RT- PCR法 ,从高表达 CD38抗原的 Daudi细胞系中克隆出 CD38全长 c DNA并将其插入 p GEM- T载体中 ,重新设计引物 ,引入酶切位点 ,二次 PCR;从重组 p GEMT载体上扩增CD38抗原分子的 c DNA编码序列 ,再亚克隆到真核表达载体 pc DNA3.1(+) ,用脂质体法转染 COS7细胞。用免疫荧光及 A-PAAP方法检测 CD38抗原的表达。 结果 :克隆的 CD38抗原的全长 c DNA,经酶切鉴定及序列分析表明 ,其序列与文献报道完全一致。免疫荧光及 APAAP方法检测表明 ,CD38抗原分子在 COS7细胞中获得表达。 结论 :成功构建了 CD38真核表达载体 ,并在 COS7细胞中获得表达 ,对研究 CD38分子的功能具有重要的意义。
- 温新宇舒翠玲黎燕戚中田沈倍奋
- 关键词：CD38分子克隆基因表达真核细胞
