国家自然科学基金(30230260)
- 作品数：94 被引量：375H指数：12
- 相关作者：王哲刘国文孙玉成牛淑玲张才更多>>
- 相关机构：吉林大学吉林农业大学四川农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程交通运输工程更多>>
- 应用半定量RT-PCR方法测定围产期奶牛肝PEPCK-C mRNA的丰度被引量：14
- 2006年
- 建立了奶牛肝PEPCK-CmRNA丰度的半定量RT-PCR检测方法，其优化的PCR反应条件（25pL）为：57C退火、2．4mmol／L Mg^2＋、26～28个循环数、cDNA不小于2．6mg／L、2：1的PEPCK-C／β-actin引物比。同时，应用该方法检测了围产期奶牛肝中PEPCK-CmRNA丰度，结果显示：产前低血糖奶牛肝PEPCK-C mRNA丰度显著低于对照组，但是产后却高于对照组。围产期奶牛血糖水平与肝PEPCK-C mRNA丰度之间的相关系数，对照组为0．68（P=0．14），低血糖组为0．82（P=0．047）。因此，围产期奶牛肝PEPCK-CmRNA丰度对奶牛血糖浓度具有调节作用，低血糖奶牛表现得更为明显。
- 夏成王哲徐闯张才
- 关键词：围产期奶牛能量负平衡半定量RT-PCRMRNA丰度
- 奶牛脂肪肝的病理学研究进展被引量：5
- 2007年
- 脂肪肝是许多奶牛泌乳早期主要的代谢性疾病,并常引起奶牛疾病的发生和繁殖力下降。严重的病例,泌乳量和能量摄入减少。因此,病理学研究可为脂肪肝的预防和治疗提供有利的理论基础,每年可节省数百万美元的损失。脂肪肝是由于肝脏摄取脂类的量超过肝脏氧化和吸收的量,脂肪动员高浓度的血浆非酯化脂肪酸引起的。过量的脂肪以甘油三酯的形式储存于肝脏,造成细胞完整性和功能降低,从而造成肝脏功能改变。文章从脂肪肝的基础病理、临床病理、免疫病理以及生殖病理方面,论述了脂肪肝的病理学研究进展。
- 苏蔚徐闯王立民刘国文王哲姜玉富
- 关键词：脂肪肝病理学奶牛
- 荧光定量PCR检测新生犊牛胰高血糖素受体mRNA的组织分布被引量：1
- 2008年
- 采用荧光定量PCR的方法,检测新生犊牛中枢和外周组织中胰高血糖受体(glucagon receptor,GLNR)mRNA的基因表达。研究结果表明,GLNR基因在大脑皮质、小脑皮质、下丘脑、垂体、主动脉、颈静脉、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾皮质、胰脏、半腱肌、皮下脂肪、瘤胃、瓣胃、网胃、皱胃、十二指肠、结肠、回肠、盲肠、直肠都有表达。垂体、下丘脑、肝脏、主动脉、皮下脂肪、小脑皮质、大脑皮质、肾皮质、肺脏中GLNR表达量高于其他组织。GLNR基因在组织中广泛分布说明了其功能的重要性。
- 张永宏高妍李玉华孙玉成刘国文张嘉保王哲
- 关键词：荧光定量PCR新生犊牛
- 瘦蛋白对犊牛肝细胞PEPCK mRNA表达及其活性的影响
- 2008年
- 取单层培养36h生长良好的犊牛肝细胞,采用单因素重复试验,分别添加0、2.5、5、10、50、100ng/mL的牛重组牛瘦蛋白(leptin),每个处理3个重复(每重复2孔),再培养12h后分别提取RNA和制备细胞上清液。应用荧光定量PCR方法检测外源NPY对肝细胞糖异生关键酶磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(Phosphoenolpyruvate carboxykinase,PEPCK)基因表达的影响,同时用比色法检测其对肝细胞PEPCK活性的影响。结果表明:一定浓度的leptin显著抑制了肝细胞PEPCK mRNA表达,降低了PEPCK活性。
- 陈承祯陈健谢光洪刘国文徐闯张嘉保王哲
- 关键词：瘦蛋白肝细胞磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶LEPTINPEPCK
- 代谢产物对犊牛肝细胞MTPmRNA丰度的影响
- 2008年
- 通过向体外-培养的新生犊牛肝细胞添加非酯化脂肪酸(NEFA)、β-羟丁酸(BHBA)和葡萄糖,采用内对照RT-PCR方法检测代谢产物对体外培养新生犊牛肝细胞MTPmRNA丰度的影响。结果显示,随着培养液中NEFA和葡萄糖浓度升高,MTPmRNA的丰度呈现剂量依赖性上调(P<0.01);随着BHBA浓度的增加,MTPmRNA的丰度先升高后降低(P<0.01或P<0.05)。表明,NEFA和葡萄糖对肝细胞MTPmRNA表达具有促进作用,呈剂量依赖性;BHBA对肝细胞MT-PmRNA表达具有低剂量促进高剂量抑制的双重作用。
- 陈仕均唐海蓉王哲孙玉成邓俊良
- 关键词：代谢产物肝细胞RT-PCR
- 干乳期高能饲喂围产期健康奶牛肝载脂蛋白B100 mRNA表达的研究被引量：4
- 2005年
- 为阐明载脂蛋白B100在围产期奶牛脂肪肝及相关代谢性疾病发生过程中的作用,以-βactin作为内对照,用RT-PCR方法测定了干乳期高能饲喂围产期健康奶牛不同时期肝组织的apoB100 mRNA表达。结果表明:高能饲喂的围产期健康奶牛肝组织的apoB100 mRNA表达从产前至产后呈先升高后降低的趋势,其中产后14 d比产后1 d降低了61.45%(P<0.01),且产前apoB100 mRNA表达显著高于产后(产后1 d除外,P<0.01)。干乳期高能饲喂对围产期奶牛肝脏载脂蛋白B100 mRNA表达有显著影响。
- 孙玉成王哲张嘉保
- 关键词：奶牛载脂蛋白B100
- 提高奶牛干物质采食量的技术措施被引量：2
- 2007年
- 围产期奶牛,特别是高产奶牛普遍处于能量负平衡状态,容易导致生产性能降低和酮病、脂肪肝等代谢病的发生。通过育种、改善日粮和使用添加剂等技术措施,可提高奶牛的干物质采食量(dry matter intake,DMI),在一定程度上提高奶牛的生产性能和改善奶牛的健康状况。作者对奶牛采食量的意义及其影响因素进行了叙述,并提出了一些可以提高奶牛采食量的技术措施。
- 陈承祯王哲
- 关键词：奶牛
- 瘦蛋白对犊牛肝细胞PC mRNA表达及其活性的影响
- 2008年
- 取单层培养72 h生长良好的犊牛肝细胞,采用单因素重复试验,分别添加0,2.5,5.0,10.0,50.0,100.0 ng/mL的牛重组牛瘦蛋白(Leptin),每个处理3个重复(每重复2孔)。再培养12 h后分别提取RNA并制备细胞上清液。应用荧光定量PCR方法检测外源leptin对肝细胞糖异生关键酶丙酮酸羧化酶(Pyruvate car-boxylase,PC)基因表达的影响,同时用比色法检测其对肝细胞PC活性的影响。结果表明:一定浓度的Leptin显著抑制了肝细胞PC mRNA表达,降低了PC活性。
- 陈承祯刘国文谢光洪杨文艳张嘉保王哲
- 关键词：瘦蛋白丙酮酸羧化酶肝细胞
- 不同分化时期牛脂肪细胞抵抗素mRNA丰度变化被引量：1
- 2008年
- 选取犊牛大网膜脂肪组织,进行牛前脂肪细胞的单层贴壁培养,在细胞接种4、6、8、10、12、14、16d分别提取细胞总RNA,进行RT-PCR反应,以β-actin为定量内参照,对抵抗素mRNA的丰度进行定量分析,观察在犊牛前脂肪细胞向脂肪细胞分化过程中抵抗素mRNA的表达规律。结果表明:在犊牛前脂肪细胞分化4～12d,抵抗素mRNA丰度逐渐降低,而分化成熟后14～16d有所回升。
- 宋文华孙国权张才刘国文车英玉夏成王哲王贵
- 关键词：脂肪细胞抵抗素MRNA丰度
- 围产期奶牛能量代谢障碍性疾病的研究进展被引量：73
- 2004年
- 刘国文王哲
- 关键词：围产期奶牛发病特点瘤胃微生物丙酸
