国家自然科学基金(30772885)
- 作品数：10 被引量：100H指数：7
- 相关作者：张荣华杨丽朱晓峰王攀攀孙升云更多>>
- 相关机构：暨南大学暨南大学附属第一医院天津中医药大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省高等学校中药有效性与安全性重点实验室开放基金广东省自然科学基金更多>>
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- 骨碎补总黄酮对高糖作用下成骨细胞分化及ERK_(1/2)和p38蛋白激酶表达的影响被引量：12
- 2012年
- 目的:研究骨碎补总黄酮(TFDF)对高浓度葡萄糖作用下成骨细胞(OB)分化活性及对细胞外信号调节蛋白激酶(ERK1/2)和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号蛋白的影响,为TFDF能否用来防治糖尿病性骨质疏松提供细胞分子学依据。方法:二次酶消化法分离培养新生SD大鼠颅骨OB及活性观察;MTT法检测TFDF对OB的细胞毒性,确定实验药物在培养基中的添加剂量;pNPP、ELISA、茜素红染色法分别检测不同浓度葡萄糖对OB碱性磷酸酶活性(ALP)、Ⅰ型胶原(ColⅠ)、骨钙素(BGP)以及矿化能力的影响,并观察TFDF对高糖作用下OB分化活性的干预作用;Western-blot检测TFDF对高糖作用下OB ERK1/2和p38蛋白磷酸化的情况。结果:原代分离培养新生SD大鼠OB,具有典型的OB分化特性;根据TFDF对OB的毒性试验,选择TFDF的浓度25、50、100 mg/L为实验梯度浓度;葡萄糖(25、50 mmol/L)可以降低OB表达ALP、ColⅠ、BGP,降低其矿化能力;TFDF能剂量依赖性的提高高糖(25 mmol/L)作用下OB表达ALP、ColⅠ、BGP和矿化能力;TFDF(50 mg/L)能提高高糖(25 mmol/L)作用下p38和ERK1/2的蛋白磷酸化。结论:高糖可以降低OB分化和矿化能力,TFDF可提高高糖作用下OB的分化和矿化能力,其作用机理可能和提高p38和ERK1/2信号蛋白的磷酸化有关。
- 朱晓峰王廷春张荣华孙升云王攀攀杨丽韩莉金玲
- 关键词：骨碎补总黄酮成骨细胞高糖分化
- 骨碎补总黄酮对晚期糖基化终末产物作用下成骨细胞分化及p38和ERK1/2蛋白激酶表达的影响被引量：10
- 2012年
- 目的研究骨碎补总黄酮(TFDF)对晚期糖基化终末产物(AGEs)作用下成骨细胞分化活性及对细胞外信号调节蛋白激酶(ERK1/2)和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号蛋白的影响,探讨骨碎补总黄酮防治骨质疏松的作用机理。方法二次酶消化法分离培养新生SD大鼠颅骨成骨细胞以及活性观察;pNPP、ELISA、茜素红染色法分别检测不同质量浓度晚期糖基化终末产物对成骨细胞碱性磷酸酶活性(ALP)、Ⅰ型胶原(Col I)、骨钙素(BGP)以及矿化能力的影响,并观察骨碎补总黄酮对晚期糖基化终末产物作用下成骨细胞分化的干预;Western-blot检测骨碎补总黄酮对晚期糖基化终末产物作用下,成骨细胞p38和ERK1/2蛋白磷酸化的影响。结果晚期糖基化终末产物(2004、00、800 mg/L)可以降低成骨细胞表达ALP、Col I、BGP,降低其矿化能力。骨碎补总黄酮可以剂量依赖性的提高晚期糖基化终末产物(400 mg/L)作用下成骨细胞表达ALP、Col I、BGP和矿化能力。骨碎补总黄酮(50 mg/L)可以提高晚期糖基化终末产物(400 mg/L)作用下p38和ERK1/2的蛋白磷酸化。结论骨碎补总黄酮可以提高晚期糖基化终末产物作用下成骨细胞分化和矿化能力,其机制可能和提高p38和ERK1/2信号蛋白的磷酸化有关。
- 朱晓峰王廷春张荣华孙升云王攀攀杨丽
- 关键词：骨碎补总黄酮晚期糖基化终末产物成骨细胞分化
- 去卵巢对SD大鼠MSCs多向分化能力的影响被引量：2
- 2012年
- 通过比较有、无诱导条件下正常与骨质疏松症(OP)大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)骨向、脂向及软骨向的分化情况,观察去卵巢对SD大鼠MSCs多向分化能力的影响。实验分为四组:正常组、正常诱导组、OP组、OP诱导组;分别在有或无成骨、成脂、成软骨诱导条件下,评价各组的分化情况。检测发现,无诱导条件下,正常大鼠MSCs骨向及软骨向分化的能力强于OP大鼠,而OP大鼠MSCs的脂向分化能力强于正常大鼠;诱导条件下,正常大鼠MSCs对骨向及软骨向诱导剂的反应能力强于OP大鼠,而OP大鼠MSCs对成脂诱导剂的反应能力强于正常大鼠。这些结果表明,去卵巢后大鼠MSCs骨向分化能力及对成骨诱导剂的反应力下降,脂向分化能力及对成脂诱导剂的反应力增强,对软骨诱导剂的反应力下降。
- 杨丽王攀攀张荣华
- 关键词：骨髓间充质干细胞骨质疏松多向分化
- 不同浓度梓醇对SD大鼠骨髓间充质干细胞增殖及骨向分化的影响被引量：14
- 2012年
- 目的观察梓醇对SD大鼠骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖及骨向分化的影响。方法采用机械分离及差速贴壁法分离培养SD大鼠骨髓间充质干细胞;MTT法检测不同浓度梓醇在不同时间点(1,3,5,7,9,11 d)对大鼠BMSCs增殖情况的影响;氨基安替吡啉测酚法检测不同浓度梓醇在第3天,6天,9天,12天,15天,18天,21天对细胞上清中ALP活性的影响,茜素红染色法检测不同浓度梓醇对BMSCs矿化情况的影响。结果梓醇促BMSCs增殖的最佳浓度为1.0 mg/L;促BMSCs骨向分化的最佳浓度为2.0 mg/L。结论梓醇具有促BMSCs增殖及骨向分化的作用。
- 傅淑平张荣华
- 关键词：梓醇骨髓间充质干细胞增殖骨向分化
- 岗梅根水煎液对束缚应激条件下非酒精性脂肪肝大鼠氧化应激的影响被引量：8
- 2012年
- 目的观察岗梅根水煎液对束缚应激条件下非酒精性脂肪肝大鼠氧化应激的影响。方法将48只Wistar雄性大鼠随机分为4组:正常对照组、模型对照组、辛伐他汀组、岗梅根水煎液组,建立高脂饮食性脂肪肝模型,并给予束缚应激负荷。检测各组大鼠血脂、肝脏指数、T-AOC、GST、MDA等指标的变化。结果与正常对照组比较,模型对照组大鼠血清TC、TG、LDL-C含量均显著升高(P<0.01),HDL-C含量降低(P<0.01),肝指数升高(P<0.05)。与模型对照组比较,辛伐他汀组、岗梅根水煎液组TC、TG、LDL-C含量均有不同程度的降低(P<0.01或P<0.05),HDL-C、T-AOC、GST均有不同程度的升高(P<0.01或P<0.05)。与辛伐他汀组比较,岗梅根水煎液组TC含量升高(P<0.05),MDA含量降低(P<0.05)。结论岗梅根水煎液对束缚应激条件下非酒精性脂肪肝大鼠氧化应激有一定干预作用。
- 胡向阳李安杨璇马义
- 关键词：岗梅根束缚应激非酒精性脂肪肝氧化应激
- 补肾活血复方含药血清对MSCs增殖和骨向分化影响的时效及量效研究被引量：10
- 2012年
- 目的:筛选补肾活血复方含药血清促SD大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)增殖和骨向分化最佳取血时间和浓度。方法:10月龄SD雌性大鼠30只,随机分为补肾活血复方低(11.6 g/kg)、中(34.8 g/kg)、高(104.4 g/kg)剂量组,每组10只。灌胃1次/d,连续12 d。分别于末次灌胃后的0.5、1.0、1.5、2.0、3.0 h取血,分离血清,然后将上述复方含药血清分别用不同添加浓度干预3月龄SD大鼠MSCs,以MTT法检测细胞增殖情况,以碱性磷酸酶(ALP)确定各组MSCs骨向分化情况。结果:补肾活血复方含药血清促MSCs增殖以复方低剂量灌胃12 d,末次灌胃1 h后取血,25%的添加浓度为佳;促MSCs骨向分化以复方高剂量灌胃12 d,末次灌胃1 h后取血,25%～30%的添加浓度为佳。结论:补肾活血复方含药血清能促进SD大鼠MSCs增殖及骨向分化。
- 杨丽朱晓峰张荣华
- 关键词：补肾活血复方骨向分化时效量效
- 去卵巢骨质疏松模型大鼠骨组织CGRP及其1型受体的表达被引量：7
- 2011年
- 目的:观察去卵巢骨质疏松(OP)模型大鼠骨组织降钙素基因相关肽(CGRP)及其1型受体(CGRPR1)的表达。方法:将30只3月龄Sprague-Daw ley(SD)雌性大鼠随机分成假手术组(15只)和模型组(15只)。采用双侧卵巢切除术复制OP大鼠模型。去卵巢12周后,应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)观察各组大鼠股骨CGRP和CGRPR1 mRNA的表达;应用免疫组织化学技术观察各组大鼠股骨远端干骺端CGRP和CGRPR1蛋白的表达。结果:模型组大鼠股骨CGRP和CGRPR1 mRNA的表达较假手术组显著降低(P<0.01);模型组大鼠股骨远端干骺端CGRP和CGRPR1蛋白的表达较假手术组显著降低(P<0.01)。结论:骨组织CGRP及CGRPR1表达的减少可能是OP形成的机制之一。
- 吕辰鹏杨丽孙影方霁奉水旺粱恒李淑琴张荣华
- 关键词：降钙素基因相关肽骨质疏松卵巢切除术
- 淫羊藿苷通过雌激素受体和p38MAPK信号诱导MC3T3-E1Subclone14细胞的分化被引量：20
- 2012年
- 目的观察淫羊藿苷(ICA)对MC3T3-E1Subclone14前体成骨细胞株活力、分化的影响,以及雌激素受体(ER)信号、p38MAPK信号在分化过程中的作用。方法 WST-8方法检测MC3T3-E1Subclone14细胞活力;pNPP法检测细胞碱性磷酸酶活性(ALP);ELISA检测I型胶原(ColI)和骨钙素(BGP);Western印迹法检测p38MAPK的蛋白磷酸化;并分别用ICI182780阻断ER受体或SB203580阻断p38MAPK信号后检测ICA对细胞ALP、Col I、BGP的影响;Western印迹法检测ICI182780阻断ER受体信号后,ICA对p38MAPK蛋白磷酸化的影响。结果 ICA(10-7、10-6、10-5mol/L)对细胞活力与对照组比较,在统计学上无显著差异(P>0.05);ICA可以浓度依赖性的提高细胞的ALP、Col I和BGP和矿化结节数量(P<0.01,P<0.05);ICI182780阻断ER受体信号后,10-5mol/L浓度的ICA促细胞分化的特性明显下降(P<0.01);ICA可以浓度组依赖性的提高细胞p38MAPK的蛋白磷酸的水平(P<0.01);SB203580阻断p38MAPK信号后,10-5mol/L浓度的ICA促分化的特性下降(P<0.01);ICI182780阻断ER受体信号后,10-5mol/L浓度ICA促p38MAPK磷酸化明显减弱(P<0.01)。结论 ICA可以促进MC3T3-E1Subclone14细胞分化,ER受体信号、p38MAPK信号在促分化过程中起着重要作用,ER受体信号通路在p38MAPK信号通路的上游。
- 朱晓峰张荣华孙升云王廷春王攀攀杨丽韩莉
- 关键词：淫羊藿苷成骨细胞雌激素受体P38MAPK分化
- 骨碎补总黄酮对去卵巢骨质疏松模型大鼠血清中瘦素、白细胞介素6、前列腺素E_2及骨组织中β_2-肾上腺素受体的影响被引量：15
- 2011年
- 目的:观察骨碎补总黄酮对去卵巢骨质疏松(OP)模型大鼠血清中瘦素(LEP)、白细胞介素6(IL-6)、前列腺素E_2(PGE_2)及骨组织中β_2-肾上腺素受体(ADRB2)的影响。方法:采用双侧卵巢切除法复制OP大鼠模型;造模12周后以双能X线法检测骨矿物质密度(BMD),确定OP模型是否复制成功;用药12周后应用酶联免疫法检测血清中LEP、IL-6和PGE_2的浓度,免疫组化法检测大鼠骨组织中ADRB2的表达。结果:造模12周后,模型组与假手术组相比,多个部位BMD显著下降(P<0.01),提示OP模型复制成功。用药12周后模型组LEP、IL-6和PGE_2较假手术组均有显著增高(P<0.05);骨碎补总黄酮组LEP和IL-6较模型组有明显降低(P<0.01),PGE_2无显著差异(P>0.05);模型组ADRB2表达与假手术组和给药组间比较有显著差异(P<0.05),假手术组和给药组间比较无显著差异(P>0.05)。结论:去卵巢OP大鼠血清LEP、IL-6、PGE_2和骨组织ADRB2表达升高;而骨碎补总黄酮能降低去卵巢OP大鼠血清中LEP、IL-6水平和骨组织ADRB2表达,抑制骨吸收,这可能是骨碎补总黄酮防治OP的作用机制之一。
- 孙影杨丽吕辰鹏方霁左娜沈家珍张荣华
- 关键词：骨碎补总黄酮瘦素白细胞介素6前列腺素E2
- 补肾活血复方含药血清对大鼠成骨细胞磷酸化GSK-3β、p38MAPK及ERK1/2蛋白的影响被引量：5
- 2012年
- 目的:观察补肾活血复方含药血清对大鼠成骨细胞磷酸化糖原合成激酶3β(GSK-3β)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)及细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)蛋白的作用。方法:3月龄SD雌性大鼠灌胃制备空白血清和含药血清,并分离培养1日龄新生鼠颅骨成骨细胞。实验分为空白血清组和含药血清组,分别采用MTT、ELISA、Western-blot等方法检测两组成骨细胞的增殖、ALP和BGP的分泌及磷酸化GSK-3β、p38 MAPK和ERK1/2蛋白的变化。结果:与空白血清组相比,含药血清组可明显促进成骨细胞的增殖、ALP和BGP的分泌,并促进胞内磷酸化p38 MAPK和ERK1/2蛋白的表达,对磷酸化GSK-3β蛋白的表达未见明显影响。结论:补肾活血复方含药血清可促进大鼠成骨细胞的增殖和分化,提高p38 MAPK和ERK1/2蛋白磷酸化水平。
- 王攀攀朱晓峰杨丽张荣华
- 关键词：补肾活血复方成骨细胞GSK-3ΒP38MAPKERK1/2
