国家自然科学基金(81070124)
- 作品数：10 被引量：16H指数：3
- 相关作者：李朝红刘树迎黄锦桃陈大堤王晶晶更多>>
- 相关机构：中山大学湘南学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Hoechst33342与DAPI标记细胞核对胞内活性氧检测效果的比较被引量：2
- 2014年
- 目的探讨Hoechst 33342与DAPI两种荧光染料标记细胞核后对细胞内活性氧水平的影响。方法静息培养的血管平滑肌细胞加入晚期糖基化终末产物作用10 min,加入标记活性氧的荧光探针H2DCFDA,再分别加入Hoechst 33342和DAPI不同荧光染料进行核标记。荧光显微镜下观察细胞核被标记的数目与细胞内活性氧的荧光水平。结果 Hoechst 33342染料标记5 min后即可见细胞核被标记上,随着时间的延长被标记的核数目并不发生改变;而与之明显不同的是,DAPI染料标记5 min时,只有几个细胞核被标记上,但随着时间的延长被标记的核数目越来越多。Hoechst 33342标记后细胞内活性氧的荧光强度并不随时间的延长发生变化,而DAPI标记后细胞内活性氧绿色荧光的细胞数就越少,DAPI标记的细胞核数与显示活性氧绿色荧光的细胞数呈反比。这些结果提示,DAPI染料在标记细胞核时破坏了活性氧在细胞内的储存,干扰了实验结果。结论检测细胞内活性氧时,应使用Hoechst 33342核标记染料而不能用DAPI。
- 周玉环刘树迎平苏宁王晶晶陈大堤黄锦桃李朝红
- 关键词：活性氧血管平滑肌细胞DAPI
- 机械牵张力上调小鼠血管平滑肌细胞蛋白二硫键异构酶和NADPH氧化酶1表达的观察
- 2013年
- 目的观察机械牵张力诱导小鼠血管平滑肌细胞（VSMC）蛋白二硫键异构酶（PDI）表达，并初步探讨其与NADPH氧化酶1（NOXl）表达的关系。方法体外静息培养状态的VSMC给予不同时间和强度的机械牵张力刺激，用免疫印迹法检测细胞内PDI和NOXl的表达水平。结果机械牵张力可诱导VSMC内PDI表达增加，呈时间和强度依赖性；NOXl的表达水平也呈同样方式升高。结论机械牵张力刺激通过同时上调PDI和NOXl表达，参与氧化应激的过程。本研究为临床上与生物机械力增加相关的疾病（如高血压、静脉移植性粥样硬化）致病机制的研究提供了有用资料。
- 平苏宁刘树迎李字煌王晶晶黄锦桃陈大堤汪泓李朝红
- 关键词：血管平滑肌细胞机械牵张力
- 小檗碱抑制机械牵张力诱导的小鼠血管平滑肌细胞PKCδ磷酸化及增殖/迁移被引量：2
- 2022年
- 目的观察机械牵张力(SS)是否通过激活PKCδ诱导小鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和迁移,并进一步探究小檗碱(BBR)对其的影响及作用机制。方法体外常规培养小鼠VSMC分为6组:阴性对照组(NC)、小檗碱组(BBR)、PKCδ抑制剂Sotrastaurin组(Sotras)、SS组、SS+BBR组和SS+Sotras组。静息培养的VSMC分别用BBR或Sotrastaurin或ddH_(2)O预处理1 h,继而机械牵张力(10%牵张强度)牵拉不同时间或不牵拉作为对照。收集各组VSMC,Western blot检测PKCδ磷酸化水平;免疫荧光法检测VSMC增殖;细胞划痕实验检测VSMC迁移。结果免疫荧光和细胞划痕实验结果显示,与阴性对照组相比,机械牵张力刺激显著提高VSMC中Ki67阳性水平约469%(P<0.05,n=3),划痕宽度缩小约54.9%(P<0.05,n=3),而BBR和Sotrastaurin能明显抑制机械牵张力引起的上述变化,与SS组相比,Ki67阳性水平分别下降约66.9%和80.2%(P<0.05,n=3),划痕宽度增加约79.4%和120.1%(P<0.05,n=3);Western blot结果显示,与阴性对照组相比,机械牵张力刺激可诱导PKCδ磷酸化水平呈时间依赖性升高,以30 min最显著,提升约97.5%(P<0.05,n=3);而BBR可呈浓度依赖性抑制机械牵张力刺激诱导的PKCδ磷酸化水平升高,以200μmol/L效果最显著,降低约37.6%(P<0.05,n=3)。结论BBR可通过抑制PKCδ磷酸化进而阻断机械牵张力诱导的VSMC增殖和迁移。
- 林宁刘树迎蔡晓东芮睿杨浩澜李朝红
- 关键词：小檗碱机械牵张力血管平滑肌细胞PKCΔ细胞迁移
- Hoechst33342与DAPI标记细胞核对细胞内活性氧检测的影响比较
- 2013年
- 目的探讨Hoechst33342与DAPI两种荧光染料标记细胞核后对细胞内活性氧水平的影响。方法静息培养的血管平滑肌细胞加入晚期糖基化终末产物作用10min，加入标记活性氧的荧光探针H2DCFDA，再分别加入Hoechst33342和DAPI两种荧光染料进行核标记。荧光显微镜下观察细胞核被标记的数目与其细胞内活性氧的荧光水平，比较两种染料标记细胞核后细胞内活性氧的荧光强度。结果Hoechst33342染料标记5min后即可见细胞核被标记上，并且随着时间延长被标记的核数目并不发生改变；而与之明显不同的是，DAPI染料标记5min时，只有几个细胞核被标记上，但随着时间的延长，被标记的核数目越来越多。Hoechst33342标记后细胞内活性氧的荧光强度并不随时间延长发生变化，而DAPI标记随时间延长，被标记的细胞核数目越多，显示活性氧绿色荧光的细胞数就越少，DAPI标记的细胞核数与显示活性氧绿色荧光的细胞数呈反比。这些结果提示，DAPI染料在标记细胞核时破坏了活性氧在细胞内的储存，干扰了实验结果。结论检测细胞内活性氧时，应使用Hoechst33342核标记染料而不能用DAPI核标记染料。[作者简介]周玉环，硕士研究生，研究方向为血管重构的分子机制与防治。
- 周玉环刘树迎平苏宁王晶晶陈大堤黄锦桃李朝红
- 关键词：活性氧晚期糖基化终末产物
- 小脑组织压片快速制作在组织学实验教学中的应用被引量：2
- 2017年
- 目的在组织学的实验教学中开展小脑组织压片快速制作,增加学生的实践机会,提高他们的动手能力。方法学生先将小脑薄片用甲苯胺蓝分别染色4min和8min,并用拇指用力按压盖玻片,使小脑组织变薄,然后镜下观察。结果发现染色后4min小脑组织呈现淡蓝色,浦肯野细胞轮廓较清楚。在染色后8min,浦肯野细胞被染成深蓝色,轮廓清楚,达到了最佳效果。结论学生通过应用小脑组织压片快速制作技术,可增强动手能力,并很好地了解小脑组织中浦肯野细胞的形态和分布,把教学、科研连接在一起,达到提高实验教学质量的目的。
- 刘科峰刘树迎李朝红
- 关键词：甲苯胺蓝染色
- 辛伐他汀抑制机械牵张力介导的巨噬细胞活性氧族元素的表达被引量：3
- 2016年
- 目的探讨机械牵张力刺激能否介导小鼠巨噬细胞活性氧族元素(ROS)的产生,并进一步探讨辛伐他汀对此作用的影响及其作用机制。方法体外常规培养小鼠巨噬细胞RAW264.7,施加机械力刺激,或用辛伐他汀预处理细胞60 min后再施加此刺激,用荧光探针H2DCFDA检测巨噬细胞ROS的表达水平,以细胞免疫荧光定量阳性率和SPSS统计软件对其表达水平进行分析。Western blot检测NADPH氧化酶1(NOX1)的表达。结果机械牵张力刺激介导的巨噬细胞ROS呈时间依赖性增多,以60 min最显著(P<0.05);辛伐他汀可抑制此刺激介导的巨噬细胞ROS表达增加,且抑制作用呈浓度依赖增强,以0.3μmol/L辛伐他汀的抑制作用最显著(P<0.05)。辛伐他汀可使机械牵张力介导的巨噬细胞NOX1表达显著减少。结论辛伐他汀可通过抑制NOX1的表达从而抑制由机械牵张力介导的小鼠巨噬细胞ROS的表达。
- 裴婷周玉环刘科峰李子卿刘树迎平苏宁王晶晶汪泓李朝红
- 关键词：辛伐他汀机械牵张力巨噬细胞
- 波动性高血糖致血管重构作用被引量：4
- 2013年
- 糖尿病致血管病变的机制尚不清楚。研究表明高血糖可直接影响内皮细胞、血管平滑肌细胞等凋亡、增殖及表型转化,加速血管重构,波动性高血糖作用更明显。近期发现ATP结合盒转运体G1在胆固醇逆转运及动脉硬化进程中有重要作用。文章就波动性高血糖致血管病变的研究成果及ATP结合盒转运体G1的可能作用做一综述。
- 龙颖琳刘仲奇刘灿张宗进李朝红
- 关键词：波动性高血糖血管平滑肌细胞动脉粥样硬化
- α1肾上腺素能受体介导去甲肾上腺素和高血压机械力联合信号促进血管重构的机制
- 2013年
- 目的交感神经系统活性亢进引起的去甲肾上腺素分泌增多与血压升高产生的异常机械力联合作用可加速血管重构，但机制不明。本研究旨在探讨Ot。肾上腺素能受体（α1-AR）是否介导了机械牵张力和去甲肾上腺素（NE）的联合信号加速血管重构。方法将小鼠的下腔静脉移植到颈总动脉构建静脉搭桥模型，术后给予α1-AR抑制剂哌唑嗪（Prazosin），1mg／（kg·d），腹腔注射，或同等量的生理盐水处理2周或4周，观察静脉移植物新生内膜的厚度。
- 刘树迎李宇煌张征宇黄曦黄锦桃李朝红
- 关键词：Α1肾上腺素能受体机械牵张力细胞外信号调节激酶
- 高血压机械力信号转导与血管稳态和重构的研究进展
- 2013年
- 已经证实高血压机械力影响血管细胞的结构和功能，对血管稳态和重构的调控起到了至关紧要的作用。研究的着力点集中在以下几个方面：膜上跨膜蛋白激活机制、胞内信号关键节点作用探讨、机械力信号网点建立以及干预靶点的发现等；同时，关注高血压机械力与其它重大心血管疾病如糖尿病高血糖-AGE、神经精神性交感兴奋性儿茶酚胺、高血脂OX—LDL等相互交融对血管稳态和重构的影响。膜上跨膜蛋白被机械力非特异性激活的发现为抗高血压新药物开发和新临床治疗策略实施提供了重要方向；细胞内关键节点分子的发现为深入防治高血压的靶点研究提供了重要资料；机械力信号网络的建立对于动态监控高血压血管疾病的发生发展过程提供了重要分子平台；多种重大心血管疾病之间的相互交融和影响的研究更加有益于对复杂疾病的简易化把控。随着医药．生物一信息一科技等不同领域的研究技术方法的快速发展，高血压机械力信号转导的研究成果也越来越多，这些重要基础研究对临床治疗的指导作用亦越来越明显。
- 李朝红
- 关键词：高血压信号转导血管重构血管平滑肌
- 结缔组织铺片脂肪组织油红染色在组织学实验教学中的应用被引量：4
- 2014年
- 目的在传统结缔组织铺片基础上开展脂肪组织油红染色方法在医学本科生组织学实验教学中的应用。方法学生先进行疏松结缔组织铺片,并施行脂肪组织油红o-甲苯胺兰-伊红三重染色,然后镜下观察。结果油红o染色把结缔组织中的脂肪细胞内脂滴保存下来并染上红色。脂肪组织中央的细胞脂滴均匀红染,充满胞浆,周边的脂肪细胞胞浆中油红染色很少,细胞呈空泡状,显示出脂肪细胞亚群存在。甲苯胺兰染色使得疏松结缔组织中肥大细胞染成紫红色,胞核染色浅,细胞数量多、成群分布。伊红可使得结缔组织内除脂肪细胞、肥大细胞意外的其他细胞的胞浆和胶原纤维染成淡红色。结论传统的组织学平铺片技术基础上引入脂肪油红o-甲苯胺兰-伊红三重染色,可增强学生动手能力,并能很好地了解输送结缔组织中细胞的不同表型和分布,丰富组织学内容,把教学、科研连接一起,达到提高实验教学质量的目的。
- 王俊梅平苏宁汪泓黄锦桃陈大堤李朝红
- 关键词：组织学实验教学脂肪组织
