国家重点基础研究发展计划(2007CB914101)
- 作品数:13 被引量:142H指数:8
- 相关作者:张玉奎何锡文陈朗星李文友屈锋更多>>
- 相关机构:南开大学中国科学院北京理工大学更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域:理学生物学文化科学金属学及工艺更多>>
- 双水相萃取结合液相色谱法分离蛋白质被引量:17
- 2012年
- 建立了PEG/(NH4)2SO4双水相体系萃取富集,结合液相色谱分离分析多种蛋白质的方法。考察了无机盐种类和浓度、PEG分子量、pH值和温度等因素对双水相形成以及对细胞色素C、肌红蛋白、牛血清白蛋白、溶菌酶、胰蛋白酶分配行为的影响。结果表明,上述5种蛋白在室温、pH 3.5~9.0范围内,可在15%PEG-4000/10%(NH4)2SO4双水相体系中得到富集,且主要集中在下相。同样条件下,血清中的高丰度蛋白在上下相均有分配,下相分配量较大。通过双水相萃取分离蛋白质及对液相色谱一定时间段的色谱峰收集,可初步实现血清中高丰度蛋白质的分离去除。
- 赵新颖屈锋董敏陈凡罗爱芹张经华
- 关键词:双水相萃取蛋白质分离血清
- 双水相萃取-磁性阳离子交换剂联用分离蛋白质
- 2009年
- 双水相萃取(ATPS)分离蛋白质是基于蛋白质在上下两相间分配系数不同而达到彼此分离,它是一种简单、快速、低成本的蛋白质分离富集方法。表面修饰的磁性粒子与目标蛋白结合,在外加磁场作用下快速与原溶液分离,可实现目标蛋白分离和富集。双水相萃取与磁性分离均具有简单快速、条件温和的优点,在生物分离工程领域具有重要的应用价值。本文将双水相体系与热溶剂法制备的表面羧基功能化的磁性阳离子交换剂联用,用于蛋白质的逐级分离。
- 盖青青张涛屈锋张玉奎
- 关键词:双水相萃取磁性粒子蛋白质生物分离工程表面修饰双水相体系
- 蛋白质溶胶-凝胶包埋法分子印迹复合膜的制备及渗透机理研究被引量:13
- 2008年
- 分别以牛血红蛋白、牛血清白蛋白和溶菌酶3种蛋白质为模板分子,采用表面涂布的方法制备了在Nylon微孔滤膜表面覆盖有聚丙烯酰胺凝胶层的分子印迹复合膜,并用扫描电镜对制备的分子印迹膜的表面形态和孔结构进行了表征,发现支撑膜的表面及内部微孔表面均被一层丙烯酰胺凝胶所覆盖.对用不同蛋白为模板制备的分子印迹膜进行了这3种蛋白的单一组分和双组分混合溶液渗透实验.结果表明,各蛋白底物在印迹膜上的渗透规律是特异性的识别位点和尺寸效应共同作用的结果.特异性识别位点会选择性地识别模板分子,从而使其渗透速度减慢;尺寸效应主要体现在底物蛋白的体积越小其渗透越快.
- 张茉何锡文秦磊李文友陈朗星张玉奎
- 关键词:膜分离
- 3-氨基苯硼酸为功能单体在壳聚糖上印迹牛血清白蛋白的研究被引量:18
- 2008年
- 以壳聚糖为载体,3-氨基苯硼酸为功能单体对牛血清白蛋白进行了分子印迹的研究,并对吸附过程进行Langmuir等温吸附模型的数据处理.结果表明,印迹聚合物上形成了对于模板分子有较高的吸附容量和选择性的识别位点,Langmuir等温吸附平衡常数为49.5mL/mg,结合位点的最大表观结合量为16.3mg/g,证明了该印迹聚合物对于牛血红蛋白和溶菌酶这些非模板蛋白的吸附不具有选择性.
- 王华芳何运华何锡文李文友陈朗星张玉奎
- 关键词:牛血清白蛋白壳聚糖分子印迹技术
- 对巯基苯硼酸修饰石英晶体微天平传感器用于测定唾液酸被引量:4
- 2012年
- 硼酸与二醇的脱水缩合反应已被广泛用于检测或富集顺式邻位多羟基化合物.本文以对巯基苯硼酸(MPBA)自组装修饰石英晶体微天平(QCM)芯片,基于硼酸根对唾液酸的特殊反应,建立了检测唾液酸(SA)的新方法.采用扫描电子显微镜表征了对巯基苯硼酸对石英晶体微天平的功能化修饰过程,并研究了溶液pH值对芯片表面亲和力的影响.实验结果表明,随着pH值的降低,修饰芯片对唾液酸的结合能力增强,而对参照物葡萄糖的结合能力则降低.在pH=4.0的条件下,该传感器在0.50~5.0 mmol/L范围内对唾液酸有很好的线性响应,相关系数为0.9950,检出限为0.15 mmol/L.此传感器提供了一种简易的唾液酸检测方法,为实际样品的测定奠定了基础.
- 段淑静何锡文陈朗星张玉奎
- 关键词:石英晶体微天平唾液酸自组装
- 光接枝表面修饰法制备牛血红蛋白的分子印迹微球被引量:12
- 2008年
- 聚苯乙烯球载体表面经引发转移终止剂修饰后,采用光接枝表面印迹方法制备了以牛血红蛋白(BHb)为模板分子、丙烯酰胺为功能单体和N,N′-亚甲基双丙烯酰胺为交联剂的分子印迹聚合物微球(MIP).进一步采用红外光谱(IR)、扫描电子显微镜(SEM)和元素分析对聚合物微球进行了表征,证实了载体表面成功地接枝了分子印迹层,并研究了其吸附性能和分子识别选择性能.结果表明,采用光接枝表面修饰法制备的分子印迹微球对模板分子有着很好的吸附容量和识别选择性.
- 盖青青刘秋叶李文友何锡文陈朗星张玉奎
- 关键词:分子印迹分子识别牛血红蛋白光接枝引发转移终止剂
- 毛细管胶束电动色谱分析饮料中的咖啡因开放实验的实践被引量:4
- 2008年
- 为生物学专业本科生开设“毛细管胶束电动色谱分析饮料中的咖啡因”开放实验,介绍了开放实验选题的目的和意义,以及具体实验内容和实验结果与讨论。该实验可作为仪器分析和色谱分析课程中的毛细管电泳教学实验。
- 屈锋覃浩马文韬
- 关键词:毛细管胶束电动色谱咖啡因
- 氨基硅球表面印迹牛血清白蛋白分离条件的初步探讨被引量:15
- 2009年
- 采用固定模板蛋白表面印迹的方法,在氨丙基衍生的硅球表面制备溶胶-凝胶印迹聚合物识别牛血清白蛋白。以该体系为例对制备蛋白质印迹聚合物的各个基本参数与分离选择性的关系进行研究。结果表明,用正辛基三甲氧基硅烷、氨丙基三乙氧基硅烷、四乙氧基硅烷在摩尔比为42.5∶42.5∶15,酸度为pH7.0时进行聚合,并采用0.1mol/LNaOH与10%(V/V)HAc-10%(m/V)SDS联用的方法洗脱固定的模板蛋白,由此制备的印迹聚合物的分离选择性能较好;并初步讨论了识别蛋白质的机理。
- 周雪何锡文陈朗星李文友张玉奎
- 关键词:表面印迹牛血清白蛋白
- 磁性粒子在蛋白质分离纯化中的应用被引量:18
- 2010年
- 磁性粒子与磁性分离技术结合用于生物分子和生物微粒的分离近年来受到了广泛关注。磁性粒子经过适当的表面修饰,可高度选择性地结合目标蛋白,在解决蛋白质的快速分离及高特异性的选择性分离方面具有优势。随着蛋白质组学研究的发展,磁性粒子用于蛋白质分离纯化的研究日渐增多。本文介绍了磁性粒子和磁性分离的基本特点,综述了近5年国内外有关磁性粒子在蛋白质分离纯化中的应用和发展现状。
- 盖青青屈锋梅芳张玉奎
- 关键词:磁性粒子蛋白质分离纯化
- “毛细管电泳快速分析蛋白质”开放实验的实践被引量:1
- 2009年
- 为生物学专业本科生开设“毛细管电泳快速分析蛋白质”开放实验的实践和探索,包括实验选题的意义、实验目的、实验内容以及实验结果与讨论。此实验可作为毛细管电泳快速检测蛋白质的教学实验。
- 屈锋刘松南任肖敏李倩
- 关键词:蛋白质分析毛细管电泳