教育部留学回国人员科研启动基金(2000HG003)
- 作品数：13 被引量：53H指数：4
- 相关作者：赵守亮肖明振王捍国郝建军张蓉更多>>
- 相关机构：第四军医大学第四军医大学口腔医院更多>>
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- L型钙离子通道α_1亚基D亚型在发育小鼠磨牙牙胚成牙本质细胞中的表达被引量：12
- 2002年
- 目的 :研究成牙本质细胞分化不同阶段L型钙离子通道α1亚基D亚型的分布情况。方法 :采用兔抗小鼠L型钙离子通道α1D亚基多克隆抗体进行牙胚免疫组织化学染色。结果 :在前成牙本质细胞胞体、功能性成牙本质细胞的近矿化端以及成熟成牙本质细胞的胞体和突起上均发现有L型钙离子通道α1亚基D亚型分布。结论
- 李玉成赵守亮张蓉Smith AJ
- 关键词：L型钙离子通道成牙本质细胞免疫组织化学磨牙牙胚多克隆抗体小鼠
- 反义DSPP寡核苷酸对体外培养牙胚发育、矿化影响的研究
- 牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)是目前较为公认的牙齿特异性蛋白。对于它的研究,目前主要集中在基因水平,而对它生物学功能的认识仅由理化性质推导而来。已有的研究提示:DSPP可...
- 张蓉肖明振赵守亮徐平西张春宝吉兰汪平
- 文献传递
- hTERT激活人成牙本质细胞端粒酶的实验研究被引量：1
- 2002年
- 目的 :明确外源性人端粒酶逆转录酶 (humantelomerasereversetranscriptase,hTERT)能否调控人成牙本质细胞的端粒酶活性。方法 :培养人成牙本质细胞样细胞 ,采用脂质体转染法 ,将编码hTERT基因的真核表达质粒pCIneo -hTERT导入目的细胞。培养液加G418筛选 ,稳定后检测hTERT在mRNA和蛋白水平的表达以及端粒酶活性。结果 :转染后细胞表达hTERTmRNA及其蛋白 ,同时端粒酶活性转为阳性。结论 :在人成牙本质细胞样细胞内 ,外源性hTERT可以激活端粒酶 ,为建立永生化细胞系奠定了基础。
- 王捍国肖明振赵守亮郝建军高杰
- 关键词：HTERT端粒酶成牙本质细胞
- 永生化人成牙本质细胞样细胞系的建立被引量：25
- 2003年
- 目的 :建立永生化人成牙本质细胞系 .方法 :采用脂质体转染法 ,将人端粒酶逆转录酶 (hTERT)基因导入原代人成牙本质细胞样细胞 .培养液加G4 18筛选约 1mo后 ,抗性细胞克隆形成 ,滤纸片法转移、扩增并连续培养 .检测转染细胞内hTERT的基因整和和表达 ,初步分析细胞系的生物学特征 .结果 :hTERT稳定转染入目的细胞 ,表达mRNA及其蛋白 .转染后共获得 5个细胞克隆 ,克隆 5b来源的细胞在体外长期连续培养下生长良好 ,具有较高碱性磷酸酶活性 ,在转录水平表达成牙本质细胞特异性标志牙本质涎磷蛋白 ,细胞核型正常 .该细胞系至今传代 5 6代 ,约 6mo,命名为hTERT hOd l.结论
- 王捍国肖明振赵守亮郝建军张进
- 关键词：永生化细胞系
- 牙本质涎磷蛋白在小鼠牙胚表达的原位杂交研究被引量：2
- 2003年
- 目的 :探讨牙本质涎磷蛋白 (dentinsialophosphoprotein ,DSPP)mRNA在牙齿发育过程中的作用。方法 :采用原位杂交技术 ,观测小鼠牙齿发育各阶段标本中DSPPmRNA的表达。结果 :DSPP在成牙本质细胞的表达始于钟状中期 ,并贯穿以后的各个时期 ;此阶段 ,它还在前成釉细胞及成釉细胞中具有一过性表达。结论 :DSPP在牙胚发育过程中的表达具有时空特异性 ;
- 张蓉肖明振赵守亮徐平西张春宝汪平
- 关键词：牙本质涎磷蛋白小鼠原位杂交牙齿发育牙本质磷蛋白牙本质涎蛋白
- c-Myc激活人成牙本质细胞样细胞端粒酶的实验研究被引量：2
- 2003年
- 目的 :明确在人成牙本质细胞样细胞内c -Myc可否调控端粒酶活性。 方法 :将c -Myc基因转染至原代人成牙本质细胞样细胞样细胞 ,G418筛选后检测细胞内c -Myc和端粒酶逆转录酶 (telomerasereversetranscrip tase ,TERT)的表达以及端粒酶活性。结果 :c -Myc稳定整和入细胞并表达蛋白 ,该转染细胞在mRNA和蛋白质水平上TERT的表达上调 ,端粒酶活性转为阳性。结论 :在人成牙本质细胞样细胞样细胞内 ,外源性c -Myc基因可以通过上调TERT的表达水平而激活端粒酶 ,为建立永生化人成牙本质细胞样细胞系奠定了基础。
- 王捍国肖明振赵守亮贾骏王景杰郝建军
- 关键词：成牙本质细胞端粒酶C-MYC基因端粒酶逆转录酶
- 小鼠牙胚发育无血清体外培养模型的建立被引量：4
- 2002年
- 目的 :建立小鼠牙胚发育无血清体外培养模型。方法 :胎龄 17d的Balb/c胎鼠上颌第一磨牙牙胚 ,BGJb无血清半固态培养基中恒温培养 4、6、8～ 16d。终止培养后常规制备石蜡切片 ,HE及vonKossa染色。结果 :初始培养时牙胚处于帽状晚期 ,成釉器分为三层 ,紧邻基底膜的牙乳头细胞排列不规则 ,核多为圆形。体外培养 4～ 6d后 ,牙胚在体外进一步生长。培养 6d后 ,牙尖处成牙本质细胞分化为高柱状 ,并在局部分泌基质。体外培养 8d,牙胚进入钟状晚期 ,有基质带形成。培养 16d后 ,牙冠已基本形成 ,根方出现上皮隔。vonKossa染色结果显示 :培养 10d后 ,牙胚基质带出现阳性着色。结论 :建立了小鼠磨牙发育无血清体外培养模型 ,该模型在体外真实地再现了成牙本质细胞、成釉细胞的分化和基质分泌、矿化等生理过程 。
- 张蓉肖明振赵守亮张春宝吉兰
- 关键词：小鼠牙胚无血清培养
- 人成牙本质细胞样细胞的原代培养被引量：17
- 2002年
- 目的 :培养人原代成牙本质细胞。方法 :取引产的 8月龄死胎 ,剥离乳磨牙胚牙乳头 ,组织块法培养。然后采用滤纸片法挑取了 3个与成牙本质细胞形态相似的细胞克隆 ,扩大培养。对培养细胞从形态学、矿化结节、碱性磷酸酶 (alkalinephosphatase,ALP)活性、人牙本质基质蛋白 - 1(humandentinmatrixprotein- 1,hDMP - 1)和人牙本质涎磷蛋白 (humandentinsialophosphoprotein ,hDSPP)在mRNA水平上的表达等方面进行鉴定。结果 :有一个克隆来源的细胞呈梭形、有单侧较长细胞突起 ,未见核极化 ,同时它们具矿化功能 ,表达人成牙本质细胞特异性标志hDMP - 1、hDSPPmRNA。结论 :该培养细胞为人成牙本质细胞样细胞 ,为进一步的有关研究奠定了基础。
- 王捍国肖明振赵守亮郝建军
- 关键词：成牙本质细胞细胞培养
- 小鼠牙胚、软骨组织中牙本质涎磷蛋白基因的克隆被引量：3
- 2001年
- 目的 :从小鼠牙胚、软骨组织中克隆牙本质涎磷蛋白基因 (dentinsialophosphoprotein ,DSPP)。方法 :采用RT -PCR方法 ,从小鼠牙胚及软骨组织中克隆DSPP基因片段 ,将所得片段装入载体pGEM -TEasyVector进行序列测定。结果 :从两种组织中均获得 719bp的特异性片段。序列分析表明 ,与已发表的DSPP序列99.7%同源。结论 :成功地从小鼠牙胚、软骨中克隆到DSPP基因部分序列。结果提示 :除牙齿组织外 ,DSPP还可在软骨中表达 。
- 张蓉肖明振赵守亮顾淑萍岳玲郑欣娟汪平
- 关键词：软骨牙本质涎磷蛋白基因克隆
- 小鼠鼻软骨细胞的培养被引量：2
- 2002年
- 目的 研究小鼠鼻软骨细胞体外培养方法及形态特征。方法 取Balb/c小鼠子鼠的鼻中隔软骨 ,随机分为 4组后分别消化 4h ,8h ,12h及 16h ,观察体外培养软骨细胞的生长状况 ,并用Ⅱ型胶原抗体进行细胞来源鉴定。结果 经Ⅱ型胶原酶孵育消化 4h的组织 ,细胞量少 ,生长缓慢 ,无法进行正常传代。而消化 8h的软骨组织、细胞于 1d后即开始贴壁、伸展 ,9d后第一次传代 ,传代细胞生长稳定 ,形态多样 ,Ⅱ型胶原抗体染色阳性。消化 2h及 16h的细胞几乎不贴壁。结论 采用酶消化法可获得体外培养的小鼠鼻软骨细胞 ,消化时间以 8h为佳。
- 陈小平张蓉肖明振赵守亮张春宝陈富林
- 关键词：小鼠体外培养牙本质涎磷蛋白DSPP
