国家自然科学基金(31271870)
- 作品数：30 被引量：152H指数：9
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- 相关机构：上海海洋大学上海农业科学院浙江工业大学更多>>
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- 相关领域：轻工技术与工程生物学医药卫生农业科学更多>>
- 酸性电解水处理后南美白对虾贮藏过程中肠道微生物的多样性变化被引量：5
- 2015年
- 肠道微生物是引起水产品腐败变质的主要污染源之一。酸性电解水(AEW)作为新型环保消毒剂,因其高效广谱杀菌的特点,已逐渐被应用于水产品安全控制方面并且日益受到人们的重视。本研究采用变性梯度凝胶电泳技术,分析了经自来水(TW)与酸性电解水分别处理的南美白对虾(Penaeus vannawei)于0、4、25℃贮藏过程中肠道微生物多样性的变化规律。结果表明,与对照相比,经酸性电解水处理后的样品肠道微生物多样性在贮藏过程中有所减少。因此,酸性电解水能明显改变肠道微生物的多样性,为其保障水产品质量安全提供了理论参考依据。
- 付娇娇彭织云刘海泉孙晓红潘迎捷赵勇
- 关键词：南美白对虾酸性电解水
- 副溶血性弧菌毒力基因表达时内参基因的选择被引量：5
- 2013年
- 【目的】筛选出合适的内参基因用于分析不同环境条件下副溶血性弧菌毒力基因的表达情况。【方法】本研究以虾样品中、海水样品中、过滤海水样品中以及TSB培养条件下的副溶血性弧菌为材料,利用qRT-PCR技术评价了GAPDH、pvuA、pvsA和rpoS 4种常用管家基因在不同条件下的表达稳定性。【结果】4种管家基因均能特异扩增,表达稳定性排列顺序为pvuA(2.906)>pvsA(3.197)>GAPDH(3.746)>rpoS(6.512),进一步通过geNorm软件分析,最终选择两个表达最为稳定的内参基因即pvuA和pvsA,以二者的几何平均值作为参照可更为准确地校正目的基因的表达。【结论】pvuA和pvsA可作为环境样品中副溶血性弧菌毒力基因表达变化研究的内参基因。
- 李沁彭织云陈鑫鹏孙晓红潘迎捷赵勇
- 关键词：副溶血性弧菌环境样品QRT-PCR内参基因
- 基于反转录实时荧光定量PCR的3种标准曲线定量活副溶血性弧菌的差值分析被引量：1
- 2014年
- 【目的】比较分析基于反转录实时荧光定量PCR(Real-time Reverse-Transcriptase PCR,Real-time RTPCR)技术建立的3种标准曲线定量样品中活副溶血性弧菌数量的差异性。【方法】体外转录合成带有目的片段(tlh基因)的RNA标准品,提取纯培养副溶血性弧菌(108CFU/mL)RNA样品,提取接种于虾上副溶血性弧菌(106CFU/g)RNA样品,将3种RNA样品分别反转录得到cDNA,10倍梯度稀释,进行Real-time PCR扩增,建立标准曲线A、B、C(其中标准曲线A和C为本研究首次建立)。用标准曲线A、B、C分别定量6个样品(2个纯培养副溶血性弧菌样品、2个人工污染煮熟南美白对虾样品和2个人工污染生南美白对虾样品)中活副溶血性弧菌数量,并与传统涂布计数法进行比较,分析定量结果的差异性。【结果】3种标准曲线均具有较好的线性关系(R2>0.99);3种标准曲线定量6个样品中活副溶血性弧菌结果均显著(p<0.05)低于涂布定量结果,与涂布定量结果的相对误差大小顺序为:标准曲线A(30.0%)>标准曲线C(18.8%)>标准曲线B(6.9%);标准曲线A对6个样品定量结果与标准曲线B、C定量结果的差值平均值分别为-2.25Lg CFU/mL和-0.75 Lg CFU/mL,相对误差平均值为48.2%和15.9%,标准曲线B与C对6个样品定量结果的差值在(1.47-1.53)Lg CFU/mL之间,相对误差在19.0%-23.8%之间。【结论】标准曲线B可以广泛应用于Real-time RT-PCR准确定量样品中微生物数量。
- 靳梦曈孙文烁李沁孙晓红潘迎捷赵勇
- 关键词：REAL-TIME副溶血性弧菌
- 多重与单一耐药的副溶血性弧菌在纯培养及南美白对虾中生长动力学的参数比较研究被引量：6
- 2015年
- 为比较多重与单一耐药的副溶血性弧菌生长动力学差异,并探索"细菌耐药性"与"风险"之间的关联,本研究应用Bioscreen全自动微生物生长曲线分析仪结合梯度稀释法,对不同耐药程度的副溶血性弧菌在纯培养条件(TSB)下的最大比生长速率(μmax)进行了比较分析。进一步选取六重耐药的VPD18菌株与单一耐药的VPD43菌株接种于南美白对虾中,构建不同温度下的生长曲线,采用Baranyi模型进行拟合得出生长动力学参数。结果显示:在纯培养条件下,多重与单一耐药的副溶血性弧菌的μmax间并无显著性差异(P>0.05)。而在南美白对虾中,单一耐药的副溶血性弧菌的μmax更大,但六重耐药的菌株却具有更短的延滞期(λ)。基于该现象提出假设:细菌耐药程度的增加可能导致其延滞期缩短,但对其最大比生长速率影响不显著。该结果可为我国开展副溶血性弧菌的定量风险评估提供基础数据。
- 娄阳张昭寰肖莉莉郭丹凤刘海泉潘迎捷潘迎捷
- 关键词：副溶血性弧菌细菌耐药性
- 酸性电解水冰理化指标变化对副溶血性弧菌杀菌效果的影响被引量：2
- 2013年
- 为探究不同时间下电解水冰的理化特性变化对杀菌效果的影响,作者将5种不同质量浓度电解液（NaCl质量浓度为0.75、1、1.25、1.5、1.75 g/L）制备的电解水于-36℃下制成电解水冰,分别于0、2、4、6、8、10h测定其pH值、氧化还原电位（ORP）及有效氯浓度（ACC）,并研究了相应保存时间下电解水冰对副溶血性弧菌的杀灭能力 结果表明：0～6 h内,不同质量浓度间电解水冰的pH值变化不显著;而6h后,NaCl质量浓度≤1g/L制备的电解水冰,其pH变化速率小于NaCl质量浓度＞1 g/L的冰.不同浓度电解水冰的ORP、ACC随时间的增加而减少,但ORP变化几乎遵循同一趋势;相比NaCl质量浓度≤1.5 g/L制备的电解水冰,NaCl质量浓度＞1.5 g/L的ACC损失率较大.0～10 h内,NaCl质量浓度为1.5g/L及1.25 g/L的电解水冰对副溶血性弧菌的杀菌量差值最大,与其它所有相邻浓度间杀菌量差值相比,最高比值可达117.6倍.根据相关性分析可得,电解水冰的pH、ORP、ACC对杀菌量的相关系数r分别为0.831、0.787和0.944.
- 李继兵林婷廖超靳梦曈潘迎捷赵勇
- 关键词：副溶血性弧菌杀菌效果
- 改良K-B法用于副溶血性弧菌耐药性检测被引量：9
- 2014年
- K-B纸片法是最为广泛的细菌药敏测定方法之一,针对常见的食源性致病菌副溶血性弧菌,对K-B纸片法进行优化和改良。通过建立OD-菌数对应公式以代替传统的麦氏比浊方法,并根据抑菌圈判别结果的差异,选择了标准一次性平皿(9 cm×9 cm),同时对比3种不同的涂布方法,得出定量300μL棉拭子涂布方法变异系数(CV)最小,最后通过8株野生副溶血性弧菌的耐药性检测,表明改良K-B法与传统方法的实验结果基本保持一致。从而建立了一种更高效、更快捷的细菌耐药性测量方法,可应用于副溶血性弧菌的耐药性检测。
- 张昭寰郭丹凤王敬敬林婷潘迎捷赵勇
- 关键词：细菌耐药性副溶血性弧菌
- 运用Real-time quantification PCR方法建立副溶血性弧菌在即食虾中的生长预测模型被引量：5
- 2013年
- 运用Real-time quantification PCR(real-time qPCR)方法建立副溶血性弧菌在即食虾中生长预测模型。首先构建质粒标准品,梯度稀释后建立标准曲线,然后用Real-time qPCR方法检测虾中副溶血性弧菌的数量,最后建立37℃下即食虾中副溶血性弧菌生长预测模型,并与传统涂布计数方法进行比较。结果表明,Real-time qPCR方法和传统计数方法均可建立Gmopertz模型、Logistic模型和Richards模型,模型拟合的相关系数R2均在0.9以上。基于Real-timeqPCR方法省时省力、特异性好等优点,用Real-time qPCR方法建立微生物预测模型是未来预测微生物学领域的一种发展趋势。
- 彭织云王敬敬唐晓阳潘迎捷赵勇
- 关键词：REAL-TIMEPCR副溶血性弧菌
- 不同致病性副溶血性弧菌在南美白对虾中的生长动力学参数比较研究被引量：5
- 2013年
- 为了探讨不同致病性副溶血性弧菌(pathogenic Vibrio parahaemolyticus,pVp)在南美白对虾及其他生长基质(培养基和三文鱼)中生长动力学参数的差异。测定了12℃和35℃下,三株pVp(含有tdh基因):ATCC33847、F13、临床分离株(Clinical Vibrio parahaemolyticus strain,CV)在南美白对虾中的生长曲线,采用不同一级模型拟合得出生长动力学参数并与同类研究进行比较。结果显示,Baranyi模型对三株致病性副溶血性弧菌生长曲线的拟合效果最好。通过将本研究结果与同类研究相比可知,血清型为O3:K6的致病性副溶血性弧菌CV在12℃和35℃下在南美白对虾中的μmax均大于同类研究中的pVp在培养基和三文鱼中的μmax。不同的pVp菌株在12℃、不同生长基质中的生长动力学参数存在较大差异。由此可见,在构建副溶血性弧菌的生长预测模型及进行风险评估时,应充分考虑不同菌株之间以及不同生长基质之间的差异对微生物生长动力学参数的影响。
- 唐晓阳韩婷谢晶潘迎捷赵勇
- 关键词：南美白对虾
- 不同耐药性致病性副溶血性弧菌的生长特性比较研究被引量：12
- 2014年
- 用K-B纸片扩散法分析了8株致病性副溶血性弧菌菌株对10种抗生素的耐药性,发现6株菌株具有耐药性,其中,1株耐3种抗生素,1株耐2种抗生素,其余4株耐1种抗生素。比较了20、25、37℃下这8株菌株在TSB(含3%NaCl,pH8.0)中的生长特性。通过Bioscreen全自动微生物生长曲线分析仪建立了这8株菌的一级生长模型,并比较其最大比生长速率(μmax),延滞期(λ)及最大生长量(a)。同时比较了这8株菌的ERIC-PCR图谱的差异性。结果显示,不同耐药性致病性副溶血性弧菌菌株的生长参数存在一定的差异性,但是菌株的各个生长参数的大小与菌株的耐药性之间没有明显的对应关系。并且发现ERIC-PCR图谱与菌株的耐药性之间也没有明显的对应关系。本研究为耐药性致病副溶血性弧菌的风险评估提供参考依据。
- 郭丹凤张昭寰肖莉莉娄阳潘迎捷赵勇
- 关键词：耐药性风险评估
- 酸性电解水冰对小黄鱼品质及肌肉组织中酶活力变化的影响被引量：12
- 2017年
- 为探讨酸性电解水(acidic electrolyzed water,AEW)冰对水产品的保鲜效果,以小黄鱼为对象,研究小黄鱼贮藏7 d过程中酶活力及微生物菌落总数的变化。结果表明,AEW冰抑制酸性磷酸酶、组织蛋白酶B活性的效果不明显,但对组织蛋白酶D、脂肪酶活性有显著的抑制效果(P<0.05);传统平板计数以及聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳结果显示,AEW冰能抑制鱼体上腐败微生物的生长,且最大减少量可达0.34(lg(CFU/g))。因此,AEW冰技术作为一种新型高效杀菌保鲜技术,具有广阔的应用前景,相比于自来水冰更加有利于水产品的贮藏保鲜。
- 姚鑫赵爱静杜苏萍孙晓红潘迎捷赵勇
- 关键词：小黄鱼酶活性
