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湖北省科技攻关计划(2007AA301C141)
作品数:
2
被引量:8
H指数:2
相关作者:
王家宁
陈龙
程范军
唐俊明
高清平
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相关机构:
郧阳医学院附属东风医院
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高清平
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重组人促红细胞生成素促进体外培养的人骨髓间充质干细胞增殖
被引量:4
2009年
目的观察重组人促红细胞生成素(rhEPO)对人骨髓间充质干细胞(MSCs)增殖的影响,并探讨其可能机制。方法抽取健康志愿者的骨髓液,采用贴壁培养法获取第3代MSCs(P3-MSCs),通过细胞形态特征观察、细胞免疫表型检测以及诱导分化的方法鉴定MSCs。取经过鉴定的P3-MSCs,分别与不同浓度(0.5、1、5、10、50IU/ml)rhEPO共培养,应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖;以过量特异性抗体封闭EPO受体(EPOR),再用MTT法观察P3-MSCs增殖情况;采用免疫荧光细胞化学染色法检测P3-MSCs的EPOR表达,用Western印迹检测增殖信号通路蛋白表达。结果贴壁培养获取的P3-MSCs同时高表达CD105和CD90,低表达CD34和CD45,并可被诱导分化为脂肪、成骨及软骨细胞。MTT结果显示,给予EPO后,MSCs的增殖明显增强,以浓度为10IU/ml者的作用最为显著;同时加入抗EPOR抗体封闭EPOR后,MsCs的增殖率明显降低(P〈0.01)。P3-MSCs的EPOR表达阳性;用10IU/ml EPO刺激4d后,EPOR、磷酸化蛋白酪氨酸激酶2(pJAK2)及磷酸化信号转导和转录因子-5(pSTAT-5)的表达均明显上调。结论EPO能促进体外培养的骨髓MSCs增殖,该效应经EPOR介导,并与JAK2-STAT5信号途径有关。
曾琴兵
程范军
陈龙
唐俊明
刘歧焕
张卫国
高清平
王家宁
关键词:
红细胞生成素
骨髓
间质干细胞
促血小板生成素对小鼠骨髓干细胞增殖的影响
被引量:4
2008年
目的探讨促血小板生成素(TPO)对小鼠骨髓有核细胞(BMNc)的细胞周期及骨髓干细胞增殖的影响。方法将昆明小鼠随机分为实验组与对照组,每组15只。实验组腹腔注射TPO 50μg·kg^-1·d^-1,连用5d;对照组腹腔注射生理盐水0.1ml·g^-1·d^-1。每组分别于最后1次注射后6h、12h及168h收集BMNC,检测BMNC的细胞周期及表达CD34’的抗原绝对数;计数BMNC,以1×10^6细胞/cm^2接种培养并计数原代成纤维样细胞集落形成单位(CFU-F)。结果应用TPO后的细胞周期显示,实验组在6h和12h取材BMNC的G0/G1期细胞百分率较对照组低12%~8%(P〈0.05),而S+Q期增高12%~8%(P〈0.05);实验组BMNC表达CD34^+的抗原绝对数较对照组明显增加1~2倍(P〈0.05);实验组所获得CFU-F集落数比对照组增加3~9倍(P〈0.01)。结论TPO促进CD34^+细胞增加的同时,还可促进小鼠BMNC进入细胞周期,促进CFU—F集落数增多,即促进骨髓间充质干细胞(MSC)增殖,有利于改善造血干细胞移植(HSCT)的效果。
柴海霞
程范军
高清平
陈龙
唐俊明
刘岐焕
王家宁
关键词:
血小板生成素
间质干细胞
细胞周期
细胞增殖
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