海南省自然科学基金(808186)
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 相关作者：沈文涛周鹏言普黎小瑛李亚丽更多>>
- 相关机构：中国热带农业科学院海南大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金海南省自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 番木瓜eIF4E突变基因的构建被引量：1
- 2012年
- 真核翻译起始因子4E(eukaryotic translation initiation factor4E,eIF4E)的缺失或突变能影响病毒对植物的侵染,并介导植物对病毒产生抗性。已有研究证明,番木瓜环班病毒的VPg能与番木瓜eIF4E(Cp-eIF4E)互作,在此基础上,笔者通过蛋白序列比对和同源建模分析,确定了6个突变位点,采用套叠PCR方法Cp-eIF4E基因进行点突变,然后,将它们分别连接到酵母双杂交系统和双分子荧光互补系统两套表达载体上,为后续互作实验和抗病功能验证奠定基础。
- 张东东言普沈文涛黎小瑛周鹏
- 关键词：EIF4E点突变
- 番木瓜eIF(iso)4E基因克隆及其结构和表达分析被引量：3
- 2009年
- eIF4E(eukaryotic translation initiation factor4E)家族基因在多种病毒侵染植物过程中起重要作用。应用RT-PCR和RACE方法在番木瓜中克隆了cDNA全长为995bp的eIF4E异构体基因,命名为CP-eIF(iso)4E(GenBank登录号为FJ595992)。其编码的蛋白含有206个氨基酸,蛋白一级结构中的活性部位位点高度保守,三维结构中可能的抗性位点位于帽结合区域(cap-binding pocket)表面。半定量RT-PCR结果表明,CP-eIF(iso)4E在番木瓜叶片中表达较弱,在花瓣中表达最强。
- 言普沈文涛高新征李亚丽周鹏
- 关键词：番木瓜基因表达
- 应用套叠PCR技术构建番木瓜eIF4E和eIFiso4E基因的hpRNA植物表达载体
- 2010年
- 植物真核翻译起始因子4E(eIF4E)在蛋白质合成的起始中发挥重要作用,参与植物-病毒互作,影响病毒的侵染过程.为了研究eIF4E在植物病毒侵染中的功能,建立了一种快速的套叠PCR新方法,成功构建了番木瓜eIF4E和eIFiso4E基因的hpRNA结构,并将其连接到改造的植物表达载体pBI121上,为利用RNA干扰技术研究番木瓜eIF4E和eIFiso4E基因在病毒侵染中的作用奠定了基础.
- 吴金燕言普沈文涛黎小瑛周鹏
- 关键词：HPRNA植物表达载体套叠PCR
