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塞来昔布对人高转移性鼻咽癌CNE-2Z细胞侵袭力的影响被引量：3: 2010年; 目的研究塞来昔布（Cox-2选择性抑制剂）对人鼻咽癌CNE-2Z细胞侵袭力的影响及其相关机制.方法用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测不同浓度塞来昔布对鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖的影响.不同浓度塞来昔布作用鼻咽癌CNE-2Z细胞24 h后,Transwell小室检测细胞侵袭力的改变;免疫细胞化学检测肿瘤细胞中E钙黏素蛋白表达变化,反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测细胞中Cox-2和E钙黏素mRNA表达变化.结果塞来昔布明显抑制CNE-2Z细胞存活率,呈明显的浓度依赖性,24 h后25、50、100 μmol/L塞来昔布组细胞存活率（-x±s,下同）分别为（94.75±1.34）%、（91.77±2.70）%、（64.54±1.20）%,48 h后细胞存活率分别为（88.41±1.28）%、（78.84±1.56）%、（52.46±2.25）%,50%抑制浓度（IC50）为100 μmol/L,同一时间点细胞存活率差异有统计学意义（F值分别为462.204和1328.306,P值均＜0.01）.0、25、50 μmol/L塞来昔布作用鼻咽癌CNE-2Z细胞24 h,侵袭实验显示穿膜细胞数（-x±s,下同）分别为（263.7±13.5）个、（185.3±8.7）个、（144.0±8.2）个,用药组穿膜细胞数明显减少,组间差异有统计学意义（F=102.089,P＜0.01）.免疫细胞化学结果显示,0、25、50μmol/L塞来昔布组E钙黏素阳性表达的CNE-2Z细胞数分别为（21.7±2.6）个、（28.7±2.4）个、（40.3±1.3）个,50 μmol/L组阳性细胞数明显增多（F=78.637,P＜0.01）.RT-PCR结果显示：25、50 μmol/L组Cox-2 mRNA的表达比对照组明显下降（t值分别为23.950和36.651,P值均＜0.01）;25、50 μmol/L塞来昔布组E钙黏素mRNA的表达明显高于对照组（t值分别为35.829和81. 497,P值均＜0.01）.结论塞来昔布抑制鼻咽癌CNE-2Z细胞的侵袭能力,其机制可能与E钙黏素表达升高有关.; 罗伟仁李丽霞黎思怡姜汉国陈小毅; 关键词：钙黏着糖蛋白类肿瘤浸润

环氧化酶-2与肿瘤的关系被引量：22: 2006年; 罗伟仁陈小毅; 关键词：环氧化酶-2 肿瘤 COX-2抑制剂

JAK激酶抑制剂AG490对鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖和凋亡的影响被引量：4: 2009年; 背景与目的:目前研究表明,JAK-STAT3信号通路的异常激活与细胞恶性转化密切相关。本实验观察JAK激酶抑制剂AG490对鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖、凋亡及凋亡相关基因Survivin、Mcl-1表达的影响,探讨JAK-STAT3信号通路在CNE-2Z细胞凋亡调控中的作用。方法:AG490作用于体外培养的CNE-2Z细胞。MTT法检测细胞增殖,Hoechst33342荧光活染、流式细胞术检测细胞凋亡,逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测STAT3、Survivin和Mcl-1 mRNA表达,Western blot检测STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)、Survivin和Mcl-1蛋白表达。结果:100μmol/LAG490作用24、48h后对CNE-2Z细胞增殖抑制率分别为37.95%和52.99%。流式细胞术显示,经50μmol/L和100μmol/LAG490作用24h后,细胞凋亡率由处理前的1.37%分别提高到9.30%和9.00%(P<0.01)。荧光显微镜下可见到典型的细胞凋亡形态学改变。细胞STAT3活化程度降低,Survivin、Mcl-1基因表达下调。结论:阻断JAK-STAT3信号通路可抑制CNE-2Z细胞增殖,并可能通过下调凋亡抑制基因Survivin、Mcl-1表达诱导细胞凋亡。; 吴民华陈小毅蔡康荣; 关键词：鼻咽肿瘤 CNE-2Z细胞生存素 MCL-1 AG490

柚皮素通过ROS/JNK/Bcl2通路抑制宫颈癌Hela细胞增殖和迁移被引量：18: 2018年; 目的:探讨柚皮素对宫颈癌Hela细胞增殖和迁移影响及分子机制。方法:应用MTT法检测柚皮素对宫颈癌Hela细胞活力的影响,Transwell检测柚皮素对Hela细胞迁移的影响,DCFH染色检测柚皮素对宫颈癌Hela细胞活性氧(ROS)生成的影响,流式细胞仪检测柚皮素对宫颈癌Hela细胞凋亡的影响,Western blot法检测柚皮素对细胞内p-JNK和Blc2蛋白表达的影响。结果:12.5、25、50、100、200μg/ml柚皮素处理细胞24h,细胞活力呈浓度依赖性降低。ROS抑制剂(NAC)能显著抑制柚皮素对细胞活力的抑制作用。50μg/ml柚皮素处理细胞24h能抑制细胞迁移、促进细胞ROS生成和细胞凋亡,细胞凋亡率为(42.2±1.6)%;促进p-JNK的表达,抑制Bcl2的表达,p-JNK表达水平为(2.34±0.12)倍,Bcl2表达水平为(0.22±0.03)倍。结论:柚皮素可诱导宫颈癌Hela细胞ROS的产生,通过激活ROS/JNK/Bcl2通路诱导细胞凋亡,抑制细胞增殖和迁移。; 赖银璇王明蕊杨海丽吴民华; 关键词：柚皮素宫颈癌HELA细胞 JNK通路

潜伏膜蛋白1对鼻咽癌细胞CNE1中端粒酶的激活作用及相关调控机制: 2008年; 目的探讨LMP1对鼻咽癌上皮样细胞系CNE1(nasopharyngeal carcinoma epithelioid cell lines,CNE)中端粒酶活性的影响及相关调控机制。方法分别采用SP法、RT-PCR法和PCR-ELISA法检测鼻咽癌细胞CNE1、CNE1GL(转染了目的基因质粒PAT-GFP-LMP1的CNE1细胞株)和CNE-2Z中LMP1、NF-κB、c-myc和hTERT的表达、hTERT mRNA水平和端粒酶活性。结果(1)CNE1GL与CNE1细胞相比,LMP1、NF-κB、c-myc、hTERT的表达水平均高于CNE1细胞中各指标的表达,差异有统计学意义(P<0.01)。CNE-2Z和CNE1GL、CNE1相比,细胞中各指标的表达水平均最高(P<0.01或P<0.05)。CNE1GL细胞中,LMP1与NF-κB、NF-κB与c-myc及LMP1与c-myc的表达之间均呈显著正相关(P<0.01或P<0.05)。(2)hTERT mRNA水平在CNE1GL细胞明显高于CNE1细胞,差异有统计学意义(P<0.01);在三种细胞中,CNE-2Z细胞中hTERT mRNA水平最高(P<0.01)。(3)CNE1GL细胞中的端粒酶活性明显高于CNE1细胞,差异有统计学意义(P<0.05);CNE1GL细胞中的端粒酶活性略低于CNE-2Z细胞(P>0.05);CNE-2Z细胞中的端粒酶活性明显高于CNE1细胞(P<0.01)。结论在CNE1GL细胞中,LMP1通过激活hTERT转录而激活端粒酶。此调控过程可能和NF-κB激活,NF-κB进而上调c-myc表达水平,c-myc提高hTERT转录水平有关。LMP1激活端粒酶可能是鼻咽癌癌变过程中的重要事件。; 赵同伟陈小毅罗伟仁赵颖海; 关键词：潜伏膜蛋白1 端粒酶逆转录酶端粒酶

EB病毒LMP1对人鼻咽癌细胞转移能力的影响被引量：13: 2008年; 背景与目的:EB病毒编码的潜伏膜蛋白1(latent membrane protein 1,LMP1)在鼻咽癌的浸润和转移过程中起重要的作用。本实验目的在于研究EB病毒LMP1对人鼻咽癌细胞转移能力的影响和探讨其中的相关机制。方法:应用免疫细胞化学RT-PCR法和Western blot检测LMP1、E-cadherin和intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1)在人高分化鼻咽癌细胞系CNE1和转染了LMP1基因的CNE1-GL细胞中的表达。应用细胞-细胞粘附实验、细胞-基质粘附实验、划痕实验和细胞运动实验观察LMP1对鼻咽癌细胞粘附和运动能力的影响。结果:免疫细胞化学结果显示:LMP1在CNE1和CNE1-GL细胞中的阳性率分别为0和(96.60±3.03)%(P<0.01);E-cadherin蛋白的阳性率分别为(37.47±1.50)%和(19.53±1.92)%(P<0.01);ICAM-1蛋白的阳性率分别为(5.27±1.45)%和(93.33±4.23)%(P<0.01)。RT-PCR和Westernblot结果表明,与CNE1细胞相比较,CNE1-GL细胞中E-cadherin的mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.01),而ICAM-1的mRNA和蛋白表达则明显升高(P<0.01)。肿瘤细胞同质粘附实验显示,CNE1-GL细胞的同质粘附能力较CNE1细胞弱(P<0.05)。肿瘤细胞-基质粘附实验得出CNE1-GL细胞的异质粘附能力(A值=0.60±0.03)较CNE1细胞(A值=0.46±0.01)强(P<0.01)。肿瘤细胞运动实验显示,穿过PVPF膜的CNE1-GL细胞数多于CNE1细胞(119.3±6.0 vs 46.3±7.0,P<0.05)。结论:LMP1通过抑制E-cadherin表达、促进ICAM-1表达从而抑制肿瘤细胞的同质粘附能力、增强其异质粘附能力和运动能力来参与鼻咽癌的侵袭和转移。; 欧小波陈小毅吴民华罗伟仁; 关键词：EB病毒 LMP1 ICAM-1 细胞粘附

EB病毒潜伏膜蛋白1对鼻咽癌细胞增殖及STAT3信号通路的影响: 2010年; 目的：探讨EB病毒编码的潜伏膜蛋白1（LMP1）对人鼻咽癌细胞增殖及信号转导与转录活化因子3（STAT3）信号通路的影响。方法：体外培养人高分化鼻咽癌细胞系CNE1及转染了LMP1基因质粒的CNE1细胞（CNE1-GL细胞），通过绘制细胞生长曲线及平板克隆形成实验比较转染LMPl基因前后细胞增殖能力的变化；RT-PCR及免疫印迹方法检测STAT3及其下游基因survivin表达的变化。结果：转染LMP1基因后，CNE1细胞生长加快、克隆形成率增加；STAT3活化程度增加，survivin表达增强。结论：LMP1可促进CNE1细胞增殖，其机制可能是通过活化STAT3信号通路，进而促进抗凋亡基因survivin表达。; 吴民华陈小毅陈东; 关键词：细胞增殖潜伏膜蛋白1 生存素人鼻咽癌细胞

鼻咽癌组织中信号转导与转录活化因子3与潜伏膜蛋白1的表达及其关系被引量：2: 2010年; 目的研究鼻咽癌组织中信号转导与转录活化因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)的表达和活化状态及其与爱泼斯坦-巴尔病毒(Epstein-Barr virus,EBV)编码的潜伏膜蛋白1(latent mem-brane protein 1,LMP1)表达的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测45例鼻咽癌、27例慢性鼻咽炎组织中LMP1、STAT3和磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白的表达并分析其相关性。结果鼻咽癌组织中LMP1、STAT3和p-STAT3蛋白的阳性率均高于慢性鼻咽炎组织(P<0.01)。相关分析结果显示,LMP1和p-STAT3表达呈正相关关系(rs=0.302,P<0.05),但LMP1与STAT3表达无明显相关(P>0.05)。结论鼻咽癌组织中存在STAT3蛋白高表达和异常激活;LMP1可能参与STAT3的活化。; 吴民华陈小毅陈东; 关键词：鼻咽肿瘤潜伏膜蛋白1

EB病毒潜伏膜蛋白1与肿瘤转移研究的进展被引量：2: 2007年; 欧小波陈小毅; 关键词：EB病毒潜伏膜蛋白1 肿瘤转移

STAT5和c-myc在大肠癌中的表达及意义被引量：5: 2011年; 目的探讨大肠癌中STAT5和c-myc蛋白表达与肿瘤病理特征的关系及两者的相关性。方法采用免疫组织化学SP法检测56例大肠癌组织STAT5和c-myc蛋白的表达,同时选取16例大肠腺瘤组织作对照。结果 STAT5在结肠癌组织中的阳性表达率(34/56,60.7%)明显高于大肠腺瘤组织(3/16,18.8%),P<0.01。STAT5表达与肿瘤Dukes临床分期及淋巴结转移均呈正相关(P<0.05)。c-myc在结肠癌组织中的阳性表达率(35/56,62.5%)明显高于大肠腺瘤组织(4/16,25.0%),P<0.01。c-myc表达与肿瘤分化程度、Dukes临床分期及淋巴结转移等均无明显相关(P>0.05)。STAT5和c-myc在大肠癌中表达呈正相关(r=0.359,P<0.01)。结论 STAT5和c-myc在大肠癌的发生发展中起重要作用;STAT5检测可作为判断大肠癌恶性程度的指标;大肠癌中c-myc表达可能受STAT5调控。; 吴民华陈小毅梁艳清; 关键词：STAT5 C-MYC 大肠癌免疫组织化学

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广东省自然科学基金(031963)

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