国家教育部博士点基金(20101106120059)
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 相关作者：杨红钱家鸣胡珊珊杨晓鸥王健更多>>
- 相关机构：北京协和医院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金杨森科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肿瘤坏死因子-α对人胰腺癌细胞CXCL8及其受体表达的影响
- 2012年
- 目的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)可以促进多种细胞因子和化学趋化因子的分泌,从而参与肿瘤的进展和转移。为探讨胰腺癌微环境调节机制,本课题研究了TNF-α对于胰腺癌细胞CXCL8基因表达和蛋白分泌及其受体CXCR1和CXCR2的影响。方法应用real-timePCR和ELISA方法检测4株胰腺癌细胞株PANC-1、CFPAC-1、Aspc1和Bxpc3。结果①Real-timePCR结果显示TNF-α刺激胰腺癌细胞后CXCL8mRNA相对表达量呈浓度依赖性。而从时间曲线分析,CXCL8mRNA的相对表达量以12h为显著,随后逐渐下降。②选取12h为时间点,检测10ng/mlTNF-α对PANC-1、Aspc-1、BxPc3细胞CXCL8mRNA相对表达量,结果显示PANC-1(14.31±4.80),Aspc-1(13.01±3.11)和Bxpc3(116.74±37.33)细胞CXCL8mRNA相对表达量较对照组显著增高(P<0.05)。③10ng/mlTNF-α刺激胰腺癌细胞72h后,胰腺癌细胞上清液中CXCL8浓度较阴性对照组(0ng/mlTNF-α)显著增加(P<0.05)[CFPAC-1细胞为(2689.95±79.40)ng/mlvs(2048.51±62.25)ng/ml;Bxpc3细胞为(1866.07±869.83)ng/mlvs(1308.92±850.29)ng/ml;Aspc-1细胞为(2077.19±344.13)ng/mlvs(1861.17±427.74)ng/ml;PANC-1细胞为(1624.10±420.77)ng/mlvs(1179.27±273.84)ng/ml]。④Real-timePCR检测10ng/mlTNF-α刺激BxPc3细胞CXCR1(0.68±0.056)和CXCR2(0.38±0.051)mRNA相对表达量下降(P<0.01),CF-PAC-1、PANC-1和Aspc-1细胞CXCR1和CXCR2表达未见明显改变(P>0.05)。结论 TNF-α通过促进CXCL8mRNA表达和分泌参与胰腺癌微环境的调节。
- 杨红邓卫平姚尧钱家鸣
- 关键词：胰腺癌肿瘤坏死因子-ΑCXCL8CXCR1CXCR2
- ARHI基因转染PANC1细胞后对细胞凋亡和自噬相关基因表达谱的影响
- 2013年
- 目的 观察ARHI基因转染PANC1细胞后对细胞凋亡和自噬相关基因mRNA表达谱的影响.方法 采用脂质体法将表达ARHI基因的质粒pIRES2-EGFP-ARHI、空质粒pIRES2-EGFP转染胰腺癌PANC1细胞.采用基因芯片RT2ProfilerTM PCR Array行实时定量PCR,分析转染细胞的基因表达谱,包括84个与凋亡和自噬相关基因.结果 ARHI基因转染组PANC1细胞有9个基因mRNA表达下调,38个基因mRNA表达上调,37个基因mRNA表达变化无意义.在与凋亡相关的基因中有8个促凋亡基因表达显著上调（＞6倍）,主要为TNFR/TRFSR家族基因（TNFSF8、TNFRSF10B、TNFRSF11B、TNFRSF9）、CIDE家族基因（DFFA）、CASP家族基因（CASP10、CASP8）和死亡结构域家族基因（DAPK1）,其中以DAPK1上调尤为明显,达42.83倍;抗凋亡基因中3个基因（CD27、BCL2L10、BIRC4）表达显著上调（＞6倍）,3个基因（BCL2、BAD、BAG4）表达轻度上调（＞2倍）,1个基因（BCL2L1）表达轻度下调（＜-2倍）.在与自噬相关的基因中3个促自噬基因（TNFRSF10B、DAPK1、CASP10）表达显著上调（＞6倍）,4个基因（TNFRSF10A、FADD、TP53、TP53 BP2）表达轻度上调（＞2倍）;3个抑制自噬基因（BCL2、CASP8、FAS）表达轻度上调（＞2倍）,1个基因（MCL1）表达轻度下调（＜-2倍）.结论 ARHI基因显著上调细胞凋亡及自噬重要调控基因Caspase-8和DAPK1.
- 杨红路新卿李骥朱永健丁辉王健胡益群邓卫萍钱家鸣
- 关键词：胰腺肿瘤细胞凋亡自噬ARHI
- ARHI基因与HuR蛋白在胰腺癌PANC-1细胞中的表达被引量：4
- 2017年
- 目的观察ARHI基因转染胰腺癌PANC-1细胞后对HuR蛋白的影响。方法采用脂质体法将表达ARHI基因的质粒p LNCX2-ARHI-EGFP和空载体p LNCX2-EGFP转染胰腺癌PANC-1细胞,细胞分为3组:实验组(p LNCX2-ARHIEGFP)、空载体转染组(p LNCX2-EGFP)和PANC-1细胞空白对照组,用G418筛选稳定转染的细胞株;采用PCR和Western blot方法检测ARHI基因表达,采用Western blot方法检测HuR蛋白表达。结果稳定转染ARHI基因组可检测到ARHI基因mRNA和蛋白的表达。根据图像灰度计算蛋白条带相对表达量,稳定转染ARHI基因组HuR蛋白表达(0.2226±0.0644)较空载体对照转染组(0.4063±0.0925,P=0.029)和PANC-1细胞空白对照组(0.4178±0.1319,P=0.022)显著降低。结论 ARHI基因可以导致胰腺癌细胞株中HuR蛋白表达降低。
- 杨红胡珊珊阮戈冲杨晓鸥钱家鸣
- 关键词：胰腺癌ARHI基因HUR
