国家自然科学基金(30960123)
- 作品数：12 被引量：31H指数：4
- 相关作者：齐晓岚官志忠任家谋张雪玲欧阳凯更多>>
- 相关机构：贵阳医学院贵阳医学院附属医院贵州盘江投资控股(集团)有限公司总医院更多>>
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- α7尼古丁受体基因抑制对SH-SY5Y细胞α-分泌酶水平的影响
- 2012年
- 目的采用RNA干扰技术抑制神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y细胞)中α7神经型尼古丁乙酰胆碱受体(Neuronal nicotinic acetylcholine receptor,nAChR)基因表达,了解对APP代谢中的关键酶α-分泌酶水平的影响。方法 SH-SY5Y细胞转染针对α7 nAChR的小干扰RNA(small interference RNA,siRNA),用Real-time PCR法和Western blotting法分别测定细胞中α7 nAChR、α-分泌酶(ADAM10)在mRNA和蛋白表达水平的变化。结果转染α7 nAChR siRNA后,与对照组相比,α7 nAChR mRNA及蛋白表达水平明显降低;ADAM10mRNA及蛋白表达水平分别减少了73%和66%。结论α7 nAChR基因表达抑制后α-分泌酶水平明显降低,这种改变可能与α7 nAChR基因表达抑制后β-淀粉样蛋白(Aβ)的产生增多有关,可能与阿尔茨海默病(AD)的发病有一定的关系。
- 王凡任家谋齐晓岚杨华官志忠
- 关键词：Α-分泌酶阿尔茨海默病
- 松果菊苷及异麦角甾苷对神经细胞尼古丁受体表达的影响被引量：2
- 2011年
- 目的研究肉苁蓉活性成分松果菊苷及异麦角甾苷对神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞神经型尼古丁受体表达的影响及其对抗β淀粉样蛋白(Aβ)神经毒性作用机制,以了解其神经保护作用机制。方法比色法测定细胞MTT还原率筛选松果菊苷及异麦角甾苷安全浓度范围,并用Aβ25-35处理细胞后,测定MTT还原率,蛋白质印迹法(Western blot)测定尼古丁受体α3、α7蛋白表达的变化。结果松果菊苷及异麦角甾苷能提高细胞α3及α7神经型尼古丁受体亚单位蛋白质表达水平,呈剂量依赖关系;并能对抗Aβ25-35引起的α3和α7受体亚单位蛋白质水平降低,减弱Aβ25-35引起的细胞损伤。结论松果菊苷及异麦角甾苷可能通过上调神经型尼古丁受体亚单位蛋白来发挥神经保护作用,在阿尔茨海默氏病的治疗中可能起到一定作用。
- 齐晓岚肖海涛肖雁郝小燕官志忠
- 关键词：松果菊苷尼古丁受体Β-淀粉样蛋白SH-SY5Y细胞
- 阿尔茨海默病中β淀粉样蛋白与MAPK信号通路的关系被引量：9
- 2011年
- β淀粉样蛋白（Aβ）与AD密切相关。细胞的生命活动与基因的表达及活化有密切的关系。在细胞中存在一些特殊的蛋白质信息传递链,它们将细胞外部的种种调节信号传递到核内基因,引起细胞生理活动的相应变化。这些蛋白质信息传递链被称为细胞信号转导通路。丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路是其中一条主要的基本信息传递链,它与细胞的生长、发育、分化、凋亡等均有密切联系〔1〕。
- 张雪玲齐晓岚单可人官志忠
- 关键词：阿尔茨海默病Β淀粉样蛋白MAPK信号通路
- 老年股骨颈骨折患者术后痴呆发病的影响因素分析被引量：5
- 2015年
- 目的探讨老年股骨颈骨折患者术后痴呆发病的影响因素分析,为该类患者术后痴呆发生的预防提供可参考依据。方法共纳入120例贵州盘江投资控股（集团）有限公司总医院骨科因股骨颈骨折行手术治疗的老年患者作为研究对象,所有患者术前均行临床痴呆评定量表（CDR）评价正常。详细记录患者基本信息,术后观察患者谵妄发生情况。随访1年再次进行CDR评分,根据结果分为痴呆组与非痴呆组,分析术后谵妄对患者术后痴呆发生的影响。结果 120例股骨颈骨折老年患者中,术后1周有40例（33.3%）患者发生谵妄,随访1年后有16例（40.0%）患者CDR评分0.5~3.0分;术后1周80例（66.7%）患者未发生谵妄,随访1年后有4例（5.0%）患者CDR评分大于0分,差异有统计学意义（P〈0.05）。单因素显示：年龄、性格内向、受教育程度小于6年、糖尿病史、发生谵妄及低密度脂蛋白（LDL-C）水平与股骨颈骨折老年患者术后发生痴呆存在密切的相关性,差异有统计学意义（P〈0.05）。多因素显示年龄大、糖尿病史及发生谵妄是股骨颈骨折老年患者术后痴呆发生的独立危险因素（P〈0.05）。ROC曲线发现：术后谵妄预测股骨颈骨折老年患者痴呆发生的AUC面积为0.878。结论高龄、糖尿病史及术后谵妄是无痴呆病史的老年股骨颈骨折患者术后痴呆发生的危险因素,且术后谵妄对痴呆发生有一定的预测价值。
- 胡国伦陈代全龚定华李学斌齐晓岚
- 关键词：谵妄股骨颈骨折痴呆
- SH-SY5Y神经细胞中α3尼古丁受体基因表达沉默对β分泌酶蛋白表达的影响被引量：1
- 2011年
- 目的研究α3神经型尼古丁受体(nAChR)基因沉默对β分泌酶(BACE)蛋白表达的影响。方法稳定转染α3 nAChR siRNA表达质粒及空质粒的SH-SY5Y神经细胞与正常对照组细胞用Real time-PCR和Western印迹法检测α3 nAChR mRNA表达和蛋白水平表达,以评价RNA的干扰效率;用蛋白质印迹方法分别检测细胞中β分泌酶两个亚型(BACE1和BACE2)蛋白表达水平的变化。结果稳定转染α3 nAChR siRNA表达质粒的细胞克隆株,与空质粒和正常对照组相比BACE1蛋白表达水平增加,BACE2蛋白表达水平减少。结论α3 nAChR可以通过增加BACE2蛋白表达水平及减少BACE1蛋白表达水平,影响Aβ生成从而减少Aβ的神经毒性作用,发挥神经保护作用。
- 张雪玲齐晓岚单可人官志忠
- 关键词：Β分泌酶Β淀粉样蛋白SH-SY5Y神经细胞
- α7尼古丁受体mRNA表达抑制对SH-SY5Y细胞氧化应激水平的影响被引量：1
- 2012年
- 目的探讨通过RNA干扰技术抑制神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y细胞)中α7尼古丁乙酰胆碱受体(nAChR)基因表达后细胞氧化应激水平的变化,以了解该受体的神经保护作用。方法 SH-SY5Y细胞转染针对α7 nAChR的小分子干扰RNA,Real-time PCR法检测转染细胞中α7 nAChR mRNA水平蛋白质印迹方法检测蛋白表达水平;并用Aβ1～42处理培养细胞,比色法测定细胞脂质过氧化产物水平、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性。结果转染siRNA后,α7 nAChR mRNA水平和蛋白表达水平分别降低了81.7%和76.9%;细胞脂质过氧化水平升高38.4%;SOD和GSH-PX活性分别降低30.3%和21.1%。用Aβ1～42处理细胞后氧化应激水平升高,且转染siRNA后能增强Aβ的神经毒性作用。结论α7 nAChR基因表达抑制后能增强细胞氧化应激水平,同时增强Aβ的神经毒性作用。
- 欧阳凯齐晓岚官志忠
- 关键词：RNA干扰氧化应激SH-SY5Y细胞
- γ-分泌酶在阿尔茨海默病发病中的作用及与神经型尼古丁受体关系被引量：3
- 2014年
- 阿尔茨海默病(AD)是一种最常见的人类中枢神经系统的退行性病变,临床上将其定义为进行性认知功能的丧失和从中年期到晚年期缓慢发生的进行性记忆损伤〔1〕。病理学上以细胞外老年斑(SPs)形成及神经细胞内神经元纤维缠结(NFTs)为主要特征〔2〕,还伴有颗粒空泡变性(GD)、平野小体(HB)、神经元减少等〔3〕。本文就AD的发病机制及研究现状、γ-分泌酶在AD发病中的作用。
- 任家谋齐晓岚官志忠
- 关键词：Γ分泌酶阿尔茨海默病
- α7尼古丁受体基因抑制对SH—SY5Y细胞β淀粉样蛋白生成的影响
- 2012年
- 目的通过RNA干扰技术抑制神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y细胞）中胡神经型尼古丁乙酰胆碱受体（nAChR）的基因表达，以了解α7nAChR对β淀粉样蛋白（AB）的影响，进一步探讨阿尔茨海默病的发病机制。方法SH-SY5Y细胞转染α7nAChR的小干扰RNA（siRNA），用real-timePCR法和蛋白免疫印迹法分别测定细胞中α7nAChR、β分泌酶两个亚型（BACE1和BACE2）在mRNA和蛋白表达水平的变化；用双抗体夹心酶联免疫吸附法测定Aβ1-42含量的变化。结果转染α7nAChRsiRNA后，与对照组相比，α7nAChRmRNA及蛋白表达水平分别降低了84％和79％（P〈0．01）；BACElmRNA及蛋白表达水平分别升高了527％和71％（P〈0．01）；BACE2mRNA及蛋白表达水平分别降低了58％和75％（P〈0．01）；Aβ1-42含量升高了208％（P〈0．01）。结论α7nAChR基因表达抑制后Aβ含量明显升高，其机制可能与BACE1表达上升和BACE2表达抑制有关，这种改变可能与阿尔茨海默病的发病有一定的关系。
- 欧阳凯齐晓岚官志忠
- 关键词：阿尔茨海默病淀粉样Β蛋白前体受体胆碱能
- SH-SY5Y神经细胞中α3神经型尼古丁受体对细胞凋亡及p38MAPK信号通路的影响被引量：4
- 2013年
- 目的研究人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞中α3神经型尼古丁受体（nAChR）对细胞凋亡及凋亡相关信号通路p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）的影响，了解α3 nAChR在老年性痴呆发病中的作用机制。方法将细胞分为稳定转染α3 nAChR siRNA表达质粒组、空质粒组及正常对照组，用real-time PCR和Western blot法检测α3 nAChR mRNA水平和蛋白水平的表达，以评价RNA的干扰效率；real-time PCR方法检测凋亡相关蛋白bax及bcl-2 mRNA水平。将3组细胞用10μmol／Lβ淀粉样蛋825-35（Aβ25-35）处理48h，进一步用流式细胞术检测细胞凋亡率；用Western blot迹方法检测细胞中p-p38及p38蛋白表达水平的变化。将3组细胞用p38通路阻断剂阻断信号转导后再用Aβ25-35处理，测定细胞凋亡率。结果稳定转染cdnAChR siRNA表达质粒的细胞克隆株，od nAChR mRNA及蛋白表达水平分别降低了95％和86％；与空质粒和正常对照组相比，凋亡相关蛋白bax mRNA水平增加2．11倍（P〈0．01），bcl-2 mRNA水平下降0．53倍（P〈0．01），凋亡率未发生变化（3．40％4-0．20％），但能增加Aβ诱导的细胞凋亡（24．52％±1．59％）；与Aβ处理SH-SY5Y细胞组相比，Aβ引起α3 nAChR沉默细胞p-p38蛋白表达水平增加178％（P〈0．01）；在加入p38特异性阻断剂后加入Aβ，与未加阻断剂时相比，3组细胞凋亡率均减少（P〈0．01），其中α3 nAChR沉默细胞组最明显。结论α3 nAChR沉默可能通过增强凋亡相关信号通路p38MAPK从而增加Aβ25-35的致凋亡作用；α3 nAChR沉默可以通过增加促凋亡相关蛋白bax，减少抗凋亡相关蛋白bcl-2从而增加Aβ25-35的致凋亡作用。
- 张雪玲齐晓岚任家谋吴昌学官志忠
- 关键词：神经母细胞瘤细胞凋亡P38丝裂原活化蛋白激酶类淀粉样蛋白细胞
- 神经型尼古丁乙酰胆碱受体在阿尔茨海默病中的神经保护作用被引量：4
- 2012年
- 老年性痴呆主要分为三种：一种叫阿尔茨海默病（AD）,其最为常见,大约占68%;第二种叫血管性痴呆（VD）,是一种由于血供不足引起的不同大脑区域损伤所致的渐进性认知障碍;第三种是以上两种病症并存,叫混合性痴呆。
- 欧阳凯齐晓岚官志忠
- 关键词：阿尔茨海默病
