国家自然科学基金(30672127)
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
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- 阻断可诱导共刺激分子刺激通路抑制大鼠异体肢体移植急性排斥反应的实验观察
- 2008年
- 目的通过RNA干扰并阻断可诱导共刺激分子（ICOS）刺激通路，观察对大鼠异体肢体移植急性排斥反应的抑制作用。方法成年Wistar、SD大鼠各27只，按体质量将大鼠随机分为排斥组、对照组、干扰组．每组9例。大鼠肢体移植采用改良法，将Wistar大鼠（供体）右下肢体移植到SD大鼠（受体）左下肢体上。移植术后排斥组不给予特殊处置；对照组阴茎背静脉注射梭华-Sofast—pSilencer 4．1空载体复合物：干扰组注射梭华-Sofast—pSilencer 4．1-ICOSshRNA干扰质粒复合物。术后8d每组处死SD大鼠3只．取移植肢体皮肤、肌肉及骨骼进行病理学检查；流式细胞仪及RT—PCR检测淋巴细胞表面ICOS和基因mRNA表达：分别用Wistar、Lewis大鼠脾细胞刺激，进行单向混合淋巴细胞培养，计算细胞刺激指数：ELISA双抗体夹心法检测大鼠血清细胞因子γ干扰素（IFN-γ）和白细胞介素4（IL-4）；另6只大鼠观察生存情况及肢体存活时间。结果排斥组大鼠肢体平均存活时间（11．34±1．21）d，对照组平均存活时间（11．14±1．32）d，干扰组平均存活时间（16．85±1．73）d，组间比较差异有统计学意义（F=8．72，P〈0．05）。排斥组和对照组病理学结果提示，肢体出现了中、重度急性排斥反应，干扰组急性排斥反应轻微。光镜下排斥组和对照组皮肤出现表皮坏死、大泡形成伴有血管周围炎及大量淋巴细胞浸润，肌肉组织有弥散性淋巴细胞浸润，间质水肿同时伴有肌细胞坏死。脾淋巴细胞ICOS基因mRNA表达显示，干扰组（18．75％）明显低于排斥组（100％）和对照组（98．51％），组间比较差异有统计学意义（Х^2=13．57，P〈0．01）。淋巴细胞表面ICOS表达荧光强度，干扰组为45．59±12．87，排斥组为103．72±21．76．对照组为93．47±29．55，组间比较差异有统计学意义（F=6．89，P〈0．05）。单向混合淋�
- 陆晓峰毕郑钢杨卫良张风民刘伟邵明朱启亮
- 关键词：RNA干扰移植物排斥共刺激通路
- 可诱导共刺激分子基因表达抑制降低大鼠T淋巴细胞活化增殖能力的研究
- 2008年
- 目的RNAi抑制大鼠T淋巴细胞可诱导共刺激分子（ICOS）基因表达，观察其对T淋巴细胞功能的影响。方法选择4个干扰位点，插入pSilencer4．1-CMV neo载体，转染大鼠淋巴细胞。RT-PCR检测ICOS基因的抑制程度，流式检测ICOS表达变化。MLR检测细胞的增殖能力，ELISA法检测细胞因子IFN-γ和IL4分泌水平。结果转染后，T淋巴细胞ICOS的mRNA和ICOS分子表达水平下降（P〈0.05），淋巴细胞增殖能力明显降低，同时IFN-γ和IL4的水平也减低。结论大鼠淋巴细胞ICOS基因的表达抑制，降低了T淋巴细胞活化增殖能力。
- 刘伟毕郑钢陆晓峰张震宇张世谦辛伟光薄超钢
- 关键词：T淋巴细胞RNA干扰可诱导共刺激分子
- 昆明山海棠抑制大鼠同种异体肢体移植排斥反应的研究被引量：2
- 2019年
- 目的探讨昆明山海棠对大鼠同种异体肢体移植抗排斥反应的影响。方法 9只Wistar大鼠为供者,18只SD大鼠为受者,通过手术方法建立同种异体肢体移植动物模型后随机分为观察组和对照组各9只。对照组大鼠采用生理盐水10 mL/(kg·d)灌胃,1次/d;观察组大鼠给予昆明山海棠片400 mg/(kg·d)+生理盐水2 mL灌胃,1次/d。观察术后2组移植肢体发生排斥反应的时间、存活时间,并行移植肢体组织病理学检查;采用TUNEL法检测2组移植组织的凋亡情况,并计算凋亡指数;应用流式细胞仪检测2组大鼠外周血T淋巴细胞亚群CD4^+、CD8^+细胞及CD4^+/CD8^+比值。结果对照组移植肢体发生排斥反应时间[(4.83±1.80)d]早于观察组[(8.38±1.19)d](P<0.05),移植肢体存活时间[(9.38±2.23)d]短于观察组[(13.94±1.48)d](P<0.05),移植肢体细胞凋亡指数(33.83±3.38)和排斥反应分级(2.33±0.57)高于观察组(25.33±5.65、0.66±0.57)(P<0.05);术后第7天,对照组外周血CD4^+细胞百分率[(49.95±7.14)%]及CD4^+/CD8^+比值(2.19±0.31)均高于观察组[(22.96±5.97)%、0.93±0.24](P<0.05)。结论昆明山海棠可减轻同种异体肢体移植动物模型发生排斥反应,可作为肢体移植术后的一种新型抗排斥反应的免疫抑制剂或辅助药物。
- 陈祝锋张震宇
- 关键词：肢体移植昆明山海棠急性排斥反应
