国家自然科学基金(30330540)
- 作品数：50 被引量：302H指数：9
- 相关作者：张学光朱一蓓陈永井张光波王翎更多>>
- 相关机构：苏州大学苏州大学附属第三医院无锡市第一人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 一株新的鼠抗人2IgB7-H3功能性单克隆抗体的研制及其生物学特性的鉴定被引量：4
- 2006年
- 研制功能性鼠抗人2IgB7-H3单克隆抗体。以人2IgB7-H3基因转染细胞1．929／2IGB7-H3为免疫原，常规免疫6～8周龄的雌性BALB／c小鼠；利用B淋巴杂交瘤技术，将免疫小鼠脾脏细胞和骨髓瘤细胞株SP2／0融合，1．929／2IGB7-H3细胞为抗原筛选阳性细胞；经间接免疫荧光标记法对杂交瘤细胞进行反复筛选和多次克隆化培养；采用快速定性试纸法鉴定单抗Ig亚类；利用竞争抑制性实验分析该单抗识别的抗原表位；采用MTT法分析该单抗在体外阻断DC对T细胞的促增殖效应。结果：获得了1株持续稳定分泌鼠抗人2IgB7-H3单克隆抗体的杂交瘤细胞株（命名为7D7），该单抗可特异识别1．929／2IGB7-H3分子和介导有效的共刺激信号。该单抗的成功获得和其生物学特性的初步鉴定，为进一步研究B7-H3两个异构体在DC细胞及肿瘤细胞上的作用机制奠定了物质基础。
- 饶爱华周迎会陈永井马震宇张学光
- 关键词：单克隆抗体共刺激信号杂交瘤细胞株
- 可溶性CD40在肝病患者血清中的表达及其临床意义被引量：4
- 2006年
- 目的:研究可溶性CD40(solubleCD40,sCD40)在急性肝炎、重型肝炎和原发性肝癌患者血清中的表达,探讨其与生化指标和疾病预后的关系。方法:使用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测急性肝炎(49例)、重型肝炎(22例)和原发性肝癌(13例)患者入院次日清晨空腹血清标本和健康体检者(44例)血清标本中sCD40浓度,分析其与急性肝炎患者丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的关系,并初步探讨sCD40水平与重型肝炎患者疾病预后的关系。流式细胞术检测患者血清sCD40与CD40配体(CD40L)的结合活性。结果:三种肝脏疾病患者血清中sCD40水平(149.70±86.82)pg/mL较健康对照组(47.33±27.49)pg/mL显著升高(P<0.001),但各组患者之间无统计学意义(P=0.475)。重型肝炎死亡患者血清sCD40浓度较存活患者显著升高(P<0.05)。急性肝炎患者血清sCD40浓度与ALT、AST水平呈显著正相关(r=0.50,P<0.001;r=0.47,P<0.01)。体外实验显示患者血清sCD40具有与CD40L结合的活性。结论:肝脏疾病患者血清异常高表达sCD40,这是评价急性肝细胞损伤的辅助指标,有助于判断重型肝炎患者的病情和预后。CD40-CD40L作用可能参与了肝细胞损伤和免疫失调的病理过程。
- 刘慧戚春建庄羽美甘建和李惠玲殷昌硕张学光
- 关键词：急性肝炎重型肝炎原发性肝癌
- 4-1BB／4-1BBL介导DC和T细胞共刺激作用的研究进展被引量：1
- 2006年
- 4-1BB(CD137)和4-1BB配体(4-1BBL)属于肿瘤坏死因子／肿瘤坏死因子受体(TNF／TNFR)超家族成员,在树突状细胞(DC)及部分T细胞上表达。4-1BB和4-1BBL相互作用,通过一系列信号转导,激发未成熟DC的分化成熟,并且通过 TRAF2和MAPK途径,使未成熟DC介导初始型T细胞活化进而向Th1型细胞转化,从而产生有效的记忆性CTL和效应性 CTL。深入探讨4-1BB和4-1BBL的作用机制,可能为肿瘤等疾病的治疗提供新思路。
- 夏瑜朱一蓓张学光
- 关键词：4-1BB/4-1BBLDCT细胞
- 髓系细胞触发受体-1研究进展被引量：2
- 2014年
- 髓系细胞表达的触发受体1(triggering receptor expressed on myeloid cells-1,TREM-1)是主要表达于巨噬细胞、中性细胞等的表面受体蛋白,它属于免疫球蛋白超家族的成员,主要由赖氨酸残基的跨膜结构域、V型Ig样胞外结构域和缺乏信号基序的胞浆结构域等三个部分组成。TREM-1分子在感染性疾病中发挥重要作用,通过其和细胞外受体蛋白DAP-12结合,引起下游信号通路活化,导致多种炎症介质的分泌,具有预激和诱导炎症反应的作用,对感染性疾病的诊断起到重要作用。但最近研究显示TREM-1不仅在感染性组织中表达增高,在非感染性炎症、结缔组织及肿瘤组织中也有增高表现,本文就TREM-1最新研究进展做一综述。
- 汪学翠刘红梅陈思文付婷王翎
- 关键词：炎症反应肿瘤预后
- 鼠抗人4-1BB单克隆抗体的研制及其生物学特性的鉴定
- 2011年
- 目的:鼠抗人4-1BB分子功能性单克隆抗体(mAb)的研制及其生物学特性的鉴定。方法:以高表达人4-1BB分子的转基因细胞293T/4-1BB为免疫原,常规免疫BALB/c小鼠,采用B淋巴细胞杂交瘤技术进行细胞融合,并以293T/4-1BB为阳性抗体筛选细胞,293T/mock为阴性抗体筛选细胞,经免疫荧光标记和流式细胞术(FCM)分析、反复筛选和多次克隆化培养,筛选出特异分泌鼠抗人4-1BB分子mAb的杂交瘤细胞株;采用W estern b lot、间接免疫荧光法、竞争结合抑制试验、3H掺入和细胞凋亡分析等方法对mAb进行生物学特性的鉴定。结果:成功获得3株持续、稳定分泌鼠抗人4-1BB mAb的杂交瘤细胞株,命名为1G5、4B11和9F11。对mAb的生物学功能的研究结果表明,3株mAb均能识别活化T细胞和单核细胞来源的树突状细胞(Mo-DC)表达的4-1BB分子。mAb 4B11能有效地激发T细胞体外增殖、抑制其凋亡,并能促进Mo-DC体外扩增,上调CD80、CD83、CD86和CD1α的表达。结论:获得的3株分泌鼠抗人4-1BB mAb的杂交瘤,所分泌的抗体具有特异性地识别人4-1BB分子;其中4B11 mAb具有激发T细胞增殖及促进Mo-DC体外扩增与成熟的作用,为激发型4-1BB mAb。
- 周桓张光波董秋明於葛华徐颖张学光
- 关键词：4-1BB杂交瘤共刺激信号单克隆抗体
- 两步串联层析法纯化鼠抗人CD80单克隆抗体4E5被引量：1
- 2006年
- 采用阴离子交换与凝胶过滤两步串联层析法，纯化了小鼠腹水来源的CD80阻断型单克隆抗体4E5。腹水样品经离心、过滤预处理后，在Tris-HCl缓冲溶液（pH8．0，50mmol／L）条件下，上阴离子交换柱对目的单抗进行捕集，采用0-0．5mol／L NaCl浓度分步洗脱；含目的单抗的洗脱馏分再上凝胶过滤柱纯化，用PB缓冲溶液（pH7．2，20mmol／L）洗脱，获得目的单抗4E5，其生物学活性高、纯度大于95％，抗体总回收率达61％。
- 马泓冰邱玉华陶然李文香徐颖张学光
- 关键词：单克隆抗体腹水纯化
- 抗增殖蛋白抗肿瘤及抗衰老的研究进展被引量：6
- 2010年
- 祝丽晶潘旭东王翎
- 关键词：PROHIBITIN肿瘤衰老免疫发病机制
- 老年重症肺部感染患者血清降钙素原水平测定的临床意义被引量：58
- 2010年
- 目的探讨血清降钙素原在老年重症肺部感染患者中的临床意义。方法收集47例重症肺部感染患者(重症组)、30例非重症肺部感染患者(非重症组)、30例除外感染性疾病的患者(非感染组)、30例体检健康者(健康组),分别测定各组血清降钙素原、超敏C反应蛋白、白细胞计数及体温,并进行比较分析。结果重症组的血清降钙素原浓度与非重症组、非感染组及健康组比较差异均有统计学意义(P<0.05);而重症组的超敏C反应蛋白、白细胞计数及体温与非重症组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论血清降钙素原与老年肺部感染的严重程度密切相关,血清降钙素原可作为预测和识别老年人重症肺部感染的辅助诊断指标。
- 常婷婷王翎潘旭东李洁毛燕青祝丽晶
- 关键词：老年人重症肺部感染血清降钙素原
- 可溶性PD-1酶联检测试剂盒的研制及其应用被引量：3
- 2008年
- 目的:建立人的可溶性PD-1(sPD-1)酶标检测试剂盒并探讨其检测的临床意义。方法:在已成功获得两株识别位点不同的鼠抗人PD-1分子单克隆抗体(1F2和5F10)的基础上,采用该室制备的鼠抗人PD-1分子单克隆抗体(1F2)作为包被抗体,应用本室制备的单抗5F10经生物素(biotin)标记后作为检测抗体,建立双单抗夹心的人sPD-1酶标检测方法,并对健康供血员、甲亢、血液病患者的血清中sPD-1的含量进行了检测。结果:成功研制了人sPD-1酶联检测试剂盒,其灵敏度为200.00pg/ml。该试剂盒4℃放置1个月,离散度(CV%)<±5.17,回收率为95%～115%,提示该检测试剂盒具有良好的灵敏度、稳定性和准确性。用该试剂盒测得血清中sPD-1的正常值为1.103±0.240ng/ml,再生障碍性贫血患者血清中sPD-1的含量明显高于正常对照组,而甲亢和器官移植病人血清中sPD-1的含量和正常值相比没有显著差异(P<0.05)。结论:成功研制了检测人sPD-1酶标检测试剂盒,并首次发现再生障碍性贫血患者血清中sPD-1的含量较高,该试剂盒在临床病人sPD-1的检测中具有潜在的应有价值。
- 吴海竞陈永井苗瞄张光波胡玉敏明志君张学光
- 转染人CXCR4细胞株的构建及其生物学功能的研究被引量：1
- 2006年
- 目的:构建稳定表达人CXCR4基因的L929细胞株,分析CXCR4分子对转基因细胞迁移能力的影响。方法:TRIzol一步法抽提人外周血单个核细胞(PBMC)总RNA,RT-PCR扩增出CXCR4基因,双酶切装入逆转录病毒载体pEGZ-Term,与辅助病毒载体用脂质体法共转染包装细胞293T,用其培养上清感染L929细胞72h后,经Zeocin筛选出稳定表达CXCR4分子的L929细胞株;利用微孔隔离小室检测转人CXCR4基因的L929细胞在SDF-1α作用下的迁移能力。结果:构建含CXCR4基因的重组逆转录病毒载体,经转染包装细胞293T后,筛选获得能稳定高表达人CXCR4蛋白的L929转基因细胞,转入人CXCR4基因的L929细胞在SDF-1α作用下介导迁移。结论:成功构建转染人CXCR4细胞株,为肿瘤迁移模型的研究和鼠抗人CXCR4mAb的制备打下基础。
- 周时勇杨明峰王雪峰于葛华成中芹张学光
- 关键词：CXCR4逆转录病毒迁移
