陕西省卫生厅科学研究基金(D-04028)
- 作品数：2 被引量：10H指数：1
- 相关作者：高玉任吴超王璇李冬民宋天保更多>>
- 相关机构：西安交通大学西安交通大学医学院第二附属医院更多>>
- 发文基金：陕西省自然科学基金陕西省卫生厅科学研究基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 利用TRIzol 试剂和液氮提取大鼠胰腺高质量总RNA被引量：10
- 2009年
- 目的建立胰腺高质量总RNA快速、经济、稳定的提取方法。方法应用TRIzol试剂和液氮提取大鼠胰腺总RNA,通过总RNA含量和A260/280比值的测定及10 g/L非变性琼脂糖凝胶电泳评估总RNA的质量,并用RT-PCR检测大鼠胰岛素1、胰高血糖素、胰α-淀粉酶和β-actin的表达。结果利用TRIzol和液氮提取的大鼠胰腺总RNA量可达到3～6μg/mg胰腺组织,A260/280比值在1.75～1.89之间。在10 g/L非变性琼脂糖凝胶电泳时,均可见28S及18S条带,并且在28S、18S条带间可见明显的云雾状阴影。大鼠胰岛素1、胰高血糖素、胰α-淀粉酶、β-actin RT-PCR产物电泳结果显示均有清晰的条带。结论应用TRIzol试剂和液氮成功地提取了大鼠胰腺高质量的总RNA,后者可用于RT-PCR研究。
- 李冬民任吴超王璇王飞苗高玉韩燕宁启兰宋天保吕社民
- 关键词：大鼠胰腺总RNA提取液氮
- 大鼠肝脏干细胞的胰十二指肠同源盒基因表达系的构建与初步鉴定
- 2009年
- 目的建立大鼠肝脏干细胞的Pdx-1基因表达系。方法逆行穿刺SD大鼠乳鼠肝脏门静脉,经胶原酶Ⅳ消化并分离肝脏干细胞;免疫组织化学鉴定大鼠肝脏干细胞标志物细胞角蛋白18/19、甲胎蛋白的表达;构建pEGFP-Pdx-1表达载体并酶切鉴定,用脂质体2000介导表达载体转染大鼠肝脏干细胞后,荧光显微镜观察GFP表达,免疫组织化学鉴定Pdx-1的表达。结果肝脏门静脉逆行穿刺分离培养大鼠肝脏干细胞具有分裂增殖能力、角蛋白18/19、甲胎蛋白表达阳性;pEGFP-Pdx-1表达载体转染后的肝脏干细胞可表达绿色荧光蛋白报告基因和Pdx-1蛋白。结论成功建立了大鼠肝脏干细胞Pdx-1表达系。
- 任吴超李冬民王璇高玉韩燕宁启兰张富军宋天保吕社民
- 关键词：肝脏干细胞
