山东省医药卫生科研项目(CAIDBA3)
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
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- 反义端粒酶RNA基因对裸鼠肝癌移植瘤的抑制作用被引量：2
- 2009年
- 目的:研究反义人端粒酶RNA基因(human telomerase RNA,hTR)在裸鼠体内对肝癌移植瘤的抑制作用。方法:BALB/c裸鼠前肢腋窝皮下注射HepG2肝癌细胞构建移植瘤模型,以携反义hTR逆转录病毒质粒PLXSN-hTR-BamHⅠ瘤体内注射治疗(每次0.2 ml,共5次),以注射正义hTR逆转录病毒质粒PLXSN-hTR-EcoRⅠ和生理盐水为对照,测量肿瘤体积,计算抑瘤率;H-E染色观察瘤组织病理变化;TUNEL法检测肿瘤组织细胞的凋亡。结果:反义hTR治疗组肿瘤生长较正义hTR治疗组及生理盐水组明显减慢,反义hTR组抑瘤率为26.78%,明显高于正义hTR组的1.93%(P<0.01)。反义hTR治疗组较正义hTR治疗组及生理盐水组瘤组织坏死面积、肿瘤细胞凋亡率均明显增加(均P<0.01)。结论:反义hTR在裸鼠体内能够显著抑制肝癌移植瘤的生长,促进肿瘤细胞的凋亡。
- 裴庆山刘吉勇孙欣欣
- 关键词：肝癌移植瘤增殖凋亡
- 两种重组逆转录病毒浓缩方法的比较被引量：1
- 2006年
- 目的比较传统逆转录病毒浓缩方法(差速离心)与简便方法浓缩逆转录病毒效率的差异。方法选择含有新霉素磷酸转移酶(NeoR)的重组逆转录病毒载体,通过包装细胞得到含有重组逆转录病毒粒子、有感染力的病毒溶液,分别采用差速离心和简便方法对该病毒溶液进行浓缩,将浓缩前后的病毒溶液体外感染靶细胞NIH3T3并测定其滴度,计算浓缩效率。结果简便方法与传统差速离心方法浓缩病毒上清效率分别为36.54%,38.46%,二者比较无差异(P>0.05)。结论简便方法浓缩逆转录病毒对设备要求较低,许多小实验室可推广应用。
- 马进财刘吉勇刘绍玲
- 关键词：重组逆转录病毒病毒粒子
- 反义端粒酶RNA基因对肝癌细胞的抑制作用被引量：3
- 2007年
- 目的:研究逆转录病毒载体介导的反义端粒酶RNA基因对肝癌细胞的抑制作用,探讨通过抑制端粒酶活性治疗肝细胞癌的有效途径。方法:采用电穿孔法将携带正反义端粒酶RNA基因的逆转录病毒载体导入PT67包装细胞,G418筛选获得稳定产病毒细胞株,收集逆转录病毒上清并感染人肝癌HepG2细胞,G418筛选获得稳定转染细胞克隆并扩增培养,经PCR鉴定后,通过MTT法分别检测转染正反义端粒酶RNA基因组肝癌细胞(HepG2-hTR-EcoRⅠ和HepG2-hTR-BamHⅠ)以及未转染端粒酶RNA基因组细胞(HepG2)的生长,免疫荧光化学检测肝癌细胞增殖,TRAP-PCR-ELISA法检测细胞的端粒酶活性,流式细胞术检测各组细胞所处的细胞周期及凋亡率。结果:基因转染后经PCR扩增可于约500bp处检测到目的基因的表达。转染反义端粒酶RNA基因的HepG2-hTR-BamHⅠ组细胞生长受到明显抑制;抗中性粒细胞核增殖抗原(PCNA)表达减少;实验组端粒酶活性为(2.31±0.16),较HepG2-hTR-EcoRⅠ组(3.24±0.20)及HepG2组细胞(3.22±0.17)明显下降(P<0.01);流式细胞术检测显示实验组细胞的凋亡率为(9.58±1.38)%,与对照组相比差别具有显著性(P<0.01);实验组细胞出现G2/M期阻滞。结论:端粒酶RNA是端粒酶活性表达的一个重要组成部分,通过反义技术下调其表达能够抑制肝癌细胞生长增殖,并诱导其凋亡。
- 赵淑磊刘吉勇马进财刘娜
- 关键词：端粒酶逆转录病毒载体反义RNA
