广西省自然科学基金(0322025-20428005-12)
- 作品数：3 被引量：15H指数：2
- 相关作者：农炳金覃健张志勇韦霄何敏更多>>
- 相关机构：广西医科大学广西壮族自治区疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：广西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 应用血清分离试剂盒纯化血清标志蛋白的研究
- 2008年
- 目的:研究采用血清分离试剂盒初步分离血清标志蛋白的效果。方法:应用血清分离试剂盒对血清中标志蛋白进行梯度pH洗脱,根据目的蛋白的洗脱条件,选择适合的缓冲液进行离子交换层析分离。结果:WCX-2和IMAC-3-Cu芯片检测结果显示,血清经血清分离试剂盒梯度pH洗脱后可得到初步分离,各组分中的蛋白数量都比原血清明显减少。其中在第3、4组分分别检测到目的蛋白M7789.8和M4300.80。选择缓冲液(20 mmolNaAc,pH4.0)进行离子交换层析,成功分离到目的蛋白M7789.8和M4300.80。结论:应用血清分离试剂盒不仅可以对血清进行初步分离,还能了解到目的蛋白表面一些氨基酸的基本构成和等电点范围,为后续进一步分离纯化目的蛋白提供参考。
- 韦霄张志勇何敏蒋智华农炳金覃健刘伟
- 关键词：蛋白质梯度洗脱离子交换层析蛋白质芯片
- 人血清中小分子蛋白质分离电泳方法改进被引量：12
- 2007年
- 目的建立一种灵敏易行分离分子量<10000 Da低丰度蛋白质的电泳方法。方法用Hitrap Blue层析柱去除血清中白蛋白,用U9对血清样品进行变性处理,采用改进后的方法(0.1%甲醇,0.5%三氯乙酸,0.1%考马斯亮蓝G250)进行染色。结果经去除血清中的白蛋白、对样品进行变性处理及改进染色方法后,分辨率和灵敏度明显提高,可有效分离10000 Da以下的小分子蛋白质。结论改进后的电泳方法,不仅简便灵敏,而且还有利于蛋白质的洗脱回收。
- 韦霄何敏农炳金蒋智华覃健张志勇
- 关键词：聚丙烯酰胺凝胶电泳蛋白质
- 人血清中小分子蛋白质的电洗脱回收被引量：4
- 2007年
- [目的]建立一种快速简便的回收分子量﹤10000 Da低丰度蛋白质的电洗脱方法。[方法]采用改进后的聚丙烯酰胺凝胶电泳和电洗脱方法分离纯化小分子标志蛋白,利用SELDI技术检测回收后的标志蛋白。[结果]SELDI技术检测发现,改进后的电泳和电洗脱方法能有效分离并回收10000 Da以下的低丰度蛋白质。[结论]改进后的电洗脱方法,不仅快速简便,而且还有利于蛋白质的后续鉴定。
- 韦霄何敏蒋智华农炳金覃健张志勇
- 关键词：蛋白质纯化电洗脱SELDI
