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低氧诱导因子-1α在绝经后骨质疏松中调控作用的实验研究被引量：9: 2007年; 目的探讨在绝经后骨质疏松的发生、发展过程中,低氧诱导因子-lα(HIF-1α)对于成骨细胞功能的调控作用。方法 2004年10月至2006年5月,应用 Cre-Loxp 重组酶技术,建立成骨细胞条件性敲除 HIF-1α小鼠,取3个月龄雌性野生型和敲除型小鼠各24只行卵巢切除术,术后0、4、8周取材行 HE 染色、四环素荧光双标记、Micro-CT、RT-PCR、Western-blotting 检测。结果与野生型小鼠相比,敲除型小鼠骨小梁的数目、体积、厚度,骨密度,骨矿沉积速度,血管内皮生长因子(VEGF)、RunX2、ALP、OC 基因在 mRNA 水平的表达,VEGF、RunX2在蛋白水平的表达均明显降低,尤其以术后8周最为明显。结论在绝经后骨质疏松的发生、发展过程中,成骨细胞条件性敲除 HIF-1α后成骨功能降低,HIF-1α能够调控成骨细胞的成骨功能。; 刘晓东邓廉夫王君齐进周琦王晋申魏立朱雅萍Clemens TL; 关键词：骨质疏松绝经后成骨细胞低氧诱导因子-1Α

Smads在骨形态发生蛋白诱导成骨中的作用被引量：1: 2007年; Smads蛋白是骨形态发生蛋白细胞内信号传导中起重要作用的转录因子,在骨形态发生蛋白诱导骨形成中发挥着关键作用。骨形态发生蛋白可以激活多种Smads蛋白并使其转移至细胞核,通过直接与特定DNA序列相结合、与核调节因子形成复合体、募集转录共活化或共抑制因子等3种方式调节目的基因的转录,最终诱导骨形成。该文就Smads蛋白的定义与分类、Smads信号转导通路及其在骨形态发生蛋白诱导成骨中的作用机制、BMP/Smads信号调节通路与其他通路之间的关系等相关研究作一综述。; 蔡明邓廉夫; 关键词：骨形态发生蛋白 SMADS蛋白骨诱导骨形成

小鼠未成熟关节透明软骨细胞的培养与生物学特征研究: 2007年; 目的建立小鼠未成熟关节透明软骨细胞分离、培养的方法,探讨低氧环境对软骨细胞活性及糖代谢的影响。方法机械分离与酶消化相结合,分离、纯化小鼠未成熟关节软骨细胞。分别于低氧(O2体积百分比为2%)和常氧(O2体积百分比21%)条件下培养,应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞活性;RT-PCR检测细胞葡萄糖转运体-1,3及磷酸果糖激酶mRNA的表达;葡萄糖氧化酶方法测定细胞对葡萄糖的摄取量。结果Ⅱ型胶原免疫组化和阿利辛蓝染色证实获得细胞为透明软骨细胞。低氧培养环境可提升细胞的增殖能力,诱导细胞表达低氧诱导因子-1α;伴随低氧诱导因子-1α的表达及其表达量的提高,葡萄糖转运体-1,3和磷酸果糖激酶的表达水平升高,细胞对葡萄糖的摄取量增加。结论所建立的分离、培养方法可以获得高纯度的透明软骨细胞;软骨细胞可通过氧感应机制以适应低氧环境而调整其代谢和生存状态。; 任步方邓廉夫王君朱雅萍魏立周琦; 关键词：软骨细胞细胞低氧

低氧诱导因子-1α在骨形成过程中对成骨细胞功能的调控被引量：11: 2007年; 目的探讨低氧诱导因子(HIF)-1α对成骨细胞功能的调控及其在骨形成过程中的作用。方法应用 Cre-Loxp 重组酶技术,在体内外条件性敲除成骨细胞中的 HIF-1α基因及其上游调控 VHL 基因,在体外将成骨细胞在2%氧浓度培养48 h 后检测血管内皮生长因子(VEGF)、核结合因子 al(RunX2)、碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(OC)的表达,在体内取3个月龄小鼠股骨远端骨组织,应用组织切片和 Micro-CT 方法检测骨组织形态计量学指标和骨矿密度(BMD)。结果体外条件性敲除成骨细胞中的 HIF-1α基因后,由于 HIF-1α的表达下降导致 VEGF、RunX2、ALP、OC 的表达水平降低,而敲除 VHL 基因后由于 HIF-1α的表达上调导致上述基因的表达升高。体内条件性敲除 HIF-1α基因小鼠骨组织形态计量学指标和 BMD 均劣于野生型小鼠,而体内条件性敲除 VHL 基因小鼠以上指标均优于野生型小鼠。结论在生理和病理条件下,由于低氧环境的存在,HIF-1α能够通过促进成骨细胞的功能而调控骨形成过程。; 刘晓东邓廉夫王君齐进周琦王晋申魏立朱雅萍; 关键词：细胞低氧基因表达调控

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上海市浦江人才计划项目(05PJ14061)