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国家高技术研究发展计划(2012AA10A412-4)

作品数：10 被引量：46H指数：4
相关作者：王印庚廖梅杰李彬荣小军张正更多>>
相关机构：中国水产科学研究院黄海水产研究所大连海洋大学中国海洋大学更多>>
发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金科研院所技术开发研究专项资金更多>>
相关领域：农业科学生物学更多>>

文献类型

  • 10篇中文期刊文章

领域

  • 10篇农业科学
  • 1篇生物学

主题

  • 7篇刺参
  • 3篇实时定量PC...
  • 3篇弧菌
  • 3篇SYBR
  • 3篇SYBR_G...
  • 3篇APOSTI...
  • 2篇实时定量PC...
  • 2篇病原
  • 1篇对刺
  • 1篇荧光
  • 1篇荧光定量
  • 1篇幼参
  • 1篇育苗工艺
  • 1篇致病
  • 1篇致死
  • 1篇中草药
  • 1篇中草药复方
  • 1篇生长率
  • 1篇生理生化
  • 1篇生理生化响应

机构

  • 10篇中国水产科学...
  • 4篇大连海洋大学
  • 3篇中国海洋大学
  • 1篇上海海洋大学
  • 1篇天津师范大学
  • 1篇山东省出入境...
  • 1篇山东安源水产...

作者

  • 10篇廖梅杰
  • 10篇王印庚
  • 9篇李彬
  • 8篇荣小军
  • 7篇张正
  • 4篇陈贵平
  • 3篇刘智超
  • 2篇王岚
  • 2篇姜燕
  • 2篇张文泽
  • 2篇李华
  • 1篇麦康森
  • 1篇战文斌
  • 1篇蔡生力
  • 1篇于永翔
  • 1篇李强
  • 1篇孙金生
  • 1篇王新安
  • 1篇陈宗阳
  • 1篇郝继光

传媒

  • 4篇渔业科学进展
  • 2篇中国水产科学
  • 1篇海洋科学
  • 1篇水产科技情报
  • 1篇水产学报
  • 1篇中国海洋大学...

年份

  • 2篇2016
  • 3篇2015
  • 3篇2014
  • 2篇2013
共 10 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
夏季保苗期刺参(Apostichopus japonicus)腐皮综合征病原菌的分离鉴定及其致病阈值被引量：3
2015年
2013年夏季山东地区某刺参育苗场处于保苗期的刺参苗种暴发腐皮综合征疾病,表现为附着力下降、棘刺顶端溃烂、排脏、表皮溃疡和自溶等症状。自患病个体病灶组织分离优势细菌,并利用形态学观察、生理生化测定、回接感染、16S rDNA基因序列分析等方法完成致病原的鉴定。此外,通过对发病前后养殖系统中优势菌丰度的变化,追踪确定了所分离病原菌的致病阈值。结果显示,从患病参苗体表病灶处分离的一株优势菌HP130917A-1,经回接感染证实,该菌株具有较强的致病力,其对刺参苗种的半致死浓度为1.2×106 CFU/ml。生理生化结合分子鉴定表明,该菌株为溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)。此外,完成了患病池保苗期间池水和附着基表面微生物菌群结构动态分析,共分离得到了6种主要优势菌,分别为溶藻弧菌、需钠弧菌(Vibrio natriegens)、副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)和马胃葡萄球菌(Staphylococcus equorum)。溶藻弧菌一直是养殖系统中优势度最高的种类,且随着附着基在保苗池中时间的延长,其在附着基表面沉积物中的浓度越来越高。到第50天时,浓度达到8.97×106 CFU/cm2。而此时系统中参苗开始暴发腐皮综合征疾病,可将此浓度视为该病原的致病阈值。因此,在夏季保苗过程中应加强养殖系统中弧菌总数的监测,制定适宜的附着基更换频率,建立和优化刺参保苗工艺,以期为刺参苗期疾病防控和优化健康养殖管理提供理论依据和参考。
张文泽王印庚廖梅杰荣小军李彬张正李华范瑞用
关键词：刺参腐皮综合征病原菌
一种中草药复方对刺参苗期玻璃海鞘的杀除效果被引量：4
2013年
用使君子、雷丸、茶籽饼、川楝子、大蒜素、矿物质分散剂组成中草药复方，分别以0、5、6、8、10、15、20和25mg·L-1的浓度对刺参苗期玻璃海鞘（Ciona intestinalis）进行杀除效果和对刺参苗种的毒性试验，以研究中草药复方对海参苗期玻璃海鞘的杀除效果。结果表明：：果用该中草药复方，浓度为10～15mg·L-1时，药浴24h，既能有效杀灭玻璃海鞘，又对稚参无毒副作用，对养殖水体各指标也基本无影响，是刺参养殖系统中杀灭玻璃海鞘的最适浓度。进一步的生产性应用实践表明，在刺参育苗池中采用“3＋7”模式（用药后第3d倒池、第7d倒板）施用浓度10—15mg·L-1的中草药复方，可达到杀除玻璃海鞘的良好效果，且与海参容易分离。在上述药物浓度作用下，刺参苗种伸展、附着和摄食正常，健康状况良好。该中草药复方适合在生产实践中应用推广。
王印庚陈宗阳廖梅杰陈霞陈贵平范瑞用邹安革蔡生力
关键词：刺参苗种玻璃海鞘中草药
基于vhhP2基因的SYBR Green I实时定量PCR检测哈维氏弧菌方法的建立被引量：4
2014年
根据哈维氏弧菌(Vibro harveyi)溶血素基因vhhP2的保守序列设计特异性引物,建立了SYBR Green I实时定量PCR检测哈维氏弧菌的方法。构建含vhhP2基因的重组质粒作为标准品,进行SYBR Green I实时定量PCR,在Tm为60℃时,扩增产物的熔解曲线仅有一个特异峰,扩增所得标准曲线为y=–3.331x+37.48,相关系数为0.998,扩增效率为1,最低可检测到7个拷贝。实验结果表明该检测技术具有较高的特异性、敏感性和重复性,对哈维氏弧菌病的快速诊断和流行病学调查有重要意义。
廖梅杰张正荣小军王印庚刘智超栾晶李彬王岚陈贵平
关键词：哈维氏弧菌实时定量PCRSYBR
基于gyrB基因的SYBR Green I实时定量PCR检测病原灿烂弧菌被引量：7
2014年
灿烂弧菌Vibrio splendidus是多数海水养殖动物的主要致病菌,对养殖业危害较大。本研究根据灿烂弧菌gyrB基因的保守序列设计特异性引物,建立了SYBR Green I实时定量PCR检测灿烂弧菌的方法。构建含gyrB基因的重组质粒作为标准品,进行SYBR Green I实时定量PCR,在Tm为62℃时,扩增产物的熔解曲线仅有一个单特异峰,扩增所得标准曲线为y=-3.338x+37.67,相关系数为0.999,扩增效率为0.99,最低能检测到20个拷贝。实验结果表明,该检测技术具有较高的特异性、敏感性和重复性,对灿烂弧菌病的快速诊断和流行病学调查有重要意义。
于永翔王印庚刘智超廖梅杰张正荣小军李彬战文斌
关键词：灿烂弧菌实时定量PCRSYBR
刺参4个不同选育品系幼参对低盐胁迫的耐受及生理生化响应被引量：4
2016年
由于黄河口区域盐度偏低且不稳定,刺参(Apostichopus japonicus)的生长和存活受到严重威胁。为评估4个不同品系(日本刺参F2代RC-F2、抗病刺参F3代KC-F3、多刺刺参F2代DC-F2、青青刺参F1代QQ-F1)的低盐耐受力及其生理生化响应,本实验以青岛野生群体(QW)为对照,通过测定低盐胁迫下幼参的生长、存活以及非特异性免疫酶活力变化,评价了4个刺参不同选育品系对低盐的耐受状况。结果表明,在盐度17以下,除了QQ-F1表现为正生长,其他群体均为负生长。RC-F2、KC-F3、DC-F2、QQ-F1和QW的30天半致死盐度(LS50-30d)分别为15.02、15.19、16.48、14.26和15.13,QQ-F1显著低于其他4个群体;盐度14时,5个群体的半致死时间(ST50)分别为19.84 d、18.43 d、10.11 d、23.54 d和19.01 d,QQ-F1的ST50显著长于其他4个群体。在低盐胁迫时QQ-F1的ACP、AKP、SOD、LZM酶指标的下降幅度显著低于其他4个群体。不同选育群体的低盐耐受力排序为QQ-F1>RC-F2>QW>KC-F3>DC-F2,QQ-F1群体表现出良好的低盐耐受能力,在低盐度海域或盐度不稳定的海域具有良好的推广应用前景。本实验研究结果可为刺参健康养殖、良种性状评价、选育与推广等方面提供参考依据。
侯西坦廖梅杰李彬王印庚张正陈贵平荣小军孙金生范瑞用
关键词：特定生长率
利用酿酒酵母发酵刺参饲料的条件优化研究被引量：3
2015年
以酿酒酵母为发酵菌种,开展了刺参饲料发酵条件优化的研究。测定不同含水量、温度和发酵时间条件下发酵饲料的感官性状评价和理化指标。结果表明,以10%(V/W)的接种量接入酿酒酵母种子液、发酵温度25℃、含水量70%发酵时间为3d的实验组效果最好:发酵饲料的干物质回收率(Dry matter recovery,DMR)、粗蛋白含量(Crude protein,CP)、氨基酸态氮占总氮的含量(Percentage of amino acid nitrogen to total nitrogen,AA-N/tN)分别达到最高值,氨态氮占总氮的含量(Percentage of ammonia nitrogen to total nitrogen,NH3-N/tN)相对较低;饲料的气味、颜色和黏度等综合感观性状达到最佳。研究表明,酿酒酵母可以作为发酵刺参饲料的备选菌种,其最适发酵条件:环境温度25℃、基础饲料含水量70%、发酵时间3d。研究结果将为新型海参饲料的制备和应用提供途径。
姜燕王印庚麦康森张正廖梅杰荣小军李彬王新安
关键词：酿酒酵母刺参饲料发酵粗蛋白含量
饥饿胁迫对刺参(Apostichopus japonicus)免疫和生长的影响被引量：10
2014年
为了探究饥饿胁迫对刺参免疫和生长的影响,在11?13℃条件下,研究体质量为(20±0.15)g的刺参在不同时间(0、10、20、30、40、50、60 d),饥饿胁迫对体腔液中酸性磷酸酶(ACP)活性、溶菌酶(LZM)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、呼吸爆发(RB)活性、吞噬活性以及对刺参体质量、脏壁比、存活率的影响。研究结果表明,随着饥饿时间的延长,刺参体腔液中的ACP活性、LZM活性呈现降低的趋势,饥饿60 d后,比初始值分别下降47.06%、17.57%;SOD活性、RB活性和吞噬活性呈现出先上升后下降的趋势,分别在饥饿胁迫第20、20、10天时达到最高值依次为32.88、0.328、1.35 U/ml,其后显著下降,第60天时显著低于初始值,分别下降27.87%、38.08%、53.43%;其体质量在第60天时为初始体质量的68.08%,呈现负生长;脏壁比逐渐增大,第60天时为0.56,显著高于初始值0.44(P<0.05)。随着存储营养物质的消耗,刺参体质量损失率增加,存活率下降,存活率与体质量损失率之间存在着y=?0.0354x2+0.4354x+99.117的函数关系,呈二次曲线线性负相关。研究结果显示,饥饿时刺参通过消耗体内的营养物质来满足机体需要,长期的饥饿有可能降低刺参的免疫能力,直接影响刺参的健康和生长。
田青荣小军李彬廖梅杰姜燕范瑞用王印庚李强
关键词：刺参饥饿胁迫免疫存活率
刺参苗期附着基更换频率对刺参生长及其养殖系统菌群结构的影响
2016年
为了探究刺参（Apoasichopus japonicus）保苗阶段（7–9月）最佳的附着基更换频率（changing frequency,CF）,本实验在夏季保苗期设置5个附着基更换频率组,即CF10、CF20、CF30、CF40和CF50。采用实验生态学的方法,并结合传统细菌培养法和16S r DNA细菌鉴定技术对上述不同实验组进行检测。结果表明：CF20组刺参整池增重和个体增重幅度最大,CF30次之,CF50组由于死亡率高,整池重量为负增长。CF20组的特定生长率和存活率分别为（5.986±0.135）%/d和（95.231±0.265）/%,且显著高于其他各组（P〈0.05）,CF30次之,而CF_（50）组的特定生长率和存活率最低,且显著低于其他各组（P〈0.05）。养殖用水中4NH＋-N、2NO--N和COD随着附着基更换频率的降低而升高,并在第50天时分别达到0.53 mg/L、0.28 mg/L、0.18 mg/L。各实验组水体中异养细菌和弧菌数量随附着基更换频率变化不明显,而附着基上的异养细菌和弧菌数量随附着基更换频率的降低而升高,CF_（50）组异养细菌总数在第50天时达到1.38×10^5 cfu/cm^2,弧菌数量达到1.5×10^4 cfu/cm^2,皆明显高于其他各组。附着基上优势菌为溶藻弧菌（Vibrio algindyticus）、需钠弧菌（V.natriegens）、马胃葡萄球菌（Staphylococcus equorum）、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、苏云金芽孢杆菌（B.thuringiensis）和副溶血弧菌（V.parahaemolyticus）。其中,溶藻弧菌为刺参条件致病菌,且一直存在于养殖系统中并逐步占据绝对优势。这与CF_（50）组在实验进行到43 d时开始出现化皮,50 d时开始出现死亡现象有一定的关系。同时,附着基长时间未更换,会滋生大量玻璃海鞘、日本毛壶、内刺盘管虫等敌害生物,争夺栖息空间和食物,导致刺参苗种生长减慢。综上,由实验结果显示,在7–9月高温季节每20 d更换一次附着基最佳。考虑到生产成本,附着基更换频率一般为20~30 d为宜。本研究结果为�
王印庚张文泽廖梅杰李彬荣小军张正李华范瑞用宁鲁光
关键词：刺参育苗工艺附着基菌群结构弧菌
迟缓爱德华氏菌SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法的建立及其应用被引量：8
2013年
根据克隆得到的迟缓爱德华氏菌gyrB基因序列设计并合成一对特异性引物,通用性和特异性检测结果显示所设计的引物具有良好的种间特异性和种内通用性,构建含gyrB基因的重组质粒作为标准品,经过反应体系优化后建立了检测迟缓爱德华氏菌的SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法。结果显示,该方法线性关系良好,在T m为63℃时,扩增产物的熔解曲线仅有一个单特异峰,扩增所得标准曲线为y=-3.32x+39.38,相关系数为0.998,扩增效率为1.00,最低能检测到60个拷贝。应用建立的方法对人工感染的大菱鲆病样进行了检测,3个被检样品均呈阳性反应,证明该方法具有较好的适用性。研究表明,所建立的实时荧光定量PCR方法具有特异、敏感、快速、定量的优点,可用于迟缓爱德华氏菌病的快速检测。
荣小军廖梅杰张正王印庚刘智超李彬王岚陈贵平
关键词：迟缓爱德华氏菌实时定量PCRSYBR
饲料中添加3种不同投入品对筏式浅海网箱刺参(Apostichopus japonicus)养殖生长的影响被引量：4
2015年
以刺参的存活率、增重率、特定生长率和肠道蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶及肠道组织结构变化为评价指标,通过42 d的养殖实验,研究了在基础饲料(空白组)中添加20%生物胶为粘合剂制备粘性饲料(粘性饲料对照组),通过添加浒苔干粉(浒苔组)、微生态制剂(微生态制剂组)、中草药(中草药组)3种投入品对浅海筏式网箱养殖刺参生理及生长的影响。结果显示,在散失率方面,粘性饲料比空白组饲料散失率降低33.42%,添加浒苔干粉、微生态制剂、中草药对饲料散失率的影响差异不显著(P>0.05);在生长方面,中草药组的增重率和特定生长率均为最高,分别达到(41.50±1.39)%和(0.82±0.02)%/d,显著高于其他4个实验组;在存活率方面,微生态制剂组和中草药组的存活率显著高于空白组和粘性饲料对照组。其中,中草药组存活率最高,达到(94.03±2.28)%;在消化酶活性方面,浒苔组、微生态制剂组和中草药组的淀粉酶活性分别在第10、20、30天达到峰值,峰值分别为(1.70±0.05)、(1.60±0.04)、(1.77±0.04)U/mg prot;粘性饲料对照组的蛋白酶活性波动最大,其活性在第10天达到峰值为(1.78±0.09)U/mg prot;空白组、粘性饲料对照组和浒苔组的纤维素酶活性均呈现先升高后降低的趋势,在实验周期内中草药组的纤维素酶活性表现为持续上升,而微生态制剂组刺参的纤维素酶活性表现出先下降后上升的趋势,最低值为(0.14±0.01)μg/g·min;肠道组织结构方面,粘性饲料对照组的肠道黏膜上皮层厚度显著增加(P<0.05),浒苔组的肌肉层厚度显著增加(P<0.05),中草药组和微生态制剂组刺参肠道组织结构完整,上皮细胞分泌旺盛。研究表明,通过添加生物胶所制作的粘性饲料可显著降低饲料散失率,添加微生态制剂和中草药可显著提高网箱养殖刺参的成活率,并显著提高刺参个体的消化酶活力和增重率,添加浒苔对刺参生长影响不显�
郝继光王印庚廖梅杰李彬崔浩许燕邹安革张振
关键词：刺参生物胶浒苔微生态制剂
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