湖北省科技攻关计划(2007AA402C71)
- 作品数：2 被引量：5H指数：2
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- 慢病毒载体有效转移并感染心肌成纤维细胞被引量：2
- 2009年
- 背景：心肌成纤维细胞过度增殖、胶原合成增多是心肌纤维化的主要病理基础。慢病毒载体系统是一种新型的基因治疗转移系统,能够高效感染分裂期和非分裂期细胞。目的：建立慢病毒载体有效转移并表达于大鼠心肌成纤维细胞的方法,为利用慢病毒载体介导心肌成纤维细胞的基因靶向治疗奠定基础。设计、时间及地点：对比观察,实验于2008-08/10在华中科技大学同济医学院附属协和医院老年病及上海吉凯公司实验室完成。材料：新生13日的SD大鼠乳鼠30只;Lentivirus载体、Enhanced Infection Solution（ENi.S）、Polybrene均为上海吉凯基因化学技术有限公司产品。方法：采用差速贴壁法培养乳鼠心肌成纤维细胞,在DMEM加入3个梯度Lentivirus感染细胞,将病毒复感染指数为200,20,2的3组细胞,每组分别加入①Lentivirus。②在细胞感染时添加polybrene提高感染效率。③在上述基础上加入具有促进病毒感染的细胞增强液（Enhanced Infection Solution（ENi.S））,感染4d。主要观察指标：①心肌成纤维细胞形态特征。②倒置显微镜观察绿色荧光蛋白表达情况及感染效率。结果：成功建立心肌成纤维细胞培养模型,当慢病毒对心肌成纤维细胞的复感染指数为20时,可以达到80%的感染效率,然而必须在培养基内加入多聚阳离子转染试剂Polybrene,以提高慢病毒载体的感染效率。结论：慢病毒载体较易感染心肌成纤维细胞,是具有发展潜力的心肌成纤维细胞基因靶向治疗的新载体。
- 方欣管思明李伟王斌
- 关键词：慢病毒载体心肌成纤维细胞绿色荧光蛋白基因治疗
- 氯沙坦干预瞬时受体电位通道C亚族表达发挥抗心肌纤维化的作用被引量：3
- 2009年
- 目的:研究氯沙坦对心肌纤维化大鼠心脏组织瞬时受体电位通道C亚族(TRPC)表达的影响。方法:将SD大鼠随机分为假手术组、心肌纤维化组和氯沙坦组,用药后4周测心室重量指数、心肌胶原容积分数及心脏组织中TRPC通道mRNA及蛋白表达。结果:心肌纤维化组左室重量指数,Ⅰ,Ⅲ型胶原容积分数显著高于假手术组;氯沙坦组上述指标较心肌纤维化组明显降低。3组心脏均有TRPC1表达,但心肌纤维化组TRPC1 mRNA及蛋白表达显著升高,氯沙坦组TRPC1表达则明显减少(P<0.01);TRPC3,TRPC6 mRNA与蛋白表达3组差异无显著性。结论:SD大鼠心脏存在TRPC1、TRPC3和TR-PC6蛋白表达,心脏TRPC1蛋白可能参与心肌纤维化过程,氯沙坦可能通过下调心脏TRPC1通道表达发挥抗心肌纤维化作用。
- 方欣柯琴梅王斌李伟管思明
- 关键词：氯沙坦心肌纤维化瞬时受体电位通道
