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上海市卫生局科研基金(2010056)
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王小光
刘芸
刘继倩
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相关机构:
上海市闵行区疾病预防控制中心
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上海闵行地区腹泻患者非O157型产志贺毒素大肠埃希菌感染特点及毒力基因评估
2013年
目的研究上海闵行地区腹泻患者非0157型产志贺毒素大肠埃希菌(非0157STEC)感染情况及其毒力基因分布特点。方法收集该地区三个监测哨点及复旦大学附属儿科医院腹泻门诊患者肛拭样本及临床资料,通过培养、分离、生化鉴定及血清凝集等金标准确认非0157STEC菌株。同时运用聚合酶链反应(PCR)方法检测毒力基因stxl、stx2、eae、hly、etpD、及katP。结果380例(儿童195例,成人185例)大肠埃希菌阳性的腹泻患者肛拭样本中,40例(儿童30例,成人10例)确认为非0157STEC阳性,儿童阳性率(15.4%)显著高于成人(5.4%)。全部40例非0157STEC分离株均显示stx2毒力基因阳性,而stxl及eae基因阳性率很低,未检测到hly、etpD、及katP毒力基因。结论上海闵行地区非0157STEC是引起人群尤其是儿童腹泻的主要病原体之一,其菌株均显示stx2毒力基因阳性。
王小光
张颖华
汪萍
陈秀华
骆玲飞
刘芸
刘继倩
宋驰萍
欧阳霖
陈国强
关键词:
大肠埃希菌
腹泻
非0157型产志贺毒素大肠埃希菌毒力基因多重PCR检测方法的建立与应用
2013年
目的应用两组三重PCR方法检测非0157:H7型STEC的6种毒力基因stxl、stx2、eae、hly、etpD、katP。方法对多重PCR方法进行改进优化,引入SYBRGreenI荧光定量PCR熔解曲线分析的方法提高工作效率,并结合血清学分析的方法判定结果。建立检测产志贺毒素大肠埃希菌毒力基因的多重PCR方法,简化其分子危害性评估工作,提高检测的准确性与评估效率。结果用模拟样品评估该方法,检测下限分别为:组1stxl基因10ng/ml、stx2基因120ng!ml、eaeP基因110ng/ml;组二etpD基因165ng/ml、katP基因85ng/ml、hly基因15ng/ml。其特异性和灵敏度与单一基因PCR扩增结果基本一致;而运用该方法对210例腹泻患者样品进行检测应用,得到13株非0157STEC菌株,其毒力基因为stxl基因均阳性,eae基因伴随存在,而hly、etpD、katP毒力基因呈散发性分布。结论本研究建立的方法能够快速有效地进行非0157STEC的毒力基因的检出和排查,既提高了检测效率,又可作为评估分子危害性的检查方法。
王小光
关键词:
大肠埃希菌
基因
聚合酶链反应
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