教育部科学技术研究重点项目(206008)
- 作品数：9 被引量：25H指数：4
- 相关作者：张丽莙张利军王蓓蓓沈炳玲权伟更多>>
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- 磷脂酰肌醇3-激酶在血管新生相关性疾病中的作用被引量：1
- 2011年
- 血管新生参与了人体多种生理与病理过程，前者如创伤愈合，后者包括肿瘤。
- 权伟张丽莙
- 关键词：血管生成关节炎类风湿磷脂酰肌醇3-激酶
- 肺炎衣原体感染对血管平滑肌细胞黏附和迁移的影响被引量：5
- 2010年
- 目的:观察肺炎衣原体(C.pn)感染对血管平滑肌细胞(VSMCs)黏附和迁移的影响。方法:C.pn在人喉癌细胞系HEp-2细胞中增殖培养后感染大鼠VSMCs,吖啶橙(AO)荧光染色观察细胞内C.pn包涵体的形态特点;聚合酶链反应(PCR)检测C.pn特异性DNA片段;细胞黏附实验观察C.pn感染对VSMCs黏附能力的影响;wound-healing assay和Transwell assay检测C.pn感染VSMCs后细胞迁移能力的改变。结果:C.pn感染VSMCs后,少数细胞内出现空泡状结构即包涵体,但在多数细胞内以点状感染灶形式存在,包涵体较大,但数量较少。利用PCR可在感染的VSMCs内检测到437 bp的C.pn特异性DNA片段。细胞黏附实验结果显示,C.pn感染VSMCs 2 h后,细胞黏附能力明显增强,其吸光度值明显高于正常对照组(P<0.01),细胞黏附率为134.38%。Wound-healing assay结果显示,C.pn感染VSMCs 24 h后,细胞向划痕中央迁移的距离明显大于正常对照组(P<0.05)。Transwell assay结果显示,C.pn感染VSMCs 24 h后,C.pn感染组的细胞迁移数明显多于正常对照组(P<0.01)。结论:C.pn感染能够显著增强VSMCs的黏附和迁移能力。
- 王蓓蓓张利军权伟沈炳玲张腾腾张丽莙
- 关键词：动脉粥样硬化肺炎衣原体血管平滑肌细胞迁移
- 肺炎衣原体在血管平滑肌细胞中的生长状态及细胞超微结构的观察被引量：3
- 2013年
- 目的观察肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae,Cpn)在血管平滑肌细胞(VSMC)中的生长发育情况和细胞超微结构的改变,了解青霉素对Cpn感染状态的影响。方法利用免疫荧光染色鉴定Cpn感染VSMC情况;用透射电镜观察感染24h、48h和72h后Cpn在VSMC中的形态和细胞超微结构的变化,及经青霉素处理后Cpn生长状态的改变。结果免疫荧光染色观察到Cpn在VSMC内形成包涵体和点状感染灶。透射电镜观察到细胞内Cpn包涵体逐渐成熟的过程及典型的原体(EB)和网状体(RB)结构,其中在感染48h时部分包涵体或单个RB发育受限,72h时包涵体膜消失;细胞内线粒体和粗面内质网初期增多,后期扩张变形。此外,青霉素处理后Cpn不形成典型包涵体且RB结构异常。结论 Cpn感染VSMC的能力与易感细胞相比较弱,虽包涵体及其EB和RB形态结构与在易感细胞相似,但部分发育停滞;Cpn在VSMC的发育周期不足72h。青霉素干预能抑制Cpn在VSMC中的生长发育。感染后VSMC超微结构的变化为进一步研究细胞功能的改变提供了依据。
- 魏俊燕王蓓蓓张利军张俊霞王海伟叶静张丽莙
- 关键词：肺炎衣原体血管平滑肌细胞超微结构青霉素
- 肺炎衣原体感染通过PI3K激活Rac1而诱导血管平滑肌细胞迁移被引量：5
- 2013年
- 目的:研究Rac1活化在肺炎衣原体(C.pn)感染诱导血管平滑肌细胞(VSMCs)迁移中的作用及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)对其活化的影响。方法:谷胱甘肽巯基转移酶(GST)-p21活化激酶1 p21结合结构域(PBD)即GST-PBD重组质粒转化感受态细菌,诱导融合蛋白表达并纯化;GST-pull down实验检测C.pn感染VSMCs后Rac1活性的变化;PI3K特异性抑制剂LY294002(25μmol/L)预处理VSMCs,GST-pull down实验检测Rac1活性的变化;Rac1特异性抑制剂NSC23766(50μmol/L)预处理VSMCs,wound-healing实验和Transwell实验观察VSMCs迁移能力的变化。结果:重组质粒转化感受态细菌后,经诱导表达和纯化,得到足量有效的GST-PBD融合蛋白;GST-pull down实验结果显示,C.pn感染VSMCs后Rac1活性增强且显著高于正常对照组(P<0.05);LY294002预处理VSMC后,C.pn感染诱导的Rac1活性明显下降(P<0.05);细胞迁移实验结果显示,NSC23766预处理的C.pn感染组细胞迁移能力明显低于单纯感染组(P<0.05)。结论:C.pn感染可能通过PI3K激活Rac1,从而诱导VSMCs迁移。
- 张俊霞张腾腾张利军王蓓蓓魏俊燕王海伟沈炳玲张丽莙
- 关键词：肺炎衣原体RAC1GTP结合蛋白磷脂酰肌醇3-激酶血管平滑肌细胞
- PI3K/Akt在肺炎衣原体感染诱导血管平滑肌细胞迁移中的作用被引量：5
- 2012年
- 目的研究PI3K/Akt在肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae,C.pn)感染诱导血管平滑肌细胞(vascularsmooth muscle cell,VSMC)迁移中的作用。方法利用透射电镜鉴定C.pn成功感染VSMC;采用PI3K特异性抑制剂LY294002预处理VSMC后,wound-healing实验和Transwell实验分别观察VSMC迁移能力的改变;Western blot实验检测VSMC内Akt的磷酸化水平。结果透射电镜可观察到感染的VSMC内出现典型的C.pn原体;C.pn感染VSMC 24 h后,细胞迁移实验结果显示C.pn感染组VSMC的迁移能力增强且明显高于正常对照组(P<0.05);Western blot结果显示C.pn感染组Akt的磷酸化表达水平明显上调且高于正常对照组(P<0.05);PI3K特异性抑制剂LY294002可有效抑制C.pn感染诱导的VSMC迁移及Akt的磷酸化。结论 C.pn感染通过激活PI3K/Akt促进VSMC迁移。
- 张腾腾张利军王蓓蓓李宪奎张俊霞魏俊燕张丽莙
- 关键词：肺炎衣原体血管平滑肌细胞
- 肺炎衣原体感染通过PI3K通路诱导血管内皮细胞迁移被引量：4
- 2010年
- 目的:研究肺炎衣原体感染对血管内皮细胞迁移的影响及其相关分子机制。方法:创伤修复实验与Transwell实验观察肺炎衣原体感染的血管内皮细胞迁移情况,RT-PCR与ELISA法分别检测PI3K mRNA表达与酶活性。结果:肺炎衣原体感染以时间依赖方式明显促进人内皮细胞素ECV304细胞迁移,且可以显著增强PI3K mRNA表达与酶活性;PI3K特异性抑制剂LY294002可有效抑制肺炎衣原体感染引起的上述变化。结论:肺炎衣原体感染可诱导血管内皮细胞迁移,其机制可能与激活PI3K信号转导通路有关。
- 权伟张利军陈宁沈炳玲叶静王蓓蓓刘欣张丽莙
- 关键词：肺炎衣原体血管内皮细胞迁移血管新生磷酸肌醇3-激酶
- 肺炎衣原体感染在动脉粥样硬化不同阶段作用机制研究进展被引量：3
- 2008年
- 近年来感染作为动脉粥样硬化新的危险因素备受关注。大量研究显示肺炎衣原体感染参与动脉粥样硬化病变的整个过程。本文对肺炎衣原体感染在动脉粥样硬化不同阶段的相关细胞分子机制加以综述,为明确肺炎衣原体感染与动脉粥样硬化的因果关系,进一步阐明动脉粥样硬化的发病机制提供理论基础。
- 洪莉张丽莙
- 关键词：病理学与病理生理学肺炎衣原体动脉粥样硬化信号转导炎症介质
- 肺炎衣原体感染在人喉癌HEp-2细胞黏附和迁移中的作用被引量：1
- 2011年
- 目的 探讨肺炎衣原体（C.pn）感染在人喉癌HEp-2细胞黏附和迁移中的作用,及其在肿瘤转移中的作用及机制.方法 C.pn增殖培养后感染HEp-2细胞,光镜下观察细胞病变,吖啶橙染色观察细胞内C.pn包涵体的形态特点,透射电镜观察C.pn包涵体超微结构.采用细胞黏附实验观察C.pn感染对HEp-2细胞黏附能力的影响.采用创伤修复实验和Transwell实验检测C.pn感染HEp-2细胞后,细胞迁移能力的改变.结果 C.Pn感染HEp-2细胞72 h后,细胞内的空泡状结构（即包涵体）几乎占据整个胞浆.吖啶橙染色结果显示,细胞内的包涵体呈黄绿色葡萄串状.透射电镜观察显示,包涵体内成熟的梨形原体明显增多,而圆形的网状体则较少.细胞黏附实验结果显示,C.pn感染HEp-2细胞2 h后,C.pn感染组黏附细胞的吸光度（A）值为0.669±0.011,明显高于对照组的A4值（0.558±0.005,P〈0.001）,C.pn感染组的细胞黏附率为119.9%.创伤修复实验结果显示,C.pn感染HEp-2细胞24 h后,细胞向划痕中央迁移的距离明显长于对照组（P〈0.05）.Transwell实验结果显示,C.pn感染HEp-2细胞12 h后,C.pn感染组和对照组的细胞迁移数目分别为（23.40±2.41）个/视野和（10.40±1.67）个/视野,差异有统计学意义（P〈0.001）.结论 C.pn感染能增强HEp-2细胞的黏附能力,同时还能促进HEp-2细胞迁移,提示C.pn感染可能在喉癌转移过程中起促进作用.
- 张利军洪莉陈宁沈炳玲邓艳秋权伟王蓓蓓张丽莙
- 关键词：衣原体肺炎细胞黏附
- 肺炎衣原体在HEp-2细胞中增殖的观察被引量：6
- 2008年
- 目的研究肺炎衣原体AR-39株在体外培养中的增殖规律，进一步了解其超微结构的变化，并探讨AR-39株在体外连续培养的方法。方法AR-39株感染人喉癌细胞（human epider-moid carcinoma-2，HEp-2），光镜下观察细胞病变；PCR技术鉴定其核酸；荧光显微镜和电镜下观察感染24h、48h和72h后AR-39株在HEp-2细胞内的形态变化。结果光镜下可见HEp-2细胞内形成包涵体；PCR扩增出肺炎衣原体437bp的特异性片段；荧光显微镜和电镜显示AR-39株在HEp-2细胞内包涵体从幼稚型到成熟型的衍变过程，并观察到梨形原体及微型小体等AR-39株特征性的超微结构。结论AR-39株在HEp-2细胞内经72h完成一个发育周期，此时可获得高感染性的肺炎衣原体用于连续传代。
- 洪莉杨坤张利军陈宁李梅张丽莙
- 关键词：肺炎衣原体超微结构增殖
