陕西省科技攻关计划(2003k02-G11-01)
- 作品数：1 被引量：4H指数：1
- 相关作者：李谱华刘建玲张彦明苏正元许信刚更多>>
- 相关机构：西北农林科技大学西北大学更多>>
- 发文基金：陕西省科技攻关计划陕西省教育厅科研计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪瘟病毒Shimen株E2基因的克隆及其逆转录病毒表达载体的构建被引量：4
- 2006年
- 根据已发表的猪瘟病毒(classicalswinefevervirus,CSFV)Shimen株的全基因组序列,设计2对引物P1/P2和B1/B2,在B1和B2的5′端分别加上EcoR和BamH位点,以CSFV-Shimen株脾毒为材料,一步法提取总RNA,并以此为模板采用反转录PCR(RT-PCR)和套式PCR(nPCR),成功地扩增出约1.2kb的E2基因。将PCR产物回收后与pMD18-T载体连接并转化,经PCR和酶切鉴定获得重组质粒E2-T。将E2-T经EcoR和BamH酶切消化、回收目的基因后,与经BamH/EcoR酶切的逆转录病毒载体pBABE-puro连接并转化,经酶切鉴定获得重组质粒pBABE-puro-E2。序列测定表明,目的基因的插入位置、方向和读码框完全正确。
- 刘建玲苏正元许信刚李谱华张彦明
- 关键词：猪瘟病毒E2基因
