国家自然科学基金(39670267)
- 作品数：7 被引量：43H指数：3
- 相关作者：蒲传强郝延磊刘洁晓张凤英朱克更多>>
- 相关机构：中国人民解放军总医院济南军区总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金军队医药卫生科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 细胞间粘附分子-1和E-选择素在局部脑缺血中的作用被引量：26
- 2000年
- 目的 探讨细胞间粘附分子 1(ICAM 1)和E 选择素 (E selectin)在局部脑缺血炎性反应过程中的作用。方法 采用尼龙线栓堵大鼠大脑中动脉 ,造成局部持续脑缺血模型 ,用RT PCR方法检测缺血侧脑组织持续缺血后不同时间点ICAM 1和E selectinmRNA的表达。结果 假手术组及手术组非缺血侧大脑皮层未见ICAM 1和E selectinmRNA的表达。持续脑缺血后 1h ,手术组缺血侧大脑皮层ICAM 1和E selectinmRNA的表达量开始升高 ;缺血后 6h ,ICAM 1mRNA的上调达高峰 ,且持续至缺血后 48h。而E selectinmRNA的上调在缺血后 12h达高峰。结论 ICAM 1和E selectin参与了持续局部脑缺血后脑组织损伤的病理过程。两者协同发挥作用 ,在白细胞进入缺血区脑组织的病理过程中起重要作用。
- 郝延磊蒲传强朱克张凤英刘洁晓
- 关键词：脑缺血细胞间粘附分子-1E-选择素反转录多聚酶链反应内皮细胞
- 高血糖大鼠血脑屏障的超微形态及免疫组化研究被引量：2
- 2005年
- 目的探讨糖尿病的慢性高血糖对血脑屏障(BBB)超微形态及其内皮细胞ICAM-1表达的影响.方法采用SD大鼠建立高血糖模型.以透射电镜和免疫组化方法动态观察3天～8个月不同时程高血糖条件下,BBB超微结构的改变及其内皮细胞ICAM-1的表达.结果高血糖大鼠3天～2个月时,BBB改变不明显,有少量ICAM-1表达;3个月时出现明显的BBB改变,ICAM-1大量表达;6～8个月时改变继续加重,ICAM-1仍保持明显表达,范围更广.对照组BBB无改变及内皮细胞ICAM-1无表达.结论长期高血糖能导致大鼠BBB形态异常和内皮细胞ICAM-1表达增加.后者可能是高血糖导致脑组织毛细血管结构及功能异常的重要病理学基础.
- 郭徽张胜兰姜兆顺蒲传强郝延磊张凤英
- 关键词：高血糖大鼠超微形态免疫组化研究慢性高血糖高血糖模型
- 实验性超负荷血糖大鼠血脑屏障内皮细胞ICAM—1 研究
- 2000年
- 为了解超负荷血糖条件下有否血脑间（ＢＢＢ）内皮细胞ＩＣＡＭ－１的表达，本研究采用ＳＤ大鼠尾静脉注射链脲毒素的方法，建立超负荷血糖模型。以免疫组化方法动态观察了３天至６个月不同时程的超负荷血糖大鼠脑组织ＢＢＢ内皮细胞ＩＣＡＭ－１的表达。发现超负荷血糖３天时，ＢＢＢ内皮细胞可见有少量ＩＣＡＭ－１表达，７～１４天时，表达不明显；不个月时再次升高；３个月时，可见大量表达，皮层尤为明显，６个月时。
- 郭微
- 关键词：高血症血脑屏障ICAM-1
- TNF-α和LPS对培养大鼠BBBEC胞间通讯的影响被引量：1
- 2008年
- 目的:观察体外培养的血脑屏障内皮细胞(blood brain barrier endothelial cells,BBBEC)之间是否存在缝隙连接及在TNF-α和LPS刺激下BBBEC胞间通讯的改变。方法:利用荧光染料CFDA进行负载,在CLSM下用荧光光淬灭恢复技术观察BBBEC间缝隙连接介导的胞间通讯情况,并检测TNF-α和LPS对BBBEC胞间通讯的影响。结果:正常体外培养的BBBEC经荧光淬灭后,30s内出现荧光恢复,至120s达到高峰。与对照组相比,不同浓度TNF-α刺激BBBEC后,其胞间通讯的降低均有显著性意义(P<0.01);但在不同浓度TNF-α之间,胞间通讯的改变无显著性差异(P>0.05)。与对照组相比,低浓度(1μg/ml)LPS不能显著地降低BBBEC的胞间通讯(P>0.05);但高浓度LPS可显著降低细胞间通讯(P<0.01)。结论:体外培养的BBBEC间存在缝隙连接。TNF-α和LPS均可抑制BBBEC缝隙连接介导的胞间通讯。
- 刘洁晓蒲传强郝延磊
- 关键词：血脑屏障细胞间通讯内毒素肿瘤坏死因子
- 两次过滤体外分离培养原代血脑屏障内皮细胞被引量：6
- 2008年
- 背景：内皮细胞是血脑屏障结构和功能的主要基础，要了解血脑屏障的作用，就必须在体外建立血脑屏障模型。目的：利用幼鼠脑微血管片段模拟血脑屏障内皮细胞的生物学特性，拟建立一种血脑屏障内皮细胞的体外培养技术。设计、时间及地点：细胞观察，于2006—04在解放军总医院神经内科实验室完成。材料：清洁级1月龄SD大鼠2只，用于脑组织微血管内皮细胞的制备。方法：取大鼠脑组织，加入D—Hank’s液培养基制备匀浆，149μm滤网过滤后收集滤液，以74μm滤网再次过滤。将滤网上的组织刮下，胶原酶消化后传代扩增。取传1代后的脑组织微血管内皮细胞用于指标检测。主要观察指标：细胞形态变化。锥虫蓝染色计数细胞活性。免疫组织化学染色鉴定。结果：①培养12h后大部分脑微血管片段贴壁，两三天微血管片段周边有成簇的细胞团及单个细胞生长，7～10d细胞生长为致密单层并呈典型鹅卵石样排列。传代细胞4h开始贴壁，培养一两天变为多角形并呈致密单层。②生长7～10d的细胞其活性〉96％。③培养的细胞第Ⅷ因子多克隆抗体免疫组化染色显示胞膜和胞浆呈阳性，胞核为阴性，为血脑屏障内皮细胞。结论：采用两次过滤培养技术可成功分离培养出较理想的原代血脑屏障内皮细胞。
- 刘洁晓蒲传强郝延磊
- 关键词：内皮细胞细胞培养血脑屏障
- 缺血性脑卒中血脑屏障内皮细胞ICAM-1的实验研究被引量：2
- 1998年
- 目的 探讨高血压大鼠脑卒中过程中血脑屏障 (BBB)内皮细胞细胞间粘附分子 - 1 (ICAM - 1 )的表达。 方法 采用尼龙线栓堵自发性高血压大鼠和正常血压SD大鼠大脑中动脉建立局灶性永久性脑缺血模型 ,在缺血至梗塞不同时期 ,用免疫组化ABC法观察脑组织BBB内皮细胞ICAM - 1表达。 结果 自发性高血压大鼠脑缺血 1h ,BBB之内皮细胞开始出现ICAM - 1的表达 ,至 6h达高峰 ,并持续至 1 68h;正常血压大鼠则在脑缺血至 3h开始出现ICAM - 1的表达 ,至 1 2h达高峰 ,并持续至 1 2 0h。两种大鼠在缺血早期对侧非缺血区脑组织BBB之内皮细胞亦有少量ICAM - 1的表达。 结论 自发性高血压大鼠在未缺血时BBB内皮细胞未见ICAM - 1的表达 ;缺血性脑卒中时ICAM - 1开始表达及达高峰时间均早于正常血压大鼠 ,持续时间亦较正常血压大鼠为长。
- 郝延磊蒲传强朱克张凤英刘洁晓
- 关键词：自发性高血压大鼠血脑屏障细胞间粘附分子-1
- TNF-α和LPS对体外培养血脑屏障内皮细胞胞浆内钙离子浓度的影响被引量：7
- 2003年
- 目的观察脂多糖 (Lipopolysaccharid ,LPS)和肿瘤坏死因子α(Tumornecrosisfactor -α ,TNF -α)对血脑屏障内皮细胞 (Blood_brainbarrierendothelialcell,BBBEC)胞浆内钙离子浓度(plasmicinnerconcentrationofcalcium ,[Ca2 +]i)的影响。方法用Fluo -3/AM做为荧光探针对钙离子进行负载 ,激光扫描共聚焦显微镜观察不同浓度LPS和TNF -α刺激下BBBEC胞浆内钙离子浓度的变化。结果在TNF -α刺激下 ,单个BBBEC[Ca2 + ]i呈浓度依赖性的一过性升高。不同浓度TNF -α引起的BBBECCa2 + 的荧光强度达高峰的时间基本一致 ,高峰荧光强度和荧光持续时间随TNF -α浓度的升高而增加。低浓度LPS(1μg/ml和10μg/ml)刺激细胞时 ,BBBEC[Ca2 +]i无明显变化 ,高浓度LPS刺激细胞时 ,可见[Ca2 +]i呈短暂性升高 ,随后下降。结论TNF -α和LPS在极短的时间内导致BBBEC[Ca2 + ]i的升高 ,激活BBBEC ,这一过程是缺血性脑损伤极早期的重要病理机制之一。
- 蒲传强郝延磊田成林
- 关键词：血脑屏障内皮细胞钙离子肿瘤坏死因子Α脂多糖
