国家自然科学基金(30371564)
- 作品数：5 被引量：16H指数：3
- 相关作者：陈蔚文赵健孔峰吴伟芳王树成更多>>
- 相关机构：山东大学美国Sanford-Burnham研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 驱动蛋白Rbkinesin-6对人肺腺癌细胞系A549有丝分裂影响的研究被引量：4
- 2005年
- 目的:研究驱动蛋白Rbkinesin-6对人肺腺癌细胞系A549有丝分裂的影响。方法:采用Rbkinesin-6特异性esiRNA介导的RNAi技术,系统分析Rbkinesin-6对肺癌细胞系A549有丝分裂的影响。结果:Rbkinesin-6esiRNA可特异性地消除A549细胞Rbkinesin-6的表达,Rbkinesin-6缺失的细胞无法完成有丝分裂末期/胞质分裂,进而转变为双/多核细胞。结论:Rbkinesin-6在A549细胞有丝分裂末期/胞质分裂最后阶段起重要作用,Rbkinesin-6基因沉默可以抑制肺癌细胞的生长,为肺癌基因治疗的研究提供了新的思路。
- 赵健陈蔚文王树成朱长军张建业姜伟
- 关键词：驱动蛋白有丝分裂细胞分裂
- Monastrol对人肺腺癌细胞系A549有丝分裂影响的研究被引量：1
- 2006年
- 目的:探讨Monastrol对人肺腺癌细胞系A549有丝分裂的影响。方法:Monastrol处理A549细胞,免疫荧光染色观察细胞形态并计数,流式细胞术分析细胞周期变化。结果:Monastrol阻滞人肺腺癌细胞系A549有丝分裂于前中期,且分裂期细胞表现为单极纺锤体。结论:Monastrol影响肺癌细胞有丝分裂,抑制肺癌细胞生长,可用于肺癌药物治疗。
- 赵健陈蔚文王树成李希波
- 关键词：肺肿瘤MONASTROL有丝分裂
- 氯化钴诱导PC12细胞凋亡的分子机制被引量：7
- 2005年
- 目的确定氯化钴(CoCl2)诱导PC12细胞凋亡的分子机制。方法500μmolLCoCl2诱导PC12细胞24h后,检测活性氧(ROS)生成量的变化以及抗氧化剂N乙酰半胱氨酸(NAC)、二硫代苏糖醇(DTT)对细胞存活率和ROS生成量的影响;琼脂糖凝胶电泳检测NAC、DTT对CoCl2诱导PC12细胞DNA片段化的影响;利用RTPCR法检测凋亡相关基因bclxl和bax在PC12细胞调亡过程中的表达及NAC、DTT对基因表达的影响;化学发光法检测NAC、DTT对Caspase3表达的作用。结果在CoCl2诱导PC12细胞凋亡中,ROS生成量明显上升,为正常时的2.92倍;NAC、DTT可提高细胞存活率,由53.1%上升为94.8%和92.3%(P<0.01),并有效抑制ROS的生成,为正常时的24.2%和82.1%(P<0.01);同时抑制DNA片段化的发生。bclxl在细胞凋亡过程中表达明显下降,bax表达无明显变化;NAC和DTT可使bclxl的表达明显上升。Caspase3在细胞凋亡中被激活,NAC、DTT可抑制Caspase3的表达(P<0.01)。结论ROS介导了CoCl2诱导的PC12细胞凋亡,这一过程与抑制bclxl表达,激活Caspase3有关。
- 曾季平王立祥胡晓燕杨玲玲孔峰吴伟芳陈蔚文崔行
- 关键词：氯化钴PCI2细胞细胞凋亡活性氧
- esiRNA分析人源驱动蛋白MKLP1在胞质分裂中的功能被引量：1
- 2005年
- 为探讨人源驱动蛋白MKLP1在有丝分裂和胞质分裂中的作用,以E.coliRNaseⅢ制备MKLP1的3′UTResiRNA转染HeLa细胞,通过定量RTPCR、Western印迹检测MKLP1esiRNA对MKLP1基因的沉默效率.再利用FACS分析、免疫荧光染色和活细胞成像分析检测MKLP1表达缺失后在有丝分裂和胞质分裂不同时期的细胞形态学、细胞分裂指数、细胞百分数,动态观察有丝分裂和胞质分裂期间的表型改变,以系统分析MKLP1的功能.最后通过挽救实验验证MKLP1esiRNA的作用特异性.实验显示MKLP1esiRNA转染HeLa细胞能够有效地特异性消除MKLP1的表达,并被异位表达的MKLP1所挽救.MKLP1蛋白在有丝分裂后期和末期前期位于纺锤体中间带,在末期后期和胞质分裂的最后阶段集中于中间体的中心处.MKLP1表达缺失使中间体正确形成和胞质分裂的完成受到严重抑制,造成大量双多核细胞堆积.结果表明,MKLP1在胞质分裂中间体形成和有丝分裂末期前期向后期过渡过程中起关键作用,是纺锤体中间体中间带相关蛋白,为胞质分裂所必需.
- 陈蔚文赵健Changjun ZHU 孔峰吴伟芳张建业Wei JIANG
- 关键词：驱动蛋白胞质分裂WESTERN印迹定量RT-PCRE.COLI
