云南省应用基础研究计划面上项目(2007C138M)
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
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- 发文基金：云南省应用基础研究计划面上项目云南省科技厅-昆明医学院应用基础研究联合专项资金项目更多>>
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- 重组质粒hTERT-siRNA对胰腺癌细胞裸鼠皮下移植瘤生长抑制作用的研究
- 2010年
- 目的探讨重组质粒pSilencer4.1CMV neo-hTERT-siRNA对胰腺癌细胞BxPC-3裸鼠皮下移植瘤生长抑制作用.方法建立人原发性胰腺癌裸鼠皮下移植瘤模型,将荷瘤裸鼠随机分为4组:(1)肿瘤对照组,未作任何处理;(2)空载组,即pSilencer4.1-CMV neo空质粒组;(3)T1组,即重组质粒pSilencer4.1-CMV neo-hTERT1-siRNA组;(4)T2组,即重组质粒pSilencer4.1-CMVneo-hTERT2-siRNA组).荷瘤裸鼠分组处理30d后,检测移植瘤体积及瘤重,HE染色光镜观察各组裸鼠皮下移植瘤及各脏器组织形态学,电镜观测各组移植瘤组织超微结构变化.结果 T1组及T2组肿瘤体积及瘤重均明显小于肿瘤对照组和空载组(P<0.01).T1组、T2组移植瘤组织癌细胞密度减少,部分癌巢发生程度不等片状坏死.T1组和T2组BxPC-3细胞超微结构发生了明显变化,细胞表面微绒毛减少或消失,部分线粒体肿胀,同时见胞质密度增加,可见凋亡小体.结论重组质粒T1和T2均能在裸鼠体内有效抑制BxPC-3胰腺癌细胞皮下移植瘤的生长,促进胰腺癌细胞凋亡,具有体内抗胰腺癌的作用。
- 谭晶莫小华龙奎廖陈周小虎
- 关键词：胰腺癌重组质粒裸鼠移植瘤
- 重组质粒hTERT-siRNA对胰腺癌细胞移植瘤hTERT相关基因及蛋白表达的影响
- 2010年
- 目的探讨重组质粒pSilencer4.1CMV neo-hTERT-siRNA对胰腺癌细胞BxPC-3裸鼠皮下移植瘤hTERT相关基因及蛋白表达的影响.方法建立人原发性胰腺癌裸鼠皮下移植瘤模型,将荷瘤裸鼠随机分为4组:(1)肿瘤对照组,未作任何处理;(2)空载组,即pSilencer4.1-CMV neo空质粒组;(3)T1组,即重组质粒pSilencer4.1-CMV neo-hTERT1-siRNA组;(4)T2组,即重组质粒pSilencer4.1-CMV neo-hTERT2-siRNA组).荷瘤裸鼠分组处理30d后,RT-PCR检测各组瘤体中hTERT、Bcl-2、Bax mRNA的表达,免疫组织化学检测各组瘤体中Bcl-2、Bax、p53、VEGF、端粒酶蛋白表达,Western blot检测各组瘤体中端粒酶蛋白表达情况.结果 T1组和T2组hTERT和Bcl-2 mRNA表达较肿瘤对照组和空载组明显降低,BaxmRNA表达明显升高(P<0.01).与肿瘤对照组和空载组比较,T1组和T2组Bcl-2 Telomerase、p53和VEGF蛋白表达明显降低,Bax蛋白表达明显升高(P<0.01).结论 (1)重组质粒T1和T2能够下调裸鼠移植瘤体内抗凋亡基因hTERT mRNA、Bcl-2 mRNA和蛋白、p53和端粒酶蛋白表达水平,上调促凋亡基因Bax mRNA和蛋白表达水平,其抗胰腺癌作用可能与促进胰腺癌细胞凋亡有关.(2)重组质粒T1和T2能够显著下调裸鼠移植瘤体内VEGF蛋白表达水平,可能具有抑制肿瘤血管生成的作用。
- 谭晶卢永刚腾毅山黄洁周小虎
- 关键词：胰腺癌重组质粒裸鼠移植瘤
- 重组质粒pSilencer4.1CMV neo-hTERT-siRNA转染胰腺癌细胞BxPC-3及其沉默效应的研究被引量：2
- 2010年
- 目的研究重组质粒pSilencer4.1CMVneo-hTERT-siRNA转染胰腺癌细胞BxPC-3及其沉默效应。方法用重组质粒pSilencer4.1CMVneo-hTERT-siRNA转染BxPC-3胰腺癌细胞作为研究对象,实验分5组。T1组:pSilencer4.1CMVneo-hTERT1-siRNA;T2组:pSilencer4.1CMVneo-hTERT2-siRNA;Lipofectamine组:Lipofectamine;错配组:pSilence4.1CMV,作为阴性对照;细胞对照组:未做转染的细胞。RT-PCR检测hTERT基因表达,MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期及凋亡,Westernblot检测细胞端粒酶蛋白表达。结果与Lipofectamine组、阴性对照组及细胞对照组相比,T1组、T2组BxPC-3细胞中hTERT-mRNA和端粒酶蛋白的表达水平显著下降(P<0.05),BxPC-3细胞活力明显降低(P<0.05),G0/G1期细胞比例增高,S期和G2/M期细胞比例降低,细胞凋亡比例显著增加。结论重组质粒T1和T2能够下调hTERTmRNA和端粒酶蛋白的表达水平,具有良好的RNAi沉默效应。重组质粒T1和T2均明显抑制BxPC-3胰腺癌细胞的生长,使细胞周期发生阻滞,促进细胞凋亡,具有一定的体外抗胰腺癌作用。
- 谭晶孙敏莫小华陆启瑜周小虎
- 关键词：胰腺癌重组质粒
