国家自然科学基金(30872283)
- 作品数：3 被引量：13H指数：2
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- 人表皮黑素细胞与角质形成细胞体外共培养模型的构建被引量：5
- 2010年
- 目的:体外构建人表皮黑素细胞与角质形成细胞直接接触的共培养模型。方法:胰酶消化包皮的表皮,分别获取纯化的角质形成细胞和黑素细胞,将第3代角质形成细胞接种于培养瓶中,48 h后以1∶10(表皮黑素细胞∶角质形成细胞)的比例接种黑素细胞。结果:黑素细胞与角质形成细胞混合培养5 d后,培养瓶瓶底培养物逐渐变为浅灰色,继续培养,颜色逐渐加深;倒置显微镜下观察到黑素细胞与角质形成细胞共同存活,细胞生长良好,并通过树突发生联系。结论:成功构建了黑素细胞与角质形成细胞直接接触的混合培养模型,为进一步研究色素问题奠定了基础。
- 江蕾薇陆洪光
- 关键词：黑素细胞角质形成细胞
- 人角质形成细胞与MV3人黑素瘤细胞体外构建人工皮肤黑素瘤组织模型被引量：2
- 2011年
- 目的 用人角质形成细胞（KC）和MV3人黑素瘤细胞混合接种培养于去表皮的真皮（DED）,体外构建人工皮肤黑素瘤组织模型,探讨KC对黑素瘤侵袭性的影响.方法 用两步酶消化法处理小儿包皮,获得表皮细胞悬液,用KC无血清培养基培养并传代KC.用RPMI 1640培养基培养及传代MV3人黑素瘤细胞.分别取对数生长期KC、MV3人黑素瘤细胞制备细胞悬液.将KC、MV3人黑素瘤细胞悬液接种于DED表面（KC：MV3人黑素瘤细胞约为3：1）.采用液下培养和空气-液面培养相结合方式进行混合培养,2周后取出进行HE染色、S-100蛋白、HMB45及角蛋白免疫组化染色.结果 HE染色显示,MV3人黑素瘤细胞在DED表面形成条带状瘤团或瘤灶,KC间杂于瘤细胞间,未形成典型的表皮样结构;部分瘤细胞浸润到DED浅层,呈群聚性分布;瘤细胞侵入DED管腔内,呈环形附着于管壁上,部分瘤细胞穿过管壁进入周围真皮组织;在DED底面及侧面,瘤细胞呈单个细胞弥散状浸润分布.瘤灶S-100蛋白阳性表达,HMB45弱阳性表达,角蛋白阳性表达.结论 KC增强MV3人黑素瘤细胞在人工皮肤黑素瘤组织模型中的侵袭.
- 卜晓琳陆洪光
- 关键词：角蛋白细胞
- 角质形成细胞与黑素细胞体外构建含黑素的组织工程皮肤被引量：6
- 2011年
- 目的 探讨体外构建含黑素的组织工程皮肤.方法 采用两步酶消化法处理健康小儿包皮,获得表皮细胞悬液,分别用人角质形成细胞（KC）无血清培养基（SFM）及改良的M254黑素细胞培养基培养KC、黑素细胞（MC）,并传至第3代.将第3代KC接种于培养瓶中,48 h后加入第3代MC（MC：KC为1：10）混合培养.制备人去表皮的真皮（DED）,将培养第3代的MC、KC制成细胞悬液,按照1：10的比例接种于DED表面,采用液下培养和空气-液面培养相结合的方式进行培养,2周后取培养的组织工程皮肤分别做HE染色、角蛋白免疫组化染色及Masson-Fontana染色.结果 KC、MC混合培养于培养皿5 d后,于倒置显微镜下观察到KC呈铺路石状生长,其间散布MC,且树突延伸到KC细胞间.两种细胞混合接种于DED 15 d后,HE染色显示在DED上有3～6层表皮细胞,并可见角质层,角蛋白免疫组化染色阳性,银氨染色显示基底层见黑素着色.结论 MC、KC混合接种于培养皿可构建MC和KC接触生长的单细胞层,将MC、KC接种于DED可构建含有黑素成分的组织工程皮肤.
- 江蕾薇陆洪光蔡灵龙
- 关键词：黑素细胞角蛋白细胞
