宁波市自然科学基金(2010A610028)
- 作品数：8 被引量：32H指数：3
- 相关作者：严小军陈海敏王秀娟骆其君马建更多>>
- 相关机构：宁波大学宁波市医疗中心李惠利医院更多>>
- 发文基金：宁波市自然科学基金国家自然科学基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学轻工技术与工程更多>>
- 虾青素可能通过H^+传递功能保护NaN_3损伤的人胎肝L-02细胞被引量：10
- 2011年
- 观察虾青素(astaxanthin)对呼吸链复合体Ⅳ抑制剂叠氮钠(NaN3)损伤的人胎肝L-02细胞保护作用,并初步探讨其作用机制。100 mmol·L-1 NaN3用于构建肝损伤细胞模型,通过测定不同浓度虾青素(0.01、0.10、1.00及10.00 nmol·L-1)对损伤细胞存活率(MTT检测)、细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平(DCFH-DA检测)、细胞凋亡率(Annexin V-FITC/PI双染法)以及线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)水平(JC-1法)的影响,发现虾青素能抑制损伤细胞晚期凋亡;对细胞存活率和MMP的保护作用呈现先增加后降低的非剂量依赖性关系,其中0.10 nmol·L-1虾青素表现为较强的保护作用;实验浓度范围内的虾青素并不能显著降低细胞内ROS水平(P>0.05)。为进一步探讨虾青素对损伤细胞的保护作用,人工制备平面双层磷脂膜(planar bilayer lipid membrane,BLM)模拟线粒体膜,测定不同浓度虾青素(0.1%、2.0%、10.0%)对H+的传递能力。结果显示,虾青素对H+传递效率无剂量依赖性,中等浓度(2.0%)的虾青素能够较高效率地传递H+。结果提示,虾青素对NaN3损伤的人胎肝细胞的保护作用与其直接淬灭ROS的抗氧化功能无关,而可能是通过适当浓度下的虾青素对H+的高效传递进而维持线粒体膜电位实现的。
- 马建陈海敏严小军王峰徐炜烽
- 关键词：虾青素线粒体膜电位活性氧自由基
- 卡拉胶寡糖与bFGF的结合活性及其对乙酰肝素酶活性的抑制作用被引量：3
- 2011年
- 为探讨卡拉胶寡糖作为硫酸肝素类似物的抗肿瘤和抗血管新生机制,以宫颈肿瘤细胞HeLa和人脐静脉内皮细胞HUVEC为研究对象,考察几种不同聚合范围的寡糖结合bFGF及抑制乙酰肝素酶活性的作用。发现卡拉胶寡糖对正常细胞和肿瘤细胞均表现出低毒特征。在低浓度下,具有结合bFGF并能抑制bFGF引起的细胞增殖能力,其中λ-卡拉胶寡糖(聚合度2～8)效果最明显,在质量浓度为20μg.mL-1时,可达30%的抑制率。几种寡糖对乙酰肝素酶活性有不同趋势的抑制作用,在HeLa细胞中,λ-卡拉胶寡糖的抑制活性最高;在HUVEC细胞中,聚合度在9～17的κ-卡拉胶寡糖活性最高。结果表明,卡拉胶寡糖的类硫酸肝素生物活性与其分子量大小、硫酸取代量有明显的关系,低分子量、高硫酸基取代是其高活性的关键。
- 陈海敏高洋严小军
- 关键词：硫酸肝素抑制剂BFGF乙酰肝素酶
- 琼胶寡糖诱导坛紫菜活性氧爆发被引量：5
- 2012年
- 研究了琼胶寡糖诱导坛紫菜氧爆发的响应及其活性氧产生的位点。用琼胶寡糖诱导坛紫菜,以微呼吸测量系统检测坛紫菜氧消耗的变化;以对羟基苯乙酸(POHPAA)化学发光法检测坛紫菜的H2O2释放量;利用DCFH-DA染色观察活性氧在细胞上的定位;并利用实时定量PCR检测坛紫菜NADPH氧化酶基因Phrboh的差异表达;通过2-AMAC标记琼胶寡糖,观察其在坛紫菜的结合部位。结果显示,100μg/mL琼胶寡糖处理坛紫菜,出现两次呼吸爆发,分别在4min和10min左右,强度分别是基础呼吸的4倍和14.1倍;5min内出现H2O2的积累,15min达到峰值,比对照组高出近10倍。10μmol/LDPI可部分抑制H2O2的产生。3min内Phrboh的表达已上调,并持续近10min。DCFH-DA染色显示,活性氧主要产生在膜系统上。荧光标记琼胶寡糖的定位发现,坛紫菜细胞膜上存在琼胶寡糖的结合位点。综上所述,琼胶寡糖能识别细胞膜上的结合位点,并诱导坛紫菜膜系统上的H2O2爆发,H2O2的产生与NADPH氧化酶相关。
- 朱竹君陈海敏骆其君杨锐严小军王秀娟何山
- 关键词：坛紫菜琼胶寡糖NADPH氧化酶
- 多孔隙牡蛎贝壳粉的制备及功效研究被引量：2
- 2011年
- 目的:研究多孔隙牡蛎贝壳粉的生物功效。方法:采用高温煅烧制备多孔隙牡蛎贝壳粉,以柱层析除菌试验检测其除菌能力;以固相微萃取(SPME)技术结合GC-MS联机分析,检测贝壳粉对鱼肉中挥发性成分的影响。结果:用120目多孔隙牡蛎贝壳粉填直径为1.2cm的柱子,柱高为1cm时抑菌率可达82.3%,饱和时间50min时具有较强的除菌能力。脱臭前、后气味成分中烷烃类化合物峰面积减少率在80%以上。处理后3种海鱼鱼肉(小黄鱼、鲳鱼和带鱼)的挥发性物质中,二甲基甲胺的峰面积减少率分别为79.27%、100%和99.01%。结论:多孔隙牡蛎贝壳粉具有较强的除菌和脱臭能力,是一种有价值的生物过滤、除臭材料。
- 章璐陈海敏侯云丹严小军
- 关键词：煅烧抑菌脱臭GC-MS
- 离子对-反相高效液相色谱-三重四级杆质谱法测定λ-卡拉胶寡糖被引量：3
- 2013年
- 目的建立离子对-反相高效液相色谱(RPIP-HPLC)和电喷雾离子源-三重四级杆质谱(ESI-QqQ-MS)联用技术快速分离鉴定多阴离子λ-卡拉胶寡糖的方法。方法采用Hypersil GOLD C18色谱柱(100mm×2.1mm,3μm),流速0.2mL.min-1,柱温30℃,考察3种离子对试剂(庚胺、二丁胺、三丙胺)、不同离子对试剂浓度(3、5和8mmol/L)及流动相pH值(pH4.5、5.5、6.5)对λ-卡拉胶寡糖分离效果的影响。结果当流动相组成为5mmol.L-1庚胺乙酸盐水溶液(pH5.5)和5mmol.L-1庚胺乙酸盐甲醇溶液(pH 5.5)时,聚合度(DP)在2～15间的λ-卡拉胶寡糖分离效果较好,同时从相应的质谱数据中能准确获得各聚合度λ-卡拉胶寡糖的结构信息。结论该方法能较好地分离并鉴定多阴离子λ-卡拉胶寡糖,所得寡糖质谱信息对λ-卡拉胶寡糖的结构解析有借鉴作用。
- 上官巧灵陈海敏陈娟娟严小军
- 琼胶寡糖诱导菜豆活性氧相关防御及机理初探
- 以琼胶寡糖作为激发子处理菜豆叶片,研究其对菜豆的抗性反应及其机理。结果表明,100μg/ml的琼胶寡糖促进菜豆叶片下表皮保卫细胞释放H_2O_2和气孔关闭,并能显著提高脂氧合酶(LOX)活性(p<0.05),在3h达最高...
- 王秀娟陈海敏严小军
- 关键词：琼胶寡糖挥发性物质
- 文献传递
- 琼胶寡糖诱导菜豆活性氧相关防御及机理初探被引量：9
- 2011年
- 以琼胶寡糖作为激发子处理菜豆叶片,研究其诱导菜豆的抗性反应及作用机理。结果表明,100μg.mL-1的琼胶寡糖处理菜豆叶片下表皮,会促进菜豆叶片下表皮保卫细胞释放H2O2和气孔关闭。同时100μg.mL-1的琼胶寡糖喷施菜豆植株,能显著提高脂氧合酶(LOX)活性(P<0.05),在3h达最高,并检测到具有抑菌作用的挥发性物质2,3-butanedione、2-methyl-butanoic acid、1-octen-3-ol和junipene含量增加。综上所述,100μg.mL-1的琼胶寡糖激发菜豆产生活性氧,并产生抗菌物质,进而增强其防御抗性。
- 王秀娟陈海敏严小军
- 关键词：琼胶寡糖H2O2挥发性物质
- 坛紫菜菌解液对植物生长和抗性指标的影响被引量：1
- 2011年
- 利用琼胶降解菌处理坛紫菜粉末,降解其细胞壁多糖,释放内容物,并获得菌解液,研究不同稀释度坛紫菜菌解液对受体植物蚕豆出芽和生长,以及大豆和番茄幼苗抗性相关指标的影响.结果显示:(1)随琼胶降解菌处理时间的延长,菌解液中还原糖含量逐渐增高.(2)3.33%的菌解液对蚕豆种子萌芽促进效果最好,而2%的菌解液能增加蚕豆叶绿素含量,促进其幼苗生长.(3)3.33%的菌解液能有效提高大豆离体子叶的植保素含量,迅速增加番茄叶片表皮条的H2O2的释放量,提高苯丙氨酸解氨酶活性.研究表明,琼胶降解菌能使坛紫菜细胞壁中的营养物质释放,并产生某些激发物质,从而使坛紫菜菌解液能够促进受体植物的种子发芽和幼苗生长,并能有效诱导植物的抗性.
- 骆其君陈海敏严小军
- 关键词：坛紫菜种子萌芽植保素苯丙氨酸解氨酶
- Fascaplysin抑制ICR小鼠体内S180移植瘤的分子机制初探被引量：1
- 2012年
- 目的研究fascaplysin对ICR小鼠S180移植瘤生长的体内抑制作用,并初步探讨fascaplysin在体内抑瘤的分子机制。方法皮下注射技术建立荷S180骨肉瘤的ICR小鼠为实体瘤动物模型,然后将其分为4组:即空白对照组(注射生理盐水)、阳性对照组[CTX,30mg/(kg.d)]、fascaplysin高剂量组[20mg/(kg.d)]和fascaplysin低剂量组[5mg/(kg.d)],处理10天后,利用电镜分析各组小鼠移植瘤细胞的变化,应用免疫组化技术检测相应组织PCNA、CD31表达情况。结果电镜结果显示肿瘤组织细胞出现凋亡现象。PCNA结果发现,fascaplysin治疗组与空白对照组相比差异极显著(P<0.01),高、低剂量组之间差异显著(P<0.05),具有一定程度的剂量-效应依赖性。MVD结果:与空白对照组相比,fascaplysin各剂量组肿瘤组织内MVD均明显减少(P<0.01)。结论 Fascaplysin治疗能诱导肿瘤细胞凋亡,减少肿瘤组织PCNA的表达,降低肿瘤的增殖活性。减少肿瘤组织微血管的密度,抑制肿瘤血管的新生。提示fascaplysin在体内具有良好的抗肿瘤作用。
- 徐炜烽王峰陈海敏卢晓玲严小军
- 关键词：CD31
