国家微生物菌种资源平台项目(2005DKA21204-10)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 相关作者：路福平高艳玲杨迪向先长李玉更多>>
- 相关机构：天津科技大学齐齐哈尔大学巴彦淖尔市环境监测站更多>>
- 发文基金：国家微生物菌种资源平台项目天津市应用基础与前沿技术研究计划更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 黑曲霉脯氨酸蛋白内肽酶基因的克隆及其在酵母中的表达被引量：2
- 2009年
- 以A.niger TCCC41013总RNA为模板,通过RT-PCR扩增含自身信号肽的脯氨酸蛋白内肽酶基因pep,将其克隆到pUCm-T载体上进行测序。测序结果表明基因全长1581bp,共编码526个氨基酸,包括22个氨基酸的信号肽序列和504个氨基酸的成熟肽序列。通过生物信息学方法对蛋白质的理化性质进行分析预测,脯氨酸蛋白内肽酶等电点为4.43,具有丝氨酸活性中心,属丝氨酸羧肽酶S28家族。以重组质粒pUCm-T-pep为模板,通过PCR扩增去除自身信号肽的pep,构建毕赤酵母表达栽体pPIC9-pep,电转酵母宿主菌GS115。SDS-PAGE分析显示表达产物的分子量为60000Da左右,酶特异性底物法测定酶活力最高可达2275.4 mU/mL。
- 向先长杨迪路福平高艳玲李玉
- 关键词：黑曲霉毕赤酵母
- 黑曲霉脯氨酸蛋白内肽酶基因的克隆与序列分析被引量：1
- 2008年
- 以黑曲霉(A.niger)TCCC41013的总RNA作为模板,通过RT-PCR扩增出含自身信号肽的脯氨酸蛋白内肽酶基因,将其插入pUCm-T载体上,经PCR和酶切鉴定后进行测序并分析。所克隆的PEP基因全长为1 581bp,编码526个氨基酸残基,成熟肽为504个氨基酸残基。与GeneBank中已报道的A.niger CBS513.88的PEP序列同源性最高,达到99.75%。脯氨酸蛋白内肽酶是一种新型的丝氨酸蛋白酶,黑曲霉PEP与已克隆的其他菌种的PEP同源性不高。
- 杨迪高艳玲路福平周丽娜
- 关键词：黑曲霉克隆
- 肉色曲霉产碱性脂肪酶发酵条件的研究
- 2011年
- 对肉色曲霉产碱性脂肪酶的发酵条件进行优化,摇瓶实验表明,该菌株最适产酶培养基组成为(%):黄豆饼粉2,NH4NO3 0.5,玉米粉1,糊精1,柠檬酸钠0.1,K2HPO4 0.5,FeSO4 0.006,大豆油0.6,吐温-800.5mL,pH 9.0.最适产酶温度为28℃,产酶高峰出现在96小时,最佳装液量为35mL,碱性脂肪酶菌株的酶活可达9.3U/mL.脂肪酶的最适作用pH为9.0,最适作用温度为30℃.
- 王晓娟王海宽刘瑞娟刘昕木兰
- 关键词：碱性脂肪酶发酵条件
