国家科技支撑计划(2006BAI06A11-06)
- 作品数：8 被引量：51H指数：5
- 相关作者：周日宝童巧珍刘湘丹盛孝邦王朝晖更多>>
- 相关机构：湖南中医药大学湖南农业大学中南林业科技大学更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划湖南省中医药管理局资助项目湖南省教育厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 药用百合DNA提取和RAPD条件的优化被引量：6
- 2008年
- 目的确定药用百合最佳随机扩增多态DNA(RAPD)分析方法。方法以药用百合新鲜鳞叶为材料,研究DNA的提取方法,并对影响RAPD反应的各因素进行优化。结果药用百合RAPD反应体系及程序为:在40μL反应体系中,含40 ng模板DNA,0.3μmol/L随机引物,0.2 mmol/L dNTPs,1.7 mmol/L Mg2+,3μL 10×PCRBuffer,1.5 U Taq酶;扩增程序为:第一步94℃预变性2 min,第二步94℃变性1 min,第三步36℃退火45 s,第四步72℃延伸90 s,返回至第二步重复40个循环,第六步72℃延伸10 min,最后4℃保存以备电泳。结论建立了药用百合RAPD的优化反应体系及程序。
- 童巧珍盛孝邦刘湘丹周日宝吴佳
- 关键词：DNA提取RAPD
- 玉竹ISSR反应体系的优化被引量：1
- 2008年
- 目的建立稳定性高、重复性好的适合玉竹ISSR-PCR扩增的反应体系。方法以玉竹根茎为材料,采用改良的CTAB法提取玉竹基因组DNA,并利用单因素多水平试验,分别对模板DNA、引物、Mg2+、Taq酶、dNTP的浓度和退火温度进行考察。结果玉竹的最佳反应体系为:在20μL的反应体系中,含1×buffer、15 ng模板DNA、0.4μmol/L引物、2 mmol/L Mg2+、1.0 U Taq酶、200μmol/L dNTP。此反应体系以52℃的退火温度扩增出来的玉竹电泳图谱清晰,重复性好。结论本实验反应体系适宜于玉竹ISSR-PCR的扩增,为玉竹下一步分子生物学的研究打下基础。
- 陈玉秀周日宝潘清平姜傲芳吴佳童巧珍
- 关键词：玉竹反应体系优化
- HPLC法测定药用百合中薯蓣皂苷元的含量被引量：9
- 2009年
- 目的用HPLC法测定不同来源百合中薯蓣皂苷元的含量。方法采用Phenomenex ODS(4.6 mm×250mm,5μm)色谱柱,乙腈-水梯度洗脱,流速为0.7 mL/min,进样量为20μL,检测波长为203 nm,柱温为30℃。结果薯蓣皂苷元的进样量在0.04～1.60μg范围内与峰面积呈良好的线性关系。平均回收率为98.2%,RSD为2.1%(n=6)。结论该法操作简便、准确、灵敏度高,可作为药用百合质量控制的定量方法。
- 史艳霞周日宝童巧珍任旻琼王珊王晓明
- 关键词：百合薯蓣皂苷元高效液相色谱法
- 百合鳞叶DNA提取及RAPD分析被引量：3
- 2010年
- 以百合新鲜鳞叶为材料,利用RAPD分子标记对来自我国5省共16份百合样品进行了分析。结果表明:采用改良CTAB法提取百合鳞叶中DNA条带清晰较,且从120条随机引物中筛选出35条有效引物,共得到769个扩增位点,其中628个位点具有多态性,占81.7%。聚类分析表明,16个百合材料在阈值为0.940 7时分为2个RAPD群,即分别属于百合科的百合属和大百合属;阈值为0.579 0时,百合属分为3个种,即分别为百合、卷丹和细叶百合。这些均可为进一步研究百合的分子生物学特性打下基础,为鉴定中药材百合品种品系的新方法提供充分的实验依据。
- 童巧珍周日宝刘湘丹盛孝邦王朝晖
- 关键词：分子生物学百合DNARAPD
- 百合种质资源的生物学特性研究被引量：8
- 2010年
- 为合理利用百合种质资源,采用引种栽培、大田调查的方法,对百合生育期和形态特征进行观测.结果表明,不同产地引种的百合出苗期、现蕾期、花期和生长量变化均不相同,湖南省隆回县的龙牙百合出苗最早;衡山县的野生百合现蕾最早;卷丹花期可延续至8月中旬.百合生长有2种类型:一种是前期快速生长,现蕾后生长减慢,或趋于停止;另一种是开花前后一直缓慢生长.卷丹和百合种间差异较大,但百合种内、卷丹种内差异较小,且比较稳定,说明种质间的变异大于种质内的变异.
- 童巧珍周日宝盛孝邦刘湘丹王朝晖任旻琼
- 关键词：百合种质资源生物学特性
- 百合种质资源遗传多样性及亲缘关系的RAPD分析被引量：5
- 2009年
- 以百合新鲜鳞叶为材料,利用RAPD分子标记技术对16份不同生态型的百合种质的遗传多样性和亲缘关系进行了分析。研究结果表明,从120条随机引物中筛选出35条有效引物,共得到769个扩增位点,其中628个位点具有多态性,占81.7%。UPGMA聚类分析结果表明,16份百合种质在阈值为0.9407处分为2个聚类群,即百合科两个不同属的植物:百合属和大百合属;阈值为0.5790处,百合属被分为3个不同的种:百合、卷丹和细叶百合。聚类结果和亲缘关系分析表明不同供试百合之间的遗传多样性较高,亲缘关系较远,且各种质遗传距离与地理距离具有一定的相关性。
- 童巧珍周日宝盛孝邦刘湘丹王朝晖刘笑蓉谭周进
- 关键词：百合种质资源RAPD
- 玉竹不同品种的ISSR分子鉴定被引量：20
- 2008年
- 目的:探索ISSR分子标记技术对玉竹的主要栽培品种、野生种及易混淆品黄精进行鉴定的新方法。方法:采用优化的ISSR-PCR体系,筛选出能扩增明显多态性条带的引物对样品进行扩增和凝胶电泳分析,并依遗传距离构建分子聚类图。结果:10个引物共扩增出125个DNA片段,其中116个片段呈现多态性,多态带百分率为92.9%。玉竹品种间存在较大的遗传多样性,栽培品种与野生种及易混淆品黄精易于区分。结论:本实验所建立的ISSR分子标记方法可用于玉竹的品种鉴定和良种选育研究。
- 潘清平周日宝陈玉秀王珊张党权谭晓风
- 关键词：玉竹ISSR
- HPLC测定湖南省地产百合中薯蓣皂苷元含量
- 2009年
- 目的测定百合药材中薯蓣皂苷元的含量。方法Phenomenex C18色谱柱（4.6×250mm,5μm）;流速：0.7ml/min;柱温：30℃;检测波长：203nm;流动相：乙腈-水梯度洗脱。结果薯蓣皂苷元线性范围为0.04μg～1.60μg,r=0.9988,回收率为98.16%,RSD为2.07%。结论本方法灵敏、准确,可用于百合药材的质量控制。
- 黄山林童巧珍周日宝王朝晖史艳霞任旻琼王珊刘湘丹
- 关键词：HPLC百合薯蓣皂苷元
