广州市科技攻关项目(2004Z1-E0031) 作品数:3 被引量:26 H指数:3 相关作者: 欧阳钧 邱小忠 赖桂华 余磊 焦培峰 更多>> 相关机构: 南方医科大学 太原理工大学 更多>> 发文基金: 广州市科技攻关项目 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
分化抑制因子Id2在骨骼肌再生中的作用研究进展 被引量:3 2007年 目的综述分化抑制因子2(inhibitor of differentiation2,Id2)在骨骼肌再生中的作用研究进展。方法广泛查阅近年来Id2生物学特性及其在骨骼肌再生中的作用相关文献,并综合分析。结果Id2通过结合E蛋白形成异二聚体,阻止生肌调节因子(myogenic regulatory factors,MRFs)与E蛋白结合而抑制MRFs的转录活性,抑制骨骼肌细胞分化。结论Id2在骨骼肌再生中起着重要作用。 赖桂华 邱小忠 欧阳钧关键词:骨骼肌 周期性机械拉伸对C2C12成肌细胞增殖的影响 被引量:13 2006年 目的:探讨不同的周期性拉伸应变条件对C2C12成肌细胞增殖的影响。方法:周期性拉伸的各种力学条件通过BioFlex加载系统实现,采用应用流式细胞术和BrdU法对拉伸应变下的细胞增殖动力学变化进行分析,反映成肌细胞增殖情况。结果:不同的周期性机械拉伸条件影响C2C12细胞的增殖,拉伸的频率对C2C12细胞增殖有较大的影响。在0.5Hz拉伸频率下,2.5%、5%和10%的细胞变形幅度都不能促进细胞的增殖,其中10%(0.5Hz)的拉伸幅度抑制C2C12成肌细胞的增殖;而在0.125Hz拉伸频率下,10%的细胞变形幅度明显地促进C2C12成肌细胞的增殖。结论:较低的拉伸频率有利于成肌细胞的增殖,高频率的拉伸抑制成肌细胞的增殖。 邱小忠 李小娜 陈维毅 余磊 廖华 焦培峰 赖桂华 欧阳钧关键词:细胞增殖 流式细胞术 氧化应激对C2C12成肌细胞增殖与凋亡的影响 被引量:12 2007年 目的:利用过氧化氢作为外源性活性氧来源,探讨氧化应激对C2C12成肌细胞增殖与凋亡的影响。方法:实验于2005-10/2006-01在广东省组织构建与检测重点实验室完成。C2C12成肌细胞(美国ATCC,批号CRL-1722TM);过氧化氢(汕头市光华化学药厂,批号20050519)。①C2C12细胞置于含100mg/L青霉素,100mg/L链霉素和体积分数为0.1胎牛血清的DMEM-F12培养基中常规培养。②采用四甲基偶氮唑盐法测定过氧化氢对C2C12细胞增殖的影响。取体外培养的C2C12细胞,胰酶消化后制成单细胞悬液,离心重悬,血细胞计数板进行细胞计数,细胞悬液密度为3.4×106L-1,接种至96孔板,200 μL/孔。实验共分5组:过氧化氢25,50,100,300 μmol/L浓度组、空白对照组,6个平行孔/组。各组在37℃、体积分数为0.05的CO2细胞培养箱内常规培养。待细胞融合率达80%且未出现细胞分化时,过氧化氢各浓度组分别向C2C12细胞中加入含对应浓度过氧化氢的无血清培养基,空白对照组则向C2C12细胞中加入单纯无血清培养基。各组细胞分别于过氧化氢处理0,6,12,24,36,48,60h后,每孔加入2g/L的四甲基偶氮唑盐液20μL,于酶联免疫仪570nm处检测各孔吸光度值。③过氧化氢对C2C12细胞凋亡的影响:采用Hoechst 33342/PI双染检测C2C12细胞凋亡。正常细胞核Hoechst着色为淡蓝色,形态呈圆形,内有较深的蓝色颗粒;中早期凋亡细胞核Hoechst着色呈亮蓝色,或核呈分叶,碎片状,边集;坏死或晚期凋亡的细胞核PI着红色,Hoechst因细胞膜破裂而不能着色。取体外培养的C2C12细胞,制备单细胞悬液过程同上,按1.8×107L-1密度接种至6孔板,5mL/孔。实验分组及干预措施同上,3个平行孔/组。处理36h后立即进行Hoechst33342/PI凋亡双染,荧光倒置显微镜下观察,各组随机取6个不同视野进行细胞计数,计数实验重复3次,取平均值作为细胞凋亡率。结果:①过氧化氢对C2C12细胞增殖的影响:细胞处理36h后 赖桂华 邱小忠 余磊 焦培峰 陆云涛 欧阳钧关键词:过氧化氢 成肌细胞 细胞凋亡