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利用昆虫杆状病毒表达系统表达人KCTD9蛋白: 2010年; 目的应用杆状病毒表达系统在昆虫细胞(sf9细胞)中表达人KCTD9蛋白,以进行其功能学研究。方法从pMD18-T-hKCTD9质粒中扩增hKCTD9全长基因片段,连接至pENTR/D-TOPO载体,将pENTR/D-TOPO-hKCTD9质粒与线形杆状病毒DNA在体外重组后,转染易感细胞系昆虫sf9细胞。采用免疫共聚焦和WesternBlot法分析融合蛋白的表达;在电子显微镜下观察病毒颗粒的形成。结果凝胶电泳分析hKCTD9基因存在于各载体中;激光免疫共聚焦显微镜证实感染重组杆状病毒的sf9细胞核内可见绿色荧光,提示目的基因表达正确;WesternBlot进一步显示hKCTD9蛋白大小约为55KD;透射电子显微镜观察发现被感染的sf9细胞核涨大、透亮,核内清晰可见大量的杆状病毒颗粒。结论 hKCTD9在昆虫杆状病毒表达系统中被成功表达,为进一步功能学研究奠定了基础。; 徐莉杨道锋陈韬苏凯宁琴; 关键词：重组杆状病毒 SF9细胞融合蛋白

MHV-3诱导暴发型肝衰竭小鼠肝组织细胞因子表达的变化被引量：4: 2010年; 目的研究病毒感染所致急性肝衰竭小鼠细胞因子的变化。方法利用MHV-3病毒诱导Balb/cJ小鼠暴发型肝炎模型;采用ELISA法测定外周血和肝脏IFN-γ和TNF-α水平。结果随着MHV-3感染时间的延长,动物外周血和肝组织IFN-γ和TNF-α水平逐渐增高,在小鼠死亡时达到高峰。结论 IFN-γ和TNF-α可能参与了MHV-3诱导的暴发型肝炎肝脏损伤的发病过程。; 陈韬朱琳邹勇宁琴; 关键词：暴发型肝炎 MHV-3 细胞因子

慢性丙型肝炎患者PBMC TBK1s表达被引量：1: 2011年; 目的探讨蛋白激酶TBK1s在慢性丙型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)的表达及其意义。方法采用实时荧光定量PCR法检测21例慢性丙型肝炎患者PBMC蛋白激酶TBK1、其剪接变体TBK1s和β-干扰素(IFN-β)水平。结果慢性丙型肝炎患者PBMC TBK1s水平显著性高于健康对照人群;经干扰素治疗的慢性丙型肝炎患者PBMC TBK1s表达与健康人比无显著性差异。结论 TBK1s水平与慢性丙型肝炎病毒感染相关。; 李维娜韩梅芳宁琴; 关键词：慢性丙型肝炎外周血单个核细胞荧光定量PCR

鼠三型肝炎病毒诱导不同小鼠肝炎模型肝脏自然杀伤细胞基因差异表达谱研究: 2010年; 目的:研究重型肝炎和轻、中度慢性肝炎肝脏NK(自然杀伤)细胞基因表达谱的差异,探讨重型肝炎和慢性肝炎疾病中NK细胞的生物学功能。方法:采用MHV-3(鼠三型肝炎病毒)诱导的Babl/cJ小鼠暴发型肝炎模型和C3H/Hej小鼠感染慢性化模型,利用Affymetrix小鼠全基因组芯片检测两种小鼠模型肝脏NK细胞的基因表达谱差异。结果:在小鼠45038条全基因组探针中,有3708条表现上调,有统计学意义的有736条,同时有4509条基因表现下调,有统计学意义的有866条。较之感染慢性化模型,在暴发型肝炎中上调的基因主要集中在物质代谢过程、细胞活动调节过程、细胞相互作用过程以及免疫学过程。较之暴发型肝炎模型,感染慢性化模型上调的基因主要集中在特异性免疫过程、细胞凋亡过程、癌症发生过程以及纤维组织增生过程等。结论:NK细胞参与MHV-3诱导的暴发型肝炎和慢性肝炎的发生发展过程,但与之相对应的,NK细胞也参与持续感染过程的慢性化的疾病过程中,其内在机制值得进一步探讨。; 陈韬邹勇朱琳宁琴; 关键词：暴发型肝炎肝炎慢性化自然杀伤细胞基因芯片

HBx对感染细胞信号通路的调控及其与肝癌的发生被引量：1: 2009年; 乙型肝炎病毒（HBV）X基因及其编码的多功能蛋白HBx是乙型肝炎病毒基因转录所必需的作用因子。同时，HBx通过与宿主功能蛋白直接或间接地相互作用而调节多种蛋白的功能，参与调控多条细胞信号通路转导，激活多种转录因子，在肝细胞抗凋亡和引发肝癌的过程中起重要作用。; 周玉沈关心; 关键词：HBX蛋白信号通路肝癌

趋化因子在HBV感染发病中的作用: 2009年; 乙型肝炎是一种以局部炎性为主的感染性疾病，乙型肝炎病毒（HBV）感染宿主细胞后可诱导宿主细胞中趋化因子分泌及其受体表达，趋化因子／受体的相互作用进一步介导中性粒细胞、淋巴细胞等向炎症部位聚集，参与组织损伤；同时诱导T、B细胞分化成熟，对乙型肝炎的发展与转归、肝组织的损伤与修复有重要影响。HBV引发的慢性乙型肝炎（CHB）以Th1细胞性炎性反应为主，研究表明乙型肝炎中某些趋化因子在肝脏高表达，其受体CXCR3和CCR5在Th1细胞高表达。趋化因子尤其是CXC和CC亚家族趋化因子在趋化Th1细胞中发挥重要的作用：; 靳冠楠周玉沈关心; 关键词：趋化因子乙型肝炎病毒慢性乙型肝炎

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国家重点基础研究发展计划(2007CB51290)