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国家自然科学基金(30671827)

作品数:3 被引量:19H指数:1
相关作者:杨明夏朱昌亮马磊徐阳徐进梅更多>>
相关机构:南京医科大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金国家科技基础条件平台建设计划海外青年学者合作研究基金更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 3篇中文期刊文章

领域

  • 2篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白酶
  • 1篇定量PCR
  • 1篇多克隆
  • 1篇多克隆抗体
  • 1篇胰蛋白酶
  • 1篇荧光
  • 1篇荧光定量
  • 1篇实时荧光
  • 1篇实时荧光定量
  • 1篇实时荧光定量...
  • 1篇数据分析
  • 1篇数据分析方法
  • 1篇抗体
  • 1篇克隆
  • 1篇分析方法
  • 1篇PHYLOG...
  • 1篇TRY
  • 1篇ELISA
  • 1篇GENE

机构

  • 2篇南京医科大学

作者

  • 2篇马磊
  • 2篇朱昌亮
  • 2篇杨明夏
  • 1篇刘正霞
  • 1篇孙艳
  • 1篇李秀兰
  • 1篇徐进梅
  • 1篇徐阳

传媒

  • 1篇南京医科大学...
  • 1篇Journa...
  • 1篇中国人兽共患...

年份

  • 1篇2009
  • 2篇2007
3 条 记 录,以下是 1-3
排序方式:
不同引物及数据分析方法对定量PCR结果的影响被引量:17
2009年
目的:研究不同引物及数据分析方法对实时荧光定量PCR SYBR Green染料法检测基因表达差异结果分析的影响。方法:通过Primer Express 2.0软件对目的基因CCND1、C-JUN分别设计4对不同引物进行SYBR Green染料法定量PCR扩增,并分别使用2-△△CT法、Pfaffl法及相对标准曲线法计算肺癌紫杉醇敏感细胞株及耐药细胞株间目的基因的表达差异,分析不同引物和数据计算方法对实验结果的影响。结果:统计学分析表明,引物的扩增效率对定量PCR结果分析有显著影响,不同引物特异性扩增得到的样本间表达倍数有显著差异(P<0.05)。3种计算方法中,Pfaffl法与相对标准曲线法无统计学差异(P>0.05),而2-△△CT法与其他2种方法均有显著差异(P<0.05)。结论:引物的选择对于定量PCR结果有显著影响;Pfaffl法是更准确,更合理的相对定量计算方法。
刘正霞徐阳徐进梅杨明夏马磊朱昌亮
关键词:实时荧光定量PCR
抗牛胰蛋白酶(TRY)抗体的制备和对杀虫剂抗性的初步检测被引量:1
2007年
目的制备抗牛胰蛋白酶(TRY)多克隆抗体检测杀虫剂抗性,为建立蚊媒菊酯类杀虫剂抗性的现场检测方法奠定基础。方法用牛TRY配成200mg/mL的储备液,与弗氏完全佐剂等体积混合均匀后,按照每只BALB/c小鼠20μg的量背部皮下多点注射,每隔15d加强免疫1次。25d后尾部采血,用ELISA方法测定抗体滴度。45d后眼球采血分离血清,标记分装冷藏备用。用此抗体Western blot研究抗性和敏感品系淡色库蚊成蚊粗提蛋白,观察显色结果。结果所得多克隆抗体小鼠抗牛TRY抗血清滴度达到1:10000,ELISA重复性稳定。在抗TRY抗血清组抗性品系出现约28kD大小的显色带。结论成功制备小鼠抗TRY多克隆IgG抗血清,其检测蚊虫抗性是可行的,值得进一步研究。
马磊杨明夏孙艳李秀兰朱昌亮
关键词:多克隆抗体胰蛋白酶ELISA
Cloning and sequence analysis of β-actin gene from Aedes albopictus (Diptera: Culicidae)被引量:1
2007年
Objective: To obtain the complete β-actin gene from Aedes albopictus. Methods: Total RNA was extracted from C6/36 cells. Degenerate primers were designed based on the β-actin sequences of An. gambiae, Ae. aegypti, Cx. pipiens pallens and D. melanogaster. By RT-PCR, the product was amplified, purified, cloned into the pGT vector and sequenced. The β-actin sequence was aligned and phylogenetically analyzed by the BLAST program and the CLUSTAL W program. Results: A sequence of 1132 bp including an open reading frame of 1131 bp was obtained (GenBank DQ657949). The deduced protein had 376 amino acids. Aligned to SWISS-PROT, it exhibited a high level of identity with β-actins from Anopheles, Drosophila and Culex at the amino acid sequence level. Phylogenetic analysis indicated that Ae. albopictus β-acfin was much more homologous with invertebrate β- actin than with vertebrate β-actin. Conclusion: The gene may be used as the internal control in the experiments of Ae. albopictus.
Weijie Wang Xiaobang Hu Donghui Zhang Jianhua Jiao Yan Sun Lei M' Changliang Zhu
关键词:Β-ACTINCLONEPHYLOGENY
共1页<1>
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