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国家自然科学基金(81171518)
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5
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骆丹
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沉默miRNA-23a对UVB诱导成纤维细胞慢性光损伤的影响
被引量:1
2014年
目的 探讨沉默miRNA-23a对UVB照射所致成纤维细胞慢性光损伤的影响。 方法 将成纤维细胞分为空白对照组、UVB光损伤组、miRNA-23a 沉默组、UVB光损伤 + miRNA-23a沉默组。SA-β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)化学染色测定老化程度,流式细胞仪检测细胞周期,实时PCR法检测p53、p16、p21 mRNA的表达,免疫印迹法检测p53、p16、p21的蛋白表达量。 结果 UVB光损伤组与UVB光损伤 + miRNA-23a沉默组的SA-β-Gal细胞蓝染阳性率分别为(94.60 ± 2.58)%、(48.18 ± 3.70)%,两组间差异有统计学意义(P 〈 0.05)。G1期阻滞率分别为(85.06 ± 1.52)%、(57.48 ± 2.01)%,两组间差异有统计学意义(P 〈 0.05)。UVB光损伤 + miRNA-23a沉默组的p53、p16、p21 mRNA及蛋白表达量与UVB光损伤组相比,差异均有统计学意义(P 〈 0.05)。 结论 沉默miRNA-23a对UVB诱导成纤维细胞衰老有抑制作用,而miRNA-23a对下游衰老相关信号分子的抑制可能是其机制之一。
张家安
周炳荣
胡燕燕
吴维
尹慧彬
张倩
郭娴菲
骆丹
关键词:
成纤维细胞
微RNAS
细胞衰老
芒果苷抑制中波紫外线诱导人成纤维细胞提前衰老的相关研究
被引量:1
2014年
目的研究芒果苷是否对反复亚毒性剂量中波紫外线(UVB)诱导的人二倍体成纤维细胞的早衰起抑制作用及其可能的机制。方法实验分成空白对照组(不做处理),UVB-应激诱导的提前衰老(sIPS)组(单纯照光),芒果苷4.0mg/L组(单纯加药),UVB+芒果苷1.0mg/L组、UVB+芒果苷2.0mg/L组、UVB+芒果苷4.0mg/L组(UVB照射联合药物处理)。成纤维细胞经5次UVB10mJ/cm2照射后,用细胞计数法(CCK8法)检测细胞增殖活性,B半乳糖苷酶染色(SA—β—Gal)计算衰老细胞百分比,流式细胞仪测定细胞周期,蛋白印迹检测衰老相关蛋白p53、p21、p16含量,实时荧光定量PCR(RT—PCR)检测基质金属蛋白酶1(MMP1)、基质金属蛋白酶3(MMP3)、I型胶原、Ⅲ型胶原mRNA和衰老相关基因p53、p21、p16mRNA表达。采用单因素方差分析进行数据统计分析。结果UVB+芒果苷1.0mg/L组、UVB+芒果苷2.0mg/L组、UVB+芒果苷4.0mg/L组以及UVB—SIPS组细胞增殖活性(A450)依次为0.3229±0.0113、0.3361±0.0163、0.3426±0.0144、0.2882±0.0207(F=110.08,P〈0.05),B半乳糖苷酶染色阳性率依次为(88.83±4.54)%、(46.33±5.51)%、(32.17±6.05)%、(93.67±3.75)%(F=283.54,P〈0.05;与UVB—SIPS组比较,除UVB+芒果苷1.0mg/L组外,其他两组均P〈0.05);G1期细胞阻滞率依次为(72.19±3.42)%、(60.99±2.70)%、(49.80±2.10)%、(82.09±0.89)%(F=156.01,P〈0.05)。与UVB—SIPS组相比,UVB+各浓度芒果苷组细胞MMP1和MMP3mRNA表达降低(F=69.41、106.41。均P〈0.05),I型胶原和Ⅲ型胶原mRNA表达增加(F=66.41、46.81,除UVB+芒果苷1.0mg/L组P〉0.05外,其他各组均P〈0.05),衰老相关基因p53、p21、p16mRNA表达降低(F=265.60、151.82、329.85,均P〈0.05),衰
胡燕燕
赵宏伟
周炳荣
方晓波
骆丹
吴志韵
尹慧彬
吴维
张家安
关键词:
紫外线
成纤维细胞
芒果苷
细胞衰老
棕榈酸对HaCaT细胞增殖及产生炎症因子的影响
被引量:1
2013年
目的探讨棕榈酸对HaCaT细胞增殖及产生炎症因子的影响。方法将不同浓度棕榈酸(0、25、50、75、100、125、150、175、200μmol/L)刺激HaCaT细胞3~24h,用细胞计数试剂盒CCK8检测HaCaT细胞增殖情况。选取一定浓度棕榈酸(0、75、100、125、150μmol/L)刺激HaCaT细胞24h后,分别用免疫组化荧光染色法在共聚焦显微镜下观察核因子(NF)-κBp65细胞核转位情况。酶联免疫吸附试验检测细胞培养上清液中自介素6(IL-6)分泌量,实时PCR法检测过氧化物酶增殖体激活受体(PPARa)mRNA及IL-6mRNA的表达,免疫印迹法检测PPARa、总蛋白NF—κBp65及核蛋白NF—κBp65表达量。用GraphPadPrism5,0软件进行单因素方差分析。结果与空白对照组相比,50~175μmoVL棕榈酸均可刺激HaCaT细胞增殖(均P〈0.05)。75、100、125、150μmol/L棕榈酸可剂量依赖性增强HaCaT细胞NF—κBp65向细胞核内转位,各浓度组核蛋白的相对表达量分别为0.4536±0.0173、0.5184±0.0206、0.5333±0.0231、0.6160±0.0297,与空白对照组相比,差异有统计学意义(均P〈0.01)。PPARamRNA及其蛋白产物、IL~6mRNA及分泌量呈剂量依赖性增加,各浓度组IL-6分泌量分别为(31.5677±0.2268)、(32.3773±0.4156)、(32.9837±0.0029)、(33.6890±0.0936)ng/L,与空白对照组相比,差异有统计学意义(P〈0.05或0.()1)。结论棕榈酸可促进HaCaT细胞增殖,并在一定浓度内剂量依赖性增强NF—κB核转移、IL-6及PPARa表达量,在激活和促进相关炎症因子表达中起到一定作用。
张倩
周炳荣
骆丹
方晓波
尹慧彬
郭泽
吴唯
关键词:
棕榈酸
角蛋白细胞
细胞增殖
强脉冲光-光动力疗法治疗光老化的进展
被引量:1
2014年
皮肤光老化的机制及治疗是近些年皮肤科关注的热点,如何有效延缓或逆转光老化的进程,达到美容嫩肤的效果具有重要的应用价值。强脉冲光一光动力疗法作为一种非剥脱性光子嫩肤术,显示出广阔的应用前景。比较几种光敏剂的性状及疗效,提出如何优化治疗方案、达到满意疗效的同时降低不良反应具有临床意义。强脉冲光一光动力疗法治疗皮肤光老化的细胞和分子机制尚不十分明确,研究表明其能显著改善皮肤超微结构,可能是通过真皮成纤维细胞的细胞外信号调节激酶通路发挥作用,是否影响其他老化相关的通路,尚需进一步研究。
张丽超
周炳荣
骆丹
关键词:
细胞衰老
脂肪干细胞在皮肤光老化中的作用
被引量:3
2014年
脂肪干细胞是存在于脂肪组织中的一种成体干细胞,具有来源丰富、可反复取材、痛苦小、易扩增、能安全植入同体或异体等优点,已成为组织工程理想的种子细胞。基于其多潜能分化和旁分泌功能,新近认为是继胚胎干细胞、骨髓干细胞之后的又一热点。已发现脂肪干细胞及其可溶性因子具有促进伤口愈合、促进成纤维细胞增殖、抗氧化、抗皱纹、美白皮肤等作用,在皮肤抗衰老领域有应用潜力。
王申
周炳荣
骆丹
关键词:
细胞衰老
干细胞
脂细胞
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