国家自然科学基金(30671989)
- 作品数：9 被引量：41H指数：3
- 相关作者：袁劲徐逸周鸿敏何文涛吴轲更多>>
- 相关机构：华中科技大学教育部武汉大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划湖北省杰出青年人才基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Galeetin-9（Tim-3L）显著减弱小鼠移植排斥
- 2009年
- 目的探究Galectin-9（即Tcell immunoglobulin domain and mucin domain protein-3 lig-and，Tim-3L）的真核定位与功能，及其对同种异基因排斥反应的影响。方法PCR扩增Galectin-9片段，插入到pEGFP—N1质粒，转染中国仓鼠卵巢癌细胞系（CHO）行G418筛选，分选增强型绿色荧光蛋白（EGFP）阳性细胞。免疫组化检测Galectin-9的表达，Alamar Blue法检测稳定转染Galectin-9的CHO细胞及其新鲜培养上清对脾细胞增殖的影响，ELISA检测IL-2水平。给予BALB／c→C57BL／6心脏移植受鼠Galectin-9蛋白100μg×7d。结果Galectin-9表达于细胞浆，稳定转染Galectin-9-EGFP的CHO细胞上清抑制淋巴细胞增殖和IL-2的产生。上述效应可被Tim-3-Fc融合蛋白逆转。Galectin-9干预的心脏移植物中位生存时间明显延长[（22．7±1．2）d，（7．2±0．4）d）]。结论真核细胞中Galectin．9可通过分泌形式负调节同种异基因免疫；Galectin-9有望成为新型的抗排斥药物。
- 何文涛袁劲方泽民汪峰徐逸周鸿敏高英张维娜王璐陈忠华
- 关键词：TIM-3GALECTIN-9免疫抑制小鼠
- 不同浓度右美托咪啶对小儿麻醉后血清肌钙蛋白I、C反应蛋白以及补体水平的影响被引量：3
- 2015年
- 目的:探讨不同浓度右美托咪啶对小儿麻醉后血清肌钙蛋白I、C反应蛋白(CRP)及补体水平的影响。方法:选取我院收治的拟行手术的患儿60例,根据应用右美托咪定的浓度随机分为A、B、C三组,每组各20例。A、B组患儿予右美托咪啶0.5、0.25μg/kg的负荷剂量静脉推注给药10分钟,然后以0.2-0.7μg/kg/h的速度持续静脉微量泵入维持患者镇静状态,C组直接以右美托咪啶0.2-0.7μg/kg/h的速度持续泵入维持镇静状态。比较三组患儿麻醉术后的苏醒情况,麻醉前后不同时点血清肌钙蛋白I、C反应蛋白及补体水平的变化。结果:治疗前,三组患儿的各项指标比较均无统计学差异(P>0.05);治疗后,与A、C两组比较,B组患者自主呼吸恢复时间、气管导管拔管时间、解除监护时间显著缩短(P<0.05),术后24、72 h血清CRP水平更低,术后1、6、24 h血清肌钙蛋白I水平较低(P<0.05),术后1、24、72 h血清补体水平较高(P<0.05)。结论:0.25μg/kg浓度的右美托咪啶对于对小儿麻醉后血清肌钙蛋白I、C反应蛋白及补体水平的影响明显,且有助于患儿术后的苏醒。
- 严世平杨红珍范彬宋爱敏占大兴
- 关键词：右美托咪啶肌钙蛋白IC反应蛋白补体
- 转化生长因子β_1对同种反应性T细胞增殖能力及CD25表达的影响被引量：11
- 2007年
- 目的:研究转化生长因子β1(TGF-β1)对同种反应性T细胞增殖能力及CD25表达水平的影响。方法:以丝裂霉素处理的Balb/C(H-2d)小鼠脾细胞为刺激细胞,羧基荧光素乙酰乙酸(CFDA-SE)标记的C57BL/6(H-2b)小鼠T细胞为反应细胞进行混合淋巴细胞培养(MLC)。分别设立对照组(TGF-β10 ng/ml)、低浓度组(TGF-β11ng/ml)、中浓度组(TGF-β15 ng/ml)和高浓度组(TGF-β120 ng/ml)。MLC结束后利用Alamar Blue检测T细胞增殖活性,流式细胞仪检测CD3、CD25表达水平。同时设立白细胞介素-2(IL-2)组(TGF-β15ng/ml+IL-2 100U/ml),以观测其对TGF-β1生物学效应的影响。结果:TGF-β1可明显降低同种抗原活化T细胞的增殖反应强度,而且随着TGF-β1剂量加大,免疫抑制能力增强。TGF-β1在抑制T细胞增殖的同时,也可使CD25+T细胞比例上调,但并无明显的剂量依赖性。加入外源性IL-2后,T细胞增殖活性增强,同时CD25+T细胞比例降低。结论:TGF-β1可明显抑制同种抗原活化T细胞的增殖,并使CD25+T细胞比例增加,而外源性IL-2则可逆转TGF-β1的免疫抑制功能,下调CD25+T细胞比例,说明外源性IL-2可以影响TGF-β1的生物学效应。
- 袁劲吴轲向芙莉曾宁周鸿敏陈忠华
- 关键词：转化生长因子Β1白细胞介素-2CD25
- 重组小鼠Galectin-9在大肠杆菌中的表达以及体外功能检测被引量：1
- 2007年
- 本研究旨在构建重组Galectin-9（半乳糖凝集素9）原核表达质粒，并对表达蛋白进行纯化和功能学鉴定。
- 汪峰何文涛袁劲吴柯周鸿敏徐逸高英陈忠华
- 关键词：大肠杆菌体外小鼠原核表达质粒半乳糖凝集素
- 小鼠galectin-9可通过分泌形式诱导Tim-3^-T细胞凋亡
- 2010年
- 目的 构建小鼠galectin-9重组腺病毒pAd-gal-9,探讨galectin-9的真核表达定位以及galectin-9诱导T细胞凋亡与Tim-3表达的关系.方法 常规分子克隆方法 结合LR反应构建腺病毒重组质粒pAd/CMV/V5-DEST-gal-9,以Pac I线性化后,用脂质体2000体外转染293A细胞,8 d后反复冻融细胞3次收集含病毒上清,并以此上清感染293A细胞大量扩增病毒pAd-gal-9.CsCI密度梯度离心法纯化病毒,96孔板法梯度感染293A细胞测定病毒滴度,然后感染CHO细胞,用免疫组化、Western blot和流式细胞仪分析galectin-9的表达水平和定位;以新鲜培养的上清或固相化的细胞分别与外周淋巴结细胞进行培养,AnnexinV/PI法检测T细胞凋亡情况,对比凋亡细胞比例与Tim-3^＋ T细胞的比例.结果 重组腺病毒构建及表达成功,免疫组化表明galectin-9在CHO胞质表达;Westernblot证实galectin-9表达;流式分析表明胞内染色组galectin-9平均荧光强度显著高于表面染色组,病毒感染CHO表面染色组与空白对照组galectin-9平均荧光强度无明显区别;新鲜培养的上清可以明显诱导T细胞发生凋亡,显著高于Tim-3^＋ T细胞的比例.结论 重组腺病毒pAd-gal-9构建成功,体外感染pad-gal-9的CHO分泌galectin-9诱导T细胞凋亡可以不依赖Tim-3的表达.
- 何文涛袁劲徐逸周鸿敏蔡兰军郭晖李超左利群宫念樵陈忠华
- 关键词：凋亡T细胞
- 天麻素对全麻宫颈癌根治术患者术后认知功能及S-100β影响被引量：4
- 2015年
- 目的:探讨天麻素对全身麻醉下宫颈癌根治术患者术后认知功能及S-100β的影响。方法:选取我院妇科收治的宫颈癌患者86例,随机数字表法分为两组,两组患者均在全身麻醉下行全子宫双附件切除联合盆腔淋巴结清扫术。对照组术后予以抗感染、肠外营养支持等常规术后治疗,实验组术后常规治疗的基础上加用天麻素注射液。两组患者分别于麻醉前、手术后6 h、1 d、3 d及7 d测定MMSE评分及血中S-100β水平。结果:两组患者全麻宫颈癌根治术后均出现中度认知障碍,MMSE评分较麻醉前下降,与对照组同期比较,实验组术后3天、7天MMES评分较高,差异具有统计学意义(P<0.05);两组患者宫颈癌根治术后血中S-100β蛋白水平升高,与对照组同期比较,实验组术后1 d、3 d与7d S-100β水平较低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:天麻素能够明显改善全麻宫颈癌根治术患者术后认知功能障碍,降低S-100β蛋白水,提高术后恢复效果,对临床具有指导意义。
- 朱彬田华曹晓霞何永冠向定玺向登国
- 关键词：天麻素宫颈癌全身麻醉S-100Β蛋白
- TGF-β1诱导CD4^+CD25^-T细胞分化为CD4^+CD25^+调节性T细胞被引量：20
- 2007年
- 目的研究TGF-β1诱导CD4+CD25+调节性T细胞分化的能力及其相关机理。方法①利用丝裂霉素处理的Balb/C裸鼠脾细胞(同种抗原)刺激C57BL/6小鼠T细胞,同时给予TGF-β1予以干预(按TGF-β1剂量不同设立4组:对照组,低浓度组,中浓度组和高浓度组),共同培养5天后,用流式细胞仪检测CD4+CD25+T细胞比例;同时用RT-PCR检测培养细胞中Foxp3的表达水平。②在第一部分实验基础上,通过MACS分离获取C57BL/6小鼠CD4+CD25-T细胞,用同种抗原刺激后,给予TGF-β1干预,培养5d后分离CD4+CD25+T细胞,利用混合淋巴细胞培养系统检测其抑制淋巴细胞增殖的能力。结果T细胞经同种抗原刺激后,在中、高浓度TGF-β1诱导下CD4+CD25+T细胞比例均明显升高,Foxp3的表达水平也相应增加,与对照组相比有显著性差异(P<0.05)。TGF-β1可直接诱导CD4+CD25-T细胞转化为CD4+CD25+T细胞,转化后的CD4+CD25+T细胞可有效抑制淋巴细胞增殖。结论TGF-β1可诱导CD4+CD25-T细胞转化为CD4+CD25+Treg,促进其表达Foxp3,并能够抑制淋巴细胞增殖。
- 袁劲吴轲徐逸曾宁陈忠华
- 关键词：TGF-Β1FOXP3调节性T细胞
- TGF—β1诱导的调节性T细胞体内输注延长小鼠皮肤移植物存活
- 2008年
- 目的利用TGF-β1体外诱导naiveT细胞分化为调节性T细胞（Treg），通过体内输注延长小鼠皮肤移植物存活时间，并研究其相关机制。方法根据诱导条件不同分为3组：对照组（加入IL-2培养的C57BL／6小鼠T细胞）、MLR组（即混合淋巴细胞反应组，经同种抗原刺激活化的C57BL／6小鼠T细胞）和TGF-β组（经同种抗原刺激活化的C57BL／6小鼠T细胞，同时加入5．0ng／ml TGF-β1诱导）。利用FACS检测CD4^＋CD25^＋T细胞比例，并用RT—PCR检测Foxp3的表达水平。建立小鼠皮肤移植模型，并于第0、1、2和3天输注上述细胞，观察皮肤移植物存活时间。术后第9天，取部分受鼠行移植物病理检测，用FACS检测脾脏中TH1、TH2和CD4^＋CD25^＋Treg比例，并用AlamarBlue法检测淋巴细胞增殖能力。结果TGF-β组中CD4^＋CD25^＋T细胞比例高于对照组和MLR组（P〈0．05），且其高表达Foxp3。将培养的细胞输注给受鼠后发现，输注MLR组细胞的受鼠其移植物平均存活时间（mean survival time，MST）为（9．4±1．3）d，低于对照组（P〈0．05）；而输注TGF-β组细胞小鼠MST为（22．8±1．9）d，较对照组和MLR组明显延长（P〈0．05）。病理检测亦显示TGF-β组受鼠移植物结构完整，无明显淋巴细胞浸润。FACS结果显示TGF-β组小鼠体内TH1细胞（CD4^＋TIM-3^＋）比例低于对照组和MLR组（P〈0．05），而TH2细胞（CD4^＋TIM-1^＋）比例则与MLR组类似（P〉0．05），但低于对照组（P〈0．05）；而且TGF-β组中CD4^＋CD25^＋Treg比例明显高于对照组和MLR组（P〈0．05）。用AlamarBlue法检测受鼠外周淋巴细胞增殖活性显示，TGF-β组受鼠淋巴细胞增殖能力被明显抑制，低于对照组（P〈0．05）。结论TGF-β，可诱导T细胞分化为具有抑制能力的Treg，将诱导后的细胞进行过继输注可使小鼠体内CD4^＋CD25^＋T。比例升高，同时抑制TH1和TH2细胞分化扩增，并�
- 袁劲吴轲何文涛汪峰陈忠华
- 关键词：调节性T细胞皮肤移植
- 不同剂量右美托咪定对肺癌根治术后认知功能的影响被引量：2
- 2015年
- 目的:探讨不同剂量右美托咪定麻醉对肺癌根治术患者术后认知功能的影响。方法:选取我院收治的肺癌根治术患者60例,根据不同剂量的右美托咪定分为A组(高剂量)、B组(低剂量组)及C组(不加右美托咪定),每组各20例。比较三组患者治疗前后超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)、苏醒时间、拔管时间以及认知功能。结果:三组患者的基线资料及术中情况比较无差异,P>0.05;术后SOD水平呈先降低后升高的趋势,MDA呈先升高后降低的趋势。A组在第三天时SOD值较其他两组高,MDA在第1天与第3天时较其他两组低,P<0.05;术后1天认知程度比较,A组认知功能较其他两组高,P<0.05;三组苏醒时间和拔管时间相比较,A组明显优于其他两组,P<0.05。结论:右美托咪定麻醉能够降低氧化应激损伤,影响肺癌根治术患者术后认知功能,缩短苏醒时间、拔管时间。
- 喻金政罗丹张安传张宏张传汉陈忠华
- 关键词：肺癌术后肺癌根治术
